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脱水时间对超低温保存橡胶树花药愈伤组织生理指标的影响
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作者 周权男 吉辛 +4 位作者 吴胤乐 李季 杨先锋 吴日智 黄天带 《热带作物学报》 北大核心 2025年第9期2127-2134,共8页
超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrific... 超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrification solution,PVS)PVS2中分别脱水0、10、20、40 min后进行超低温保存24 h,分析脱水时间对超低温保存前后愈伤组织中可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性等生理指标的影响。结果显示:脱水时间对超低温保存后花药愈伤组织中可溶性蛋白、MDA含量、SOD和POD活性具有显著影响(P<0.05),而对CAT活性无显著影响。除MDA外,超低温保存后每个脱水时间的各生理指标值均高于保存前。脱水40 min的花药愈伤组织超低温保存后,其可溶性蛋白含量、CAT、SOD和POD活性均达最大值,分别为129.63μg/mL、627.30 U/g、290.38 U/g、25643.33 U/g,MDA含量最低,为41.31 nmol/g,表明脱水40 min可明显增强超低温保存后愈伤组织细胞的持水能力和抗氧化水平。进一步对脱水40 min后超低温保存的花药愈伤组织进行复苏,平均存活率在70%以上,且能诱导易碎胚性愈伤系的形成,平均诱导率为13.33%,为橡胶树花药愈伤组织超低温保存再生奠定生理基础。 展开更多
关键词 橡胶树 花药愈伤组织 超低温保存 脱水时间 生理指标 存活率
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硝酸银对橡胶树次生体胚发生的影响研究
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作者 田雯 张子愉 +6 位作者 徐正伟 王笑一 周权男 吉辛 吴日智 夏薇 黄天带 《热带作物学报》 北大核心 2025年第5期1107-1115,共9页
橡胶树次生体胚循环增殖技术实现了橡胶树体胚苗(自根幼态无性系)规模化繁育。该技术需要将子叶胚切成2 mm×2 mm的胚块,伤口部位会产生大量的乙烯及活性氧,培养过程中也会形成较多乙烯和活性氧,乙烯及活性氧对橡胶树体胚发生产生... 橡胶树次生体胚循环增殖技术实现了橡胶树体胚苗(自根幼态无性系)规模化繁育。该技术需要将子叶胚切成2 mm×2 mm的胚块,伤口部位会产生大量的乙烯及活性氧,培养过程中也会形成较多乙烯和活性氧,乙烯及活性氧对橡胶树体胚发生产生不利影响。硝酸银(AgNO_(3))是乙烯抑制剂,同时影响酶的活性。本文研究了不同硝酸银浓度(0、2.5、5.0、10.0、15.0 mg/L)处理不同时间(7、14、21、28 d)对橡胶树胚块褐化及次生体胚发生的影响,并评估了再生植株的表型及倍性。结果表明:AgNO_(3)可明显减轻胚块褐化情况,减少胚块活性氧的产生,5.0~15.0 mg/L AgNO_(3)处理较2.5 mg/L效果更好,AgNO_(3)处理21 d较其他3个处理时间效果好;2.5~15.0 mg/L AgNO_(3)处理7~28 d未显著增加出胚胚块数,但5.0 mg/L AgNO_(3)处理21、28 d,10.0 mg/L AgNO_(3)处理21 d,15.0 mg/L AgNO_(3)处理7~21 d子叶胚数显著高于对照;出胚胚块数与褐化呈负相关,但未达显著水平,子叶胚数与褐化呈显著负相关;AgNO_(3)处理的再生植株表型与对照无明显差异,染色体倍性与对照相同。本研究结果为提高橡胶树次生体胚发生效率提供技术支撑。 展开更多
关键词 橡胶树 硝酸银 褐化 乙烯 体胚诱导
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橡胶树不同发育时期花药愈伤生长发育对低温的响应
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作者 王梦澳 李娜 +5 位作者 吴日智 周权男 彭素娜 杨先锋 黄天带 曾长英 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第9期1877-1885,共9页
橡胶树花药再生体系是我国最早建立的橡胶树体胚植株再生技术体系,其产生的再生植株为自根幼态无性系,兼具实生苗生长迅速、抗逆性强和芽接苗遗传同质的优点,同时因发育时期从老态恢复至幼态,产量提升20%以上。然而每年花蕾采集期约为6... 橡胶树花药再生体系是我国最早建立的橡胶树体胚植株再生技术体系,其产生的再生植株为自根幼态无性系,兼具实生苗生长迅速、抗逆性强和芽接苗遗传同质的优点,同时因发育时期从老态恢复至幼态,产量提升20%以上。然而每年花蕾采集期约为60d,无法全年供应由花药壁细胞脱分化形成的愈伤组织,造成依托于该材料的研究无法持续进行。本研究以橡胶树品种热研73397雄蕊为材料,研究不同发育时期的花药愈伤(0、7、14、21、28、35、42 d)在15、20℃两个低温下保存15 d其愈伤诱导和体细胞胚发生发育的情况。结果表明:15℃和20℃两个温度对低温保存后愈伤诱导、体细胞胚发生各阶段除胚性愈伤数显著低于对照组外,其余无显著影响;发育时期对低温保存后愈伤诱导、体细胞胚发生各阶段均有显著影响(P<0.05),对子叶胚形成阶段影响最大,其中21d和35d花药愈伤组织经低温保存后其子叶胚数量分别显著高于和低于对照组子叶胚(P<0.05);15℃和20℃低温保存15 d后不同发育时期花药愈伤组织与对照组相比,可延长花药初代愈伤供应时间15~60 d,初代子叶胚供应时间27~95 d。最优方案为发育时期21 d的花药愈伤在15℃低温下保存15 d,可延长花药愈伤和初代子叶胚供应60 d和60~95 d,该处理虽降低了46.61%愈伤数,但促进了子叶胚形成,子叶胚数提高了27.18%。本研究实现了橡胶树花药愈伤的短期保存,有效解决了因花期短导致遗传转化受体来源不足的困难,全年3个花季可开展实验时间由60 d延长至240 d,有助于加快橡胶树花药愈伤遗传转化体系优化研究。 展开更多
关键词 橡胶树 遗传转化 花药愈伤 低温保存 体细胞胚发生
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