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嗜水气单胞菌毒力因子检测及不同毒力基因型菌株对剑尾鱼的致病性研究
被引量：
7
1
作者
任燕
孙承文
+3 位作者
石存斌
潘厚军
陶家发
吴淑勤
《广东农业科学》
CAS
2015年第17期113-117,共5页
选取嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)的4种主要胞外毒力因子(气溶素、溶血素、胞外蛋白酶和细胞毒性肠毒)设计合成4对引物,对2008—2009年广东、江西两省的临床分离菌株进行检测,评价菌株毒力基因的分布特征及其毒力强弱。60株...
选取嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)的4种主要胞外毒力因子(气溶素、溶血素、胞外蛋白酶和细胞毒性肠毒)设计合成4对引物,对2008—2009年广东、江西两省的临床分离菌株进行检测,评价菌株毒力基因的分布特征及其毒力强弱。60株临床分离株中,具有4种毒力基因(aer+hly A+epa+act+)的菌株占58.33%(35/60),是主要毒力基因型;其他25株的毒力基因有不同数量缺失。不同基因型的代表菌株对剑尾鱼攻击试验结果表明,嗜水气单胞菌毒力因子之间表现出协同作用,aer+hly A+epa+act+型的毒力最强,对剑尾鱼的致死率最高。
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关键词
嗜水气单胞菌
气溶素
溶血素
胞外蛋白酶
细胞毒性肠毒素
毒力基因
剑尾鱼
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职称材料
鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立
被引量：
8
2
作者
刘春
李凯彬
+4 位作者
王庆
王芳
曾伟伟
石存斌
吴淑勤
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期54-57,共4页
为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 b...
为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375 bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102cfu。特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性。应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究。
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关键词
舒伯特气单胞菌
gyrB基因
hlyA基因
双重PCR
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职称材料
鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用
被引量：
2
3
作者
刘春
陈晓虹
+8 位作者
姜兰
曹际振
李凯彬
王英英
常藕琴
王芳
石存斌
林明辉
王庆
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第3期661-666,共6页
为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pMDmCherry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱...
为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pMDmCherry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱德华氏菌显示特异性红色荧光。稳定性检测结果表明,标记菌株传至28代,重组质粒稳定率仍为100%。用标记菌株感染斑马鱼仔鱼后,能在激光共聚焦显微镜下实时观察到细菌在鱼体内的分布情况;标记菌株体外感染小鼠巨噬细胞后,也能观察到病原菌与巨噬细胞的相互作用情况。说明标记菌株具有良好的特异性和可视性,为鮰爱德华氏菌对宿主的致病性研究提供了一种良好的生物材料。
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关键词
鮰爱德华氏菌
红色荧光蛋白
斑马鱼
巨噬细胞
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职称材料
题名
嗜水气单胞菌毒力因子检测及不同毒力基因型菌株对剑尾鱼的致病性研究
被引量：
7
1
作者
任燕
孙承文
石存斌
潘厚军
陶家发
吴淑勤
机构
中国
水产
科学研究院
珠江
水产
研究所
/
农业部
渔
药
创制
重点
实验室
/广东省
水产
动物
免疫
技术
重点
实验室
出处
《广东农业科学》
CAS
2015年第17期113-117,共5页
基金
国家公益性行业(农业)科研专项(2008 03013)
国家科技支撑计划项目(2012BAD25B02)
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46)
文摘
选取嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)的4种主要胞外毒力因子(气溶素、溶血素、胞外蛋白酶和细胞毒性肠毒)设计合成4对引物,对2008—2009年广东、江西两省的临床分离菌株进行检测,评价菌株毒力基因的分布特征及其毒力强弱。60株临床分离株中,具有4种毒力基因(aer+hly A+epa+act+)的菌株占58.33%(35/60),是主要毒力基因型;其他25株的毒力基因有不同数量缺失。不同基因型的代表菌株对剑尾鱼攻击试验结果表明,嗜水气单胞菌毒力因子之间表现出协同作用,aer+hly A+epa+act+型的毒力最强,对剑尾鱼的致死率最高。
关键词
嗜水气单胞菌
气溶素
溶血素
胞外蛋白酶
细胞毒性肠毒素
毒力基因
剑尾鱼
Keywords
Aeromonas hydrophila
aerolysin （ aer ）
hemolysin A （ hlyA ）
extracellar protease （ epa ）
cytotoxic enterotoxin （ act ）
virulence genes
swordtail
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立
被引量：
8
2
作者
刘春
李凯彬
王庆
王芳
曾伟伟
石存斌
吴淑勤
机构
中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔药创制重点实验室/广东省水产动物免疫技术重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期54-57,共4页
基金
国家科技支撑计划(2012BAD25B02)
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-46)
文摘
为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375 bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102cfu。特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性。应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究。
关键词
舒伯特气单胞菌
gyrB基因
hlyA基因
双重PCR
Keywords
Aeromonas schubertii
gyrB gene
hlyA gene
duplex PCR
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用
被引量：
2
3
作者
刘春
陈晓虹
姜兰
曹际振
李凯彬
王英英
常藕琴
王芳
石存斌
林明辉
王庆
机构
中国
水产
科学研究院
珠江
水产
研究所
/
农业部
渔
药
创制
重点
实验室
/广东省
水产
动物
免疫
技术
重点
实验室
华南
农业
大学
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第3期661-666,共6页
基金
中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2017HY-ZC0406)
现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46)
广东省科技计划项目(2016A030303028、2017A040403008)
文摘
为研究鮰爱德华氏菌与宿主的相互作用关系,本研究构建带有红色荧光蛋白基因的pMDmCherry表达载体,通过电击转化法将载体成功导入鮰爱德华氏菌zbl141菌株中,获得了红色荧光蛋白标记的鮰爱德华氏菌菌株。在倒置荧光显微镜下观察,重组鮰爱德华氏菌显示特异性红色荧光。稳定性检测结果表明,标记菌株传至28代,重组质粒稳定率仍为100%。用标记菌株感染斑马鱼仔鱼后,能在激光共聚焦显微镜下实时观察到细菌在鱼体内的分布情况;标记菌株体外感染小鼠巨噬细胞后,也能观察到病原菌与巨噬细胞的相互作用情况。说明标记菌株具有良好的特异性和可视性,为鮰爱德华氏菌对宿主的致病性研究提供了一种良好的生物材料。
关键词
鮰爱德华氏菌
红色荧光蛋白
斑马鱼
巨噬细胞
Keywords
Edwardsiella ictaluri
mCherry fluorescent protein
zebrafish
macrophages
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
嗜水气单胞菌毒力因子检测及不同毒力基因型菌株对剑尾鱼的致病性研究
任燕
孙承文
石存斌
潘厚军
陶家发
吴淑勤
《广东农业科学》
CAS
2015
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立
刘春
李凯彬
王庆
王芳
曾伟伟
石存斌
吴淑勤
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
鮰爱德华氏菌的红色荧光蛋白标记及其应用
刘春
陈晓虹
姜兰
曹际振
李凯彬
王英英
常藕琴
王芳
石存斌
林明辉
王庆
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2019
2
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