我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状调查及对策研究 被引量：2

1

作者 王勤 刘晓飞 +5 位作者 冯春燕 仇松寅 李晓琳 刘丹丹 梅琳 林祥梅 《中国动物检疫》 CAS 2015年第11期57-60,共4页

动物检疫诊断试剂盒是口岸把关所依靠的主要工具,是构建我国生物安全防线的重要组成部分。本文基于全国进出境动物检疫试剂盒的使用情况调查数据(2009—2012年),分析汇总了近年来我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状,阐述了目前试剂盒... 动物检疫诊断试剂盒是口岸把关所依靠的主要工具,是构建我国生物安全防线的重要组成部分。本文基于全国进出境动物检疫试剂盒的使用情况调查数据(2009—2012年),分析汇总了近年来我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状,阐述了目前试剂盒在使用中主要存在的三个问题:依赖进口,自主知识产权试剂盒偏少;缺少质量评价体系,导致试剂盒质量存在隐患;缺少应急储备。有针对性地提出了建立试剂质量评价体系、统筹推动自主知识产权试剂盒的应用、建立应急储备机制的建议。 展开更多

关键词 进出境动物检疫 试剂盒 调查

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非传统安全视角下的口岸动物检疫形势分析与对策 被引量：4

2

作者 吴绍强 林祥梅 《中国动物检疫》 CAS 2015年第9期22-25,34,共5页

本文从国家总体安全观的角度,系统阐述了口岸动物检疫工作对国家安全尤其是经济安全、社会安全、资源安全以及生态安全等非传统安全的影响。结合目前我国进出口贸易新业态和国内外动物疫病新形势,分析了口岸检疫工作中面临的挑战和存在... 本文从国家总体安全观的角度,系统阐述了口岸动物检疫工作对国家安全尤其是经济安全、社会安全、资源安全以及生态安全等非传统安全的影响。结合目前我国进出口贸易新业态和国内外动物疫病新形势,分析了口岸检疫工作中面临的挑战和存在的问题,并就如何加强基于风险的动物检疫监管和加强动物疫病监测预警、检测溯源和新型处理科学技术研究等方面提出建议。 展开更多

关键词 非传统安全 动物检疫 形势分析 对策

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野生反刍动物心水病研究进展

3

作者 王彩霞 冯春燕 +5 位作者 刘丹丹 张永宁 杜方原 刘晓飞 林祥梅 吴绍强 《动物医学进展》 北大核心 2018年第3期79-83,共5页

心水病是由反刍动物埃立克体引起的一种急性、致死性的蜱传反刍动物传染病。该病不但可以使家养反刍动物发病,还可以使野生反刍动物发病,对野生动物及野生环境造成极大的危害和污染。论文从心水病的历史及地理分布、病原学、流行病学、... 心水病是由反刍动物埃立克体引起的一种急性、致死性的蜱传反刍动物传染病。该病不但可以使家养反刍动物发病,还可以使野生反刍动物发病,对野生动物及野生环境造成极大的危害和污染。论文从心水病的历史及地理分布、病原学、流行病学、临床症状、检测方法、发病机制、疫苗,进口野生动物传入心水病的风险分析及口岸防控措施等方面进行了综述,旨在为野生反刍动物心水病的检测与防控研究提供参考。 展开更多

关键词 心水病 野生动物 蜱 反刍动物埃立克体

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对动物检疫中检测试剂使用问题的探讨

4

作者 李晓琳 吴绍强 +4 位作者 景宏丽 王勤 刘晓飞 仇松寅 林祥梅 《中国动物检疫》 CAS 2018年第7期31-34,共4页

进出境动物检疫是保护国门生物安全的重要举措,而规范、合格的检疫试剂是检疫任务顺利完成的前提。文中分析了近几年动物检疫常用检测试剂的对比研究文献,发现在动物检疫实际工作中,因检测靶标和方法不同,往往导致结果出现差异,同时检... 进出境动物检疫是保护国门生物安全的重要举措,而规范、合格的检疫试剂是检疫任务顺利完成的前提。文中分析了近几年动物检疫常用检测试剂的对比研究文献,发现在动物检疫实际工作中,因检测靶标和方法不同,往往导致结果出现差异,同时检测试剂的诊断敏感性和特异性也会影响检测结果的准确性。在对相应问题分析的基础上,提出了建立标准化、规范化的质量评价体系,依据检测目的选择相应试剂,以及加强自主研发,提高检测水平等建议,以期为进出境动物检疫常用试剂的选用提供依据。 展开更多

关键词 动物检疫 检测试剂 检测靶标 诊断性能 进出境

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塞内卡病毒病研究进展 被引量：19

5

作者 张永宁 吴绍强 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1381-1388,共8页

塞内卡病毒病是由微RNA病毒科的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)引起的动物传染病,主要感染猪,不同年龄阶段的猪均易感,但不同毒株的致病力明显不同,引起的临床症状也不尽相同。早期的分离株多导致亚临床感染,近年来的分离株通常引起... 塞内卡病毒病是由微RNA病毒科的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)引起的动物传染病,主要感染猪,不同年龄阶段的猪均易感,但不同毒株的致病力明显不同,引起的临床症状也不尽相同。早期的分离株多导致亚临床感染,近年来的分离株通常引起口蹄疫样的临床症状,病猪口鼻部、蹄部出现水疱、溃疡,新生仔猪死亡率显著增加。目前,该病主要流行于加拿大、巴西和美国等国家;2015年以来,我国广东和湖北两省某些猪场相继发生SVA疫情。为提高人们对该病的认识和重视,及早做好相关防控预案和检测技术储备,笔者从病原学、流行病学、临床症状与病理变化、检疫与诊断、防控措施等方面对取得的最新研究进展进行概述。 展开更多

关键词 塞内卡病毒病 A型塞内卡病毒 水疱 检疫 防控

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赤羽病研究概况 被引量：17

6

作者 李晓琳 吴绍强 +4 位作者 王勤 刘晓飞 景宏丽 仇松寅 林祥梅 《动物医学进展》 北大核心 2018年第8期106-109,共4页

赤羽病是由赤羽病病毒引起的一种虫媒传染病,该病在热带和温带的许多国家和我国大部分地区广泛流行,给世界畜牧业造成了巨大的经济损失。赤羽病毒属于布尼病毒科布尼病毒属辛波血清群,主要通过吸血昆虫(如蚊和库蠓)叮咬易感反刍动物进... 赤羽病是由赤羽病病毒引起的一种虫媒传染病,该病在热带和温带的许多国家和我国大部分地区广泛流行,给世界畜牧业造成了巨大的经济损失。赤羽病毒属于布尼病毒科布尼病毒属辛波血清群,主要通过吸血昆虫(如蚊和库蠓)叮咬易感反刍动物进行传播,怀孕绵羊、山羊和牛最易感,临床上以流产、早产、死胎和先天性畸形为特征。论文对赤羽病病原学、流行病学、发病机制与病理变化、诊断及防控措施等方面的进展进行综述,以期为预防控制赤羽病的发生和流行提供参考。 展开更多

关键词 赤羽病 诊断 防控

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施马伦贝格病研究进展 被引量：9

7

作者 张永宁 吴绍强 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1029-1037,共9页

施马伦贝格病是自2011年夏季以来在欧洲新发的一种虫媒性病毒病,其病原为施马伦贝格病毒,主要感染绵羊、牛和山羊等反刍动物,可导致成年家畜生产性能下降,怀孕母畜发生流产、产死胎或畸形胎儿。截至目前,中国尚未出现相关疫情。笔者将... 施马伦贝格病是自2011年夏季以来在欧洲新发的一种虫媒性病毒病,其病原为施马伦贝格病毒,主要感染绵羊、牛和山羊等反刍动物,可导致成年家畜生产性能下降,怀孕母畜发生流产、产死胎或畸形胎儿。截至目前,中国尚未出现相关疫情。笔者将从病原学、流行病学、临床症状、发病机制与病理变化、检疫与诊断、预警与防控等方面对取得的最新研究进展进行概述,以期增强人们对该病的认识,并为中国有关部门采取恰当的防控措施提供科学依据。 展开更多

关键词 施马伦贝格病 施马伦贝格病毒 虫媒性病毒病 检疫 防控

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小反刍兽疫诊断及其免疫防制的研究进展 被引量：13

8

作者 袁向芬 吴绍强 林祥梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期195-199,共5页

小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminantsvirus,PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病,目前已给中国养羊业造成巨大损失与威胁。作者对PPR的流行病学、诊断... 小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminantsvirus,PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病,目前已给中国养羊业造成巨大损失与威胁。作者对PPR的流行病学、诊断方法及疫苗研制进展等方面作一简要综述,以期为该病的防控提供有效的参考。 展开更多

关键词 小反刍兽疫 流行病学 诊断 疫苗

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国内外兽药管理比较研究 被引量：2

9

作者 葛林 刘晓飞 +1 位作者 王勤 王忠田 《中国兽药杂志》 北大核心 2017年第8期73-77,共5页

兽药在防治动物疫病、提高养殖效益、保障公共卫生安全中发挥着重要作用,随着公众对公共卫生安全、食品安全要求的逐步提高,我国兽药管理领域面临残留监控、产业监管、耐药性管控等多重挑战。本文简要发达国家兽药监管模式及法律基础,... 兽药在防治动物疫病、提高养殖效益、保障公共卫生安全中发挥着重要作用,随着公众对公共卫生安全、食品安全要求的逐步提高,我国兽药管理领域面临残留监控、产业监管、耐药性管控等多重挑战。本文简要发达国家兽药监管模式及法律基础,并结合我国兽药管理实际进行了比较研究,提出了进一步完善兽药管理体制的意见建议。 展开更多

关键词 兽药 监管 建议

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兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术研究进展 被引量：1

10

作者 樊翀宇 吕继洲 +1 位作者 杨晓野 吴绍强 《动物医学进展》 北大核心 2016年第8期87-90,共4页

感染兔的艾美耳属球虫主要有11种,其对世界养兔业的危害日益严重。论文综述了国内外兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术的研究进展,基于不同靶标序列分类总结和分析了鉴定技术的优点和存在的问题,展望了未来兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技... 感染兔的艾美耳属球虫主要有11种,其对世界养兔业的危害日益严重。论文综述了国内外兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术的研究进展,基于不同靶标序列分类总结和分析了鉴定技术的优点和存在的问题,展望了未来兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术的应用前景和发展趋势,以期为兔艾美耳球虫病的诊断、预防和控制提供技术手段和方法依据。 展开更多

关键词 兔 艾美耳球虫 分子生物学 鉴定技术

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转基因大动物常用载体频数分析及筛查策略

11

作者 刘晓飞 王勤 +3 位作者 李晓琳 刘丹丹 仇松寅 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2239-2248,共10页

构建重组表达载体是转基因动物生产制备研究中非常关键的一步,包括构建完整的外源基因表达盒,包含目的基因、调控序列(启动子、终止子)和筛选报告基因等。本文概述了转基因大动物制备技术,归纳统计了近10年转基因猪、牛、羊制备过程中... 构建重组表达载体是转基因动物生产制备研究中非常关键的一步,包括构建完整的外源基因表达盒,包含目的基因、调控序列(启动子、终止子)和筛选报告基因等。本文概述了转基因大动物制备技术,归纳统计了近10年转基因猪、牛、羊制备过程中常用的载体和频数,统计结果表明,转基因猪中启动子频数从多到少依次为酪蛋白、CAG、CMV启动子,终止子频数依次为兔β-globin poly A、酪蛋白poly A、SV40poly A和BGH poly A;转基因羊中启动子频数从多到少依次为酪蛋白、BLG和CMV启动子,终止子依次为酪蛋白poly A、BLG poly A、BGH poly A、SV40poly A和兔β-globin poly A;转基因牛中启动子频数从多到少依次为酪蛋白、CMV、人乳清白蛋白启动子等,终止子依次为SV40poly A、BGH poly A和酪蛋白poly A。根据统计结果提出针对启动子和终止子的多重检测和筛查策略;分析了未来转基因动物检测可能存在的问题,以期对转基因动物的监管和筛查检测方法的建立提供参考。 展开更多

关键词 转基因大动物 载体 检测

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出口动物及动物产品传带新型冠状病毒风险评估

12

作者 刘晓飞 仇松寅 +3 位作者 鲁畅 冯春燕 林祥梅 吴绍强 《中国动物检疫》 CAS 2020年第7期38-42,共5页

在全球多地发生新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情的背景下,已有部分国家(地区)对我国货物贸易进行管制。为维护我国正常出口贸易秩序,参考世界卫生组织、世界动物卫生组织等国际组织的疫病风险分析流程,对我国出口动物及动物产品传带新... 在全球多地发生新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情的背景下,已有部分国家(地区)对我国货物贸易进行管制。为维护我国正常出口贸易秩序,参考世界卫生组织、世界动物卫生组织等国际组织的疫病风险分析流程,对我国出口动物及动物产品传带新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的风险进行定性分析。分析认为:目前我国出口活动物感染或携带SARS-CoV-2的风险极低;按照正常程序生产和加工的出口动物源性产品携带、污染并传播SARS-CoV-2的风险极低;我国相关部门已采取了的严格的防控措施,最大程度降低了出口动物及动物源性产品的SARS-CoV-2污染风险。综上,我国出口动物及动物产品携带或传播SARS-CoV-2的风险极低。建议各国通过共同协作,加强COVID-19防控,以降低COVID-19对相互间出口贸易的影响。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 动物及动物产品 风险评估 出口

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施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 被引量：11

13

作者 张永宁 吴绍强 +6 位作者 吕继洲 冯春燕 王彩霞 袁向芬 邓俊花 林祥梅 Wernike Kerstin 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1629-1636,共8页

本研究旨在表达施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)的核衣壳蛋白(N),进而制备其多克隆抗体。以SBV(BH80株)的RNA为模板,RT-PCR扩增N基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a-c(+)中,获得pET-28a-SBV-N重组质粒。经酶切和测序鉴... 本研究旨在表达施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)的核衣壳蛋白(N),进而制备其多克隆抗体。以SBV(BH80株)的RNA为模板,RT-PCR扩增N基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a-c(+)中,获得pET-28a-SBV-N重组质粒。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达HisSBV-N融合蛋白。在非变性条件下用Ni-NTA柱纯化His-SBV-N,并以此为抗原免疫新西兰大白兔制备多抗。经免疫亲和层析纯化后,利用Western blot和间接免疫荧光对多抗进行鉴定。结果表明:(1)His-SBV-N融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中同时以可溶性和包涵体2种形式表达,相对分子质量约为30ku;(2)制备的多抗效价高达1∶64 000。该多抗不仅能与His-SBV-N融合蛋白发生特异性反应,而且还能识别SBV的不同毒株,但与布尼亚病毒科内亲缘关系最近的沙门达病毒(Shamonda virus)、道格拉斯病毒(Douglas virus)和赤羽病病毒(Akabane virus)的核衣壳蛋白存在交叉反应。His-SBV-N融合蛋白及其多抗的成功制备,为施马伦贝格病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体 免疫亲和层析

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非洲猪瘟病毒主要抗原p54-1的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定 被引量：20

14

作者 王彩霞 冯春燕 +4 位作者 杜方原 刘丹丹 张永宁 林祥梅 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第10期2823-2830,共8页

为进一步深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的主要抗原表位及抗原性质,本试验根据GenBank中p54基因序列(登录号:NC_001659.2)设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接表达载体pGEX6p-1构建pGEX6p-1-p54-1原核... 为进一步深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的主要抗原表位及抗原性质,本试验根据GenBank中p54基因序列(登录号:NC_001659.2)设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接表达载体pGEX6p-1构建pGEX6p-1-p54-1原核表达质粒;将该质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,切除GST标签后采用阴离子柱纯化目的蛋白并鉴定;将纯化蛋白与佐剂混合乳化后作为免疫原,免疫小鼠制备p54-1蛋白多克隆抗体;采用ELISA和Western blotting检测抗体的效价和反应特性。结果显示,重组p54-1融合蛋白以可溶形式表达,切除标签后的纯化蛋白能够与ASFV阳性血清发生反应,而与PRRSV和PCV3不发生反应。利用该蛋白免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶128 000。Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能够识别ASFV p54蛋白。表明本研究成功获得了较高纯度的p54-1蛋白,制备的p54-1多克隆抗体具有较高反应性和特异性,为后续非洲猪瘟双抗夹心ELISA检测方法的建立提供依据。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) p54蛋白 原核表达 多克隆抗体

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A型塞内卡病毒VP2蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量：19

15

作者 张永宁 张舟 +4 位作者 诸明欣 梅琳 王彩霞 吴绍强 林祥梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期256-263,共8页

本研究旨在表达A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的衣壳蛋白VP2,并制备其多克隆抗体。以SVA GD01/2017分离株RNA为模板,RT-PCR扩增VP2基因序列,并克隆至原核表达载体pET-30a(+)中构建重组质粒pET-30a-SVA-VP2。经测序鉴定后,将重组质... 本研究旨在表达A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的衣壳蛋白VP2,并制备其多克隆抗体。以SVA GD01/2017分离株RNA为模板,RT-PCR扩增VP2基因序列,并克隆至原核表达载体pET-30a(+)中构建重组质粒pET-30a-SVA-VP2。经测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达。在非变性条件下,利用Ni-NTA琼脂糖树脂从菌体裂解液上清中纯化重组SVA VP2蛋白,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用Protein A Sepharose CL-4B树脂从兔血清中亲和层析纯化多克隆抗体,并对其进行间接免疫荧光分析。结果显示,重组SVA VP2蛋白以可溶性和包涵体两种形式在大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞内进行表达,分子质量约为47ku;制备的兔抗VP2蛋白多克隆抗体效价高达1∶64 000,该多克隆抗体仅识别SVA,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、脑心肌炎病毒、猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒等常见猪病原无交叉反应,表明制备的多克隆抗体具有良好的特异性。重组SVA VP2蛋白及其多克隆抗体的成功制备为猪塞内卡病毒病血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。 展开更多

关键词 A型塞内卡病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体

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同时检测贝类派琴虫和包纳米虫的双重LAMP方法的建立 被引量：13

16

作者 王彩霞 冯春燕 +4 位作者 王巧黎 袁向芬 邓俊花 吕继洲 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期1935-1942,共8页

为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18SrRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同... 为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18SrRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同时还进行了特异性检测和敏感性检测,并通过对扩增产物进行限制性内切酶酶切检验双重LAMP方法的准确性。结果表明本研究建立的贝类寄生虫双重LAMP方法具有较好的特异性,检测派琴虫时的最低检测限为10拷贝/μL质粒DNA,检测包纳米虫时的最低检测限为100拷贝/μL质粒DNA,同时酶切试验也验证了双重LAMP检测结果的准确性。对随机采自东海和黄海的20份菲律宾蛤仔和10份美国进口牡蛎的检测结果显示,该双重LAMP方法在口岸检疫工作中可以作为派琴虫和包纳米虫的快速检测方法。 展开更多

关键词 贝类寄生虫病 环介导等温扩增反应(LAMP) 检测 派琴虫 包纳米虫

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拉合尔钝缘蜱的形态学及分子生物学鉴定 被引量：11

17

作者 吕继洲 赵丽 +3 位作者 赵昱林 韩雪清 王慧煜 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1149-1158,共10页

试验旨在建立拉合尔钝缘蜱的分子生物学鉴定方法。从新疆地区绵羊体表采集寄生蜱,借助体视显微镜和电子显微镜对其进行形态学特征的准确鉴别,初步筛选出疑似拉合尔钝缘蜱。经PCR扩增、测序获得其18S rDNA、16S rDNA及线粒体色素氧化酶... 试验旨在建立拉合尔钝缘蜱的分子生物学鉴定方法。从新疆地区绵羊体表采集寄生蜱,借助体视显微镜和电子显微镜对其进行形态学特征的准确鉴别,初步筛选出疑似拉合尔钝缘蜱。经PCR扩增、测序获得其18S rDNA、16S rDNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ基因(cytochrome oxidaseⅠ,COⅠ)序列,结合GenBank数据库中参考序列,比对分析同源性并构建系统进化树,进行遗传距离评估。本研究全面、清晰地揭示了拉合尔钝缘蜱卵圆形背板、背部圆形盘窝等显微形态特征的细节。同时,在基于16SrDNA与COⅠ序列的邻位相接系统进化树中,拉合尔钝缘蜱分布于两大进化枝之一的软蜱科,同种聚类良好,且拉合尔钝缘蜱种内K2P遗传距离为0~0.3%,本研究方法可快速、准确鉴定拉合尔钝缘蜱物种。 展开更多

关键词 线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ基因 16S RDNA 18S RDNA 拉合尔钝缘蜱 形态学特征 分子鉴定

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猪流行性腹泻病毒实时荧光RPA等温检测方法的建立 被引量：10

18

作者 吕继洲 范燕茹 +2 位作者 冯春燕 袁向芬 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3434-3439,共6页

为建立一种简单、快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)分子检测方法,本研究基于PEDV病毒M基因保守序列,设计一系列扩增引物及其荧光探针,以包含PEDV病毒M基因片段的pUC57质粒为模板,同时以包含猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病... 为建立一种简单、快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)分子检测方法,本研究基于PEDV病毒M基因保守序列,设计一系列扩增引物及其荧光探针,以包含PEDV病毒M基因片段的pUC57质粒为模板,同时以包含猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)及古典猪瘟病毒(CSFV)等病毒膜蛋白或核衣壳蛋白基因序列的质粒作为对照,建立了一种PEDV实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法,测定了方法的特异性与敏感性。结果表明,该实时荧光RPA方法可在39℃恒温反应20min特异性扩增PEDV病毒M基因,与TGEV、PRRSV等对照病毒基因无交叉反应,其检测限为10拷贝/μL。应用该实时荧光RPA方法可有效检测出血浆及血浆蛋白粉中的PEDV核酸。本研究建立的实时荧光RPA检测方法简单、快速、灵敏度高,可为PEDV的检测防控提供一种新的、可靠的技术支持。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 分子检测 重组酶聚合酶扩增(RPA) 等温扩增

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进口俄罗斯牛肉传入牛结节性皮肤病风险评估 被引量：8

19

作者 仇松寅 刘晓飞 +2 位作者 李霆 王勤 吴绍强 《中国动物检疫》 CAS 2020年第1期20-25,共6页

依照世界动物卫生组织《陆生动物卫生法典》中的动物及动物产品进境风险分析框架,采用定性评估方法,对俄罗斯输华牛肉开展牛结节性皮肤病传入风险评估。评估认为,在不采取检疫监管措施的情况下,牛结节性皮肤病随俄罗斯进口牛肉传入的风... 依照世界动物卫生组织《陆生动物卫生法典》中的动物及动物产品进境风险分析框架,采用定性评估方法,对俄罗斯输华牛肉开展牛结节性皮肤病传入风险评估。评估认为,在不采取检疫监管措施的情况下,牛结节性皮肤病随俄罗斯进口牛肉传入的风险为“中”,暴露风险为“低”,后果风险为“高”,综合风险为“中”。由此,建议采取产地牛源控制、疫源监测检测以及加强宰前宰后检验和牛肉进口检疫监管等措施,防范牛结节性皮肤病随俄罗斯牛肉进口传入我国。 展开更多

关键词 牛结节性皮肤病 风险评估 传入风险 进口牛肉 俄罗斯

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检测施马伦贝格病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法 被引量：3

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作者 张永宁 吴绍强 +5 位作者 吕继洲 冯春燕 王彩霞 邓俊花 袁向芬 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1824-1829,共6页

根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系。利... 根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系。利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证。结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4%(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应。用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品。SBV荧光定量RTPCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核酸 引物 TAQMAN探针 荧光定量RT-PCR

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