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罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用
1
作者
黄笑
王国浩
+4 位作者
董宣
唐琼英
段虎
杨国梁
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024年第4期187-194,共8页
细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建...
细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建立罗氏沼虾病毒–宿主互作的体外研究平台,本研究采用木瓜蛋白酶消化健康罗氏沼虾的脑、眼柄、胸神经节和腹神经节,获取罗氏沼虾神经细胞,并利用L-15培养基进行离体培养。选择培养效果最佳的脑神经细胞进行IPV体外感染。结果显示,培养的原代细胞在含有谷氨酰胺的L-15培养基中生长良好,其中,从脑组织和眼柄X器官–窦腺复合体中分离出的细胞在体外存活时间可达15d,从胸腹神经节中分离出来的细胞在体外存活时间达9 d。在本研究所采用的感染方式和剂量条件下,脑细胞在感染96 h后检测到高载量的IPV。本研究建立了一种操作简便的罗氏沼虾神经细胞原代培养技术,为罗氏沼虾神经内分泌研究和病毒–宿主互作提供了基础数据和平台。
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关键词
罗氏沼虾
神经细胞
原代培养
传染性早熟病毒
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职称材料
opaR基因缺失对AHPND致病菌生物学特性及毒力质粒接合转移的影响
2
作者
王利莹
董宣
+5 位作者
王国浩
王德浩
谢景媚
罗婧斐
王显伟
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024年第4期155-165,共11页
急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)严重影响了我国乃至全球对虾养殖业的发展。近期研究发现,致病菌毒力质粒携带trb型Ⅳ型分泌系统(typeⅣsecretion system, T4SS)可在高菌体密度下介导毒力质粒发生接...
急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)严重影响了我国乃至全球对虾养殖业的发展。近期研究发现,致病菌毒力质粒携带trb型Ⅳ型分泌系统(typeⅣsecretion system, T4SS)可在高菌体密度下介导毒力质粒发生接合转移,从而导致AHPND致病菌多样性。为探究群体感应与T4SS表达以及毒力质粒接合转移的关系,本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)群体感应系统的高密度调控子OpaR为研究对象,在致AHPND副溶血弧菌20130629002S01::cat(Vp2S01::cat)菌株基础上,利用同源重组技术构建opaR基因缺失株Vp2S01::catΔopaR。比较了出发菌株和缺失株在生长性能、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异,分析了opaR基因对T4SS基因表达量以及质粒接合转移效率的影响。结果显示,opaR基因缺失不影响细菌的生长特性和群集运动,但泳动能力显著增加,生物被膜形成能力显著下降;接合转移实验显示,opaR基因缺失显著提高T4SS表达水平和接合转移效率。本研究为解析群体感应系统调控AHPND致病菌T4SS表达以及毒力质粒接合转移机制提供了基础数据,可为控制AHPND致病菌毒力质粒传播提供技术支撑。
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关键词
副溶血弧菌
opaR基因
生物学特性
Ⅳ型分泌系统
水平转移
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职称材料
题名
罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用
1
作者
黄笑
王国浩
董宣
唐琼英
段虎
杨国梁
黄倢
机构
湖州师范
学
院浙江省水生
生物
资源养护与开发技术
研究
重点
实验室
中国
水产
科学研究院
水生动物繁育与营养
重点
实验室
中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科技中心海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室
江苏数丰
水产
种业有限公司
天津
科技
大
学
海洋
与环境
学
院
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024年第4期187-194,共8页
基金
青岛市市南区科技计划(2022-2-027-ZH)
国家现代农业产业技术体系(CARS-48)
中国水产科学研究院基本科研业务费(2020TD39)共同资助。
文摘
细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建立罗氏沼虾病毒–宿主互作的体外研究平台,本研究采用木瓜蛋白酶消化健康罗氏沼虾的脑、眼柄、胸神经节和腹神经节,获取罗氏沼虾神经细胞,并利用L-15培养基进行离体培养。选择培养效果最佳的脑神经细胞进行IPV体外感染。结果显示,培养的原代细胞在含有谷氨酰胺的L-15培养基中生长良好,其中,从脑组织和眼柄X器官–窦腺复合体中分离出的细胞在体外存活时间可达15d,从胸腹神经节中分离出来的细胞在体外存活时间达9 d。在本研究所采用的感染方式和剂量条件下,脑细胞在感染96 h后检测到高载量的IPV。本研究建立了一种操作简便的罗氏沼虾神经细胞原代培养技术,为罗氏沼虾神经内分泌研究和病毒–宿主互作提供了基础数据和平台。
关键词
罗氏沼虾
神经细胞
原代培养
传染性早熟病毒
Keywords
Macrobrachium rosenbergii
Neural cells
Primary culture
Infectious precocity virus
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
opaR基因缺失对AHPND致病菌生物学特性及毒力质粒接合转移的影响
2
作者
王利莹
董宣
王国浩
王德浩
谢景媚
罗婧斐
王显伟
黄倢
机构
上海
海洋
大
学
水产
与生命
学
院
海水
养殖
育种与可持续
产出
全国
重点
实验室
(
中国
水产
科学研究院
黄海
水产
研究所
)
青岛
海洋
科技中心
海洋渔业
科学与
食物
产出
过程
功能
实验室
农业
农村部
海水
养殖
病害
防治
重点
实验室
青岛市
海水
养殖
流行病
学
与生物
安保
重点
实验室
天津农
学
院
水产
学
院
山东大
学
生命
科学
学
院
亚太
水产
养殖
中心
网
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024年第4期155-165,共11页
基金
国家自然科学基金(31802342)
中国水产科学研究院黄海水产研究所基本科研业务费(20603022022005)
中国水产科学研究院基本科研业务费(2020TD39)共同资助。
文摘
急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)严重影响了我国乃至全球对虾养殖业的发展。近期研究发现,致病菌毒力质粒携带trb型Ⅳ型分泌系统(typeⅣsecretion system, T4SS)可在高菌体密度下介导毒力质粒发生接合转移,从而导致AHPND致病菌多样性。为探究群体感应与T4SS表达以及毒力质粒接合转移的关系,本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)群体感应系统的高密度调控子OpaR为研究对象,在致AHPND副溶血弧菌20130629002S01::cat(Vp2S01::cat)菌株基础上,利用同源重组技术构建opaR基因缺失株Vp2S01::catΔopaR。比较了出发菌株和缺失株在生长性能、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异,分析了opaR基因对T4SS基因表达量以及质粒接合转移效率的影响。结果显示,opaR基因缺失不影响细菌的生长特性和群集运动,但泳动能力显著增加,生物被膜形成能力显著下降;接合转移实验显示,opaR基因缺失显著提高T4SS表达水平和接合转移效率。本研究为解析群体感应系统调控AHPND致病菌T4SS表达以及毒力质粒接合转移机制提供了基础数据,可为控制AHPND致病菌毒力质粒传播提供技术支撑。
关键词
副溶血弧菌
opaR基因
生物学特性
Ⅳ型分泌系统
水平转移
Keywords
Vibrio parahaemolyticus
opaR gene
Biological characteristics
TypeⅣsecretion system
Horizontal transfer
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用
黄笑
王国浩
董宣
唐琼英
段虎
杨国梁
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
opaR基因缺失对AHPND致病菌生物学特性及毒力质粒接合转移的影响
王利莹
董宣
王国浩
王德浩
谢景媚
罗婧斐
王显伟
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2024
0
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