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利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株
被引量：
1
1
作者
沈洪波
韩峰
+2 位作者
林育姿
韩文君
于文功
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期175-180,共6页
本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp．QDA褐藻多糖（alginate）生物合成操纵元中的algG基因为靶点，利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径，以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株。首先，利用PCR克隆幽G基因两侧大小分别为1．7kb和1．...
本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp．QDA褐藻多糖（alginate）生物合成操纵元中的algG基因为靶点，利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径，以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株。首先，利用PCR克隆幽G基因两侧大小分别为1．7kb和1．8kb的DNA片段作为同源片段，用编码Gm抗性的aacCl基因替换algG基因，构建成打靶载体pEX100TUDG。将打靶载体转入QDA，利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养，通过PCR和Southern杂交验证，获得了突变菌株。^1H—NMR、PAGE和GPC分析发现，突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸。该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源，为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持。
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关键词
多聚甘露糖醛酸
途径工程
假单胞菌
差向异构酶
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职称材料
题名
利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株
被引量：
1
1
作者
沈洪波
韩峰
林育姿
韩文君
于文功
机构
中国海洋大学海洋药物与食品研究所教育部海洋药物重点实验室
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期175-180,共6页
基金
国家自然科学基金委员会面上基金（30371683）资助项目.
文摘
本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp．QDA褐藻多糖（alginate）生物合成操纵元中的algG基因为靶点，利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径，以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株。首先，利用PCR克隆幽G基因两侧大小分别为1．7kb和1．8kb的DNA片段作为同源片段，用编码Gm抗性的aacCl基因替换algG基因，构建成打靶载体pEX100TUDG。将打靶载体转入QDA，利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养，通过PCR和Southern杂交验证，获得了突变菌株。^1H—NMR、PAGE和GPC分析发现，突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸。该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源，为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持。
关键词
多聚甘露糖醛酸
途径工程
假单胞菌
差向异构酶
Keywords
inannuronan, pathway engineering, Pseudomonas strains, mannuronan C-5-epimerase
分类号
Q53 [生物学—生物化学]
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株
沈洪波
韩峰
林育姿
韩文君
于文功
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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