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马铃薯Y病毒属病毒6K2蛋白叶绿体定位的机制解析
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作者 赵金鹏 向小华 +4 位作者 张喜峰 杜林林 孙炳剑 汪敏 孙航军 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期985-992,共8页
【目的】明确影响马铃薯Y病毒属病毒6K2蛋白叶绿体定位的结构域。【方法】6K2蛋白分为N端结构域、中间跨膜结构域与C端结构域,分别将6K2蛋白N段结构域、跨膜结构域、C段结构域缺失突变,构建6K2^(PVYΔN)、6K2^(PVYΔC)、6K2^(PVYΔNΔC)... 【目的】明确影响马铃薯Y病毒属病毒6K2蛋白叶绿体定位的结构域。【方法】6K2蛋白分为N端结构域、中间跨膜结构域与C端结构域,分别将6K2蛋白N段结构域、跨膜结构域、C段结构域缺失突变,构建6K2^(PVYΔN)、6K2^(PVYΔC)、6K2^(PVYΔNΔC)、6K2^(TuMVΔN)、6K2^(TuMVΔC)、6K2^(TuMVΔNΔC)突变体。将6K2PVY与6K2^(TuMV)跨膜区的GxxxG基序分别突变,构建6K2PVY GV、6K2^(TuMV)GV突变体,通过激光共聚焦显微镜观察不同6K2-RFP突变体亚细胞定位。将PVY与TuMV编码的6K2蛋白不同结构域重组,构建6K2^(PPT)、6K2^(PTT)、6K2^(TPT)、6K2^(TTP)、6K2^(TPP)、6K2^(PTP)重组蛋白,观察不同6K2-RFP重组蛋白的亚细胞定位。【结果】6K2^(TuMV),突变体6K2^(TuMVΔN)、6K2^(TuMVΔC)、6K2^(TuMVΔN)ΔC、6K2^(PVYΔC)、6K2^(PVYΔNΔC),重组蛋白6K2^(PPT)、6K2^(PTT)、6K2TPT定位于叶绿体。6K2PVY,突变体6K2^(PVYΔN),重组蛋白6K2^(TTP)、6K2^(TPP)、6K2^(PTP)不定位于叶绿体。【结论】马铃薯Y病毒属病毒6K2蛋白的跨膜结构域决定其叶绿体定位,而6K2^(PVY)的C端结构域干扰其叶绿体定位,6K2^(PVY)与6K2^(TuMV)的C端结构域的差异导致了其不同亚细胞定位。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒属 6K2蛋白 叶绿体 跨膜结构域 亚细胞定位
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