植物体细胞胚胎发生及其相关应答基因的研究进展 被引量：2

1

作者 张蕾 韩素英 +1 位作者 张守攻 齐力旺 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期1-5,共5页

体细胞胚胎发生途径不仅是植物大规模克隆繁殖的重要途径,也是研究从单细胞到整体植株发育全过程的理想试验体系。植物体细胞胚胎发生的研究已经取得了很大的进展,但是也依然存在许多问题。根据近年来的相关研究报道,简述植物体细胞胚... 体细胞胚胎发生途径不仅是植物大规模克隆繁殖的重要途径,也是研究从单细胞到整体植株发育全过程的理想试验体系。植物体细胞胚胎发生的研究已经取得了很大的进展,但是也依然存在许多问题。根据近年来的相关研究报道,简述植物体细胞胚胎发生及此过程中相关应答基因的研究概况,探讨植物体细胞胚胎发生的生理生化基础,并对今后应该加强研究的关键问题提出了自己的看法。 展开更多

关键词 植物 体细胞胚发生 生理生化基础 应答基因

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落叶松体细胞胚萌发能力研究 被引量：4

2

作者 李哲馨 李万峰 +1 位作者 韩素英 齐力旺 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2017年第6期999-1003,共5页

[目的]研究落叶松体细胞胚萌发能力,为落叶松在应用方面规模化繁殖提供理论依据。[方法]以落叶松体胚性细胞系S287的成熟体细胞胚为材料,区分了落叶松体细胞胚的不同子叶形态;进行树脂切片及显微观察后,对其萌发能力进行了统计;并利用... [目的]研究落叶松体细胞胚萌发能力,为落叶松在应用方面规模化繁殖提供理论依据。[方法]以落叶松体胚性细胞系S287的成熟体细胞胚为材料,区分了落叶松体细胞胚的不同子叶形态;进行树脂切片及显微观察后,对其萌发能力进行了统计;并利用外源施用激素的方法研究了影响落叶松体胚再生成苗的重要因子。[结果]成熟的落叶松体细胞胚主要以四种形态存在,分别是正常子叶胚(NC≥4),裂生子叶胚(2<NC<4),杯状胚(NC=1)以及畸形胚。纵切结构观察显示前三种体胚都能发育出完整的SAM和RAM,萌发率依次为17.2%,12.4%和5.7%,而畸形胚不具有完整的SAM和RAM,在萌发培养基上不能生根,并很快死亡。针对萌发率低的现状,进一步施用不同浓度的GA3和IAA发现,只有2 mg·L-1IAA对落叶松体胚生根具有明显的促进作用,其萌发率达到了56%,且在后期存活率仍能保持较高水平。[结论]IAA在落叶松体细胞胚萌发中发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 落叶松 体细胞胚再生体系 萌发率 IAA

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miR396在落叶松体细胞胚胎中的功能研究 被引量：1

3

作者 肖霞 张立峰 +1 位作者 齐力旺 韩素英 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2016年第2期227-233,共7页

[目的]探讨miR396在落叶松体细胞胚胎发生中的功能。以期该研究能为解决体胚发育中子叶畸形胚与生根率低的问题提供新的视角,同时也为进一步揭示体胚发育的分子调控网络做基础铺垫。[方法]构建pre-miR396超表达载体,通过农杆菌介导侵染,... [目的]探讨miR396在落叶松体细胞胚胎发生中的功能。以期该研究能为解决体胚发育中子叶畸形胚与生根率低的问题提供新的视角,同时也为进一步揭示体胚发育的分子调控网络做基础铺垫。[方法]构建pre-miR396超表达载体,通过农杆菌介导侵染,将pre-miR396转入落叶松胚性细胞中,筛选稳定抗性细胞系。在DNA与RNA水平上,对抗性细胞系进行的鉴定、检测,同时统计比对其与野生细胞系间发芽率、叶片数目以及生根率的差异。[结果]在抗性细胞系基因组中,扩增出HTP与miR396的特异性片段,且无农杆菌Virg基因片段。RNA表达水平上,抗性系pre-miR396与miR396表达皆增加,而靶基因La GRFs的表达量下调。统计表明抗性系胚的发芽率、生根率、叶片数目畸形率分别为70.60%、0.60%、37%,而野生型分别为92.50%、10.55%、4%,抗性系胚的发芽率、生根率显著降低(Sig.=0.000),叶片数目畸形率显著增加(Sig.=0.000)。[结论]miR396在落叶松体细胞胚胎发生过程中,可能通过负调节靶基因La GRFs的表达或者通过La GRFs影响与它相互作用的基因,参与体胚子叶原基细胞代谢,从而影响了子叶与叶片的发育;通过负调节La GRFs或者其它与根部发育相关的靶基因,影响了根端分生区细胞的活动,参与调控根的发育。 展开更多

关键词 落叶松 体细胞胚胎 转基因 miR396 生长调节因子 发芽率 生根率 叶片数目

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落叶松体细胞胚胎发生诱导多倍体的研究 被引量：1

4

作者 张清国 韩素英 +1 位作者 梁国鲁 齐力旺 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期78-82,共5页

通过检测细胞系增值率及细胞分裂指数确定细胞系分裂最旺盛时期,利用秋水仙素和氨磺灵诱导落叶松多倍体体细胞胚胎的发生,揭示了两种抗微管物质对落叶松体细胞胚胎发生的影响。秋水仙素在浓度为500 mg·L^-1,浸泡处理36 h时能使多... 通过检测细胞系增值率及细胞分裂指数确定细胞系分裂最旺盛时期,利用秋水仙素和氨磺灵诱导落叶松多倍体体细胞胚胎的发生,揭示了两种抗微管物质对落叶松体细胞胚胎发生的影响。秋水仙素在浓度为500 mg·L^-1,浸泡处理36 h时能使多倍体体细胞胚胎发生的比例达到85.2%,体细胞胚发生率达到351.1个/g;氨磺灵在1-5 mg·L^-1的浓度下处理后的细胞系几乎失去体细胞胚分化能力,无法大量获得多倍体体细胞胚。通过细胞压片及去壁-低渗涂片对比观察发现氨磺灵诱导后的细胞系除了染色体数目加倍外还有部分细胞发生程序性死亡。该研究初步证明了秋水仙素较适合落叶松多倍体体细胞胚的诱导,氨磺灵对落叶松毒害明显,不适合其多倍体的诱导。 展开更多

关键词 秋水仙素 落叶松 氨磺灵 多倍体 体细胞胚胎发生

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落叶松繁殖与育种研究中的干细胞发育模型

5

作者 徐海燕 李龙 +2 位作者 肖霞 韩素英 齐力旺 《生物产业技术》 2013年第3期12-17,共6页

落叶松是我国北方中高山地区重要的针叶速生造林用材树种,基于落叶松体细胞胚胎发生模型的优质落叶松速生及转基因育种等品种改良技术,是世界林业研究关注的焦点.本文重点介绍了以落叶松体细胞胚胎发生体系为基础的快速繁殖、转基因育... 落叶松是我国北方中高山地区重要的针叶速生造林用材树种,基于落叶松体细胞胚胎发生模型的优质落叶松速生及转基因育种等品种改良技术,是世界林业研究关注的焦点.本文重点介绍了以落叶松体细胞胚胎发生体系为基础的快速繁殖、转基因育种技术及基础研究方法与技术,并对其中存在的问题进行了讨论与阐释. 展开更多

关键词 转基因育种技术 发育模型 快速繁殖 落叶松 体细胞胚胎发生 干细胞 品种改良技术 基础研究

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落叶松干细胞发育模型研究中的高通量测序技术

6

作者 张媛 肖霞 +2 位作者 张俊红 齐力旺 韩素英 《生物产业技术》 2013年第4期51-55,共5页

后基因组时代的生命科学研究对每一位林业科学工作者来说都充满了挑战。随着“后基因组时代”的到来，国际学术界已经认识到发展低成本、高效率的测序技术的重要，陛。在这样的背景下，高通量测序技术应运而生，成为DNA测序发展历程的... 后基因组时代的生命科学研究对每一位林业科学工作者来说都充满了挑战。随着“后基因组时代”的到来，国际学术界已经认识到发展低成本、高效率的测序技术的重要，陛。在这样的背景下，高通量测序技术应运而生，成为DNA测序发展历程的一个新的里程碑，为现代生命科学领域的研究提供了前所未有的机遇。其代表性技术平台有Roche的454N序技术、Illumina的Solexa测序技术、microRNA微阵列芯片技术及降解组高通量测序技术。目前，此系列技术在模式植物中挖掘关键基因的研究已经非常成熟。在林木领域，尤其是在尚无参考基因组和基因组信息庞大的裸子植物中的应用逐渐成为研究热点，并已经取得了很大的进展。 展开更多

关键词 测序技术 高通量 发育模型 后基因组时代 干细胞 落叶松 MICRORNA 现代生命科学

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植物抗旱相关基因研究进展 被引量：6

7

作者 史胜青 齐力旺 +2 位作者 孙晓梅 韩素英 张守攻 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期6-13,共8页

遭遇极端温度、干旱、高盐等胁迫时,植物需要调控多种基因,通过多种途径来抵御非生物胁迫的伤害。综述了植物在干旱胁迫发生时,信号传导和转录因子相关调控基因以及在水分运输、抗脱水、渗透调节以调节气孔开关等功能相关基因克隆的研... 遭遇极端温度、干旱、高盐等胁迫时,植物需要调控多种基因,通过多种途径来抵御非生物胁迫的伤害。综述了植物在干旱胁迫发生时,信号传导和转录因子相关调控基因以及在水分运输、抗脱水、渗透调节以调节气孔开关等功能相关基因克隆的研究进展,并提出了今后开展植物抗逆研究的建议。 展开更多

关键词 干旱胁迫 信号传导 基因克隆 调控基因 功能基因

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杨属派间核型比较研究 被引量：3

8

作者 陈成彬 张守攻 +3 位作者 李秀兰 韩素英 宋文芹 齐力旺 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期338-340,352,i0004,共5页

对杨属五派代表种的核型进行了分析,各代表种核型公式如下:欧洲山杨(白杨派)2n=2x=38=21m(2SAT)+4sm+13st(1SAT);小叶杨(青杨派)2n=2x=38=1M+26m(1SAT)+8sm(1SAT)+1st+2t(1SAT);大叶杨(大叶杨派)2n=2x=38=2M+22m+8sm+6st;胡杨(胡杨派)2n... 对杨属五派代表种的核型进行了分析,各代表种核型公式如下:欧洲山杨(白杨派)2n=2x=38=21m(2SAT)+4sm+13st(1SAT);小叶杨(青杨派)2n=2x=38=1M+26m(1SAT)+8sm(1SAT)+1st+2t(1SAT);大叶杨(大叶杨派)2n=2x=38=2M+22m+8sm+6st;胡杨(胡杨派)2n=2x=38=2M+23m+3sm+10st(2SAT);箭杆杨(黑杨派)2n=2x=38=3M+29m(2SAT)+5sm+1st。杨属派间核型差异主要表现在中部与次中部着丝点(M,m)和近端部与端部着丝点(st,t)染色体数目上。白杨派和胡杨派具较多的st、t染色体,核型不对称系数比其它派高。按Stebbins理论白杨派和胡杨派属进化类型。 展开更多

关键词 白杨派 青杨派 大叶杨派 胡杨派 黑杨派 核型比较

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中间锦鸡儿(caranaga intermedia)染色体变异研究 被引量：3

9

作者 胡钠梅 韩素英 +1 位作者 梁国鲁 齐力旺 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期204-208,共5页

对中间锦鸡儿(caranaga intermedia)种子根尖染色体进行检测,统计分析了染色体数目和结构变异类型。核型分析结果表明中间锦鸡儿正常核型为2n=2x=16=14m+2sm,还发现了核型公式为2n=2x=16+1B=1st+9m+2sm+1m(SAT)+1sm(SAT) +2m(SAT)+1B;... 对中间锦鸡儿(caranaga intermedia)种子根尖染色体进行检测,统计分析了染色体数目和结构变异类型。核型分析结果表明中间锦鸡儿正常核型为2n=2x=16=14m+2sm,还发现了核型公式为2n=2x=16+1B=1st+9m+2sm+1m(SAT)+1sm(SAT) +2m(SAT)+1B;核型公式为2n=2x=16+1B=6sm+8m+2m(SAT)+1B;以及核型公式为2n=2x=15=7sm+8m的变异类型。本研究首次发现了中间锦鸡儿存在B染色体和中间随体,此外还发现存在单体植株。随体具有个体差异,有中间随体和端部随体两种,且无论个体间和个体内B染色体均存在数目和结构的多态性。对其中120粒种子根尖染色体结果统计分析。发现具有15条染色体的植株占0.83%;具有16条染色体的植株占89.17%;具有17条染色体的植株占3.3%;具有18条染色体的植株占2.5%,其中有一个体中多于的一条染色体始终呈点状;19条染色体的植株占1.67%,5条多于染色体的占0.83%,而多余染色体条数在1～3之间变动的植株占1.67%。 展开更多

关键词 中间锦鸡儿 核型 B染色体 随体染色体

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部分落叶松属植物核型研究

10

作者 刘博 陈成彬 +3 位作者 李秀兰 张守攻 齐力旺 韩素英 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期187-191,共5页

对落叶松属的兴安落叶松、长白落叶松、日本落叶松、华北落叶松、欧洲落叶松、美洲落叶松等6个种和日本落叶松×长白落叶松杂种进行了核型分析,所有材料的染色体数目均为2n=2x=24,2A核型。所有种的核型有着共同的构型,即二型核型。... 对落叶松属的兴安落叶松、长白落叶松、日本落叶松、华北落叶松、欧洲落叶松、美洲落叶松等6个种和日本落叶松×长白落叶松杂种进行了核型分析,所有材料的染色体数目均为2n=2x=24,2A核型。所有种的核型有着共同的构型,即二型核型。根据核型特征,可将以上各种分为三组:兴安落叶松、长白落叶松、日本落叶松为第一组,核型公式为2n=12m+10sm+2st;欧洲落叶松、美洲落叶松为第二组,核型公式为2n=12m+12sm;华北落叶松虽然具有与第二组相同的核型公式,但核型的对称性与其有一定差距,因此单独构成第三组。日本落叶松×长白落叶松杂种的核型数据和两个亲本的十分接近,表明这两个种杂交后染色体可能未发生明显的结构变异。作者认为长白落叶松和兴安落叶松的核型特征比较接近,从细胞学的角度作者支持长白落叶松作为兴安落叶松变种的观点。 展开更多

关键词 落叶松属 日本落叶松×长白落叶松杂种 核型研究

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落叶松体细胞胚成熟阶段差异表达的基因及部分基因的表达谱分析 被引量：2

11

作者 张蕾 齐力旺 韩素英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期540-545,共6页

为研究落叶松体细胞胚胎发生的分子机理,文章以日本落叶松×华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y35体细胞胚成熟阶段培养物的cDNA为实验组,继代培养阶段胚性愈伤组织的cDNA为对照组,利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hy... 为研究落叶松体细胞胚胎发生的分子机理,文章以日本落叶松×华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y35体细胞胚成熟阶段培养物的cDNA为实验组,继代培养阶段胚性愈伤组织的cDNA为对照组,利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)构建了体细胞胚成熟阶段的差异表达基因文库。随机选取800个阳性克隆进行测序,共获得468个UniGenes,共将其分为19类,功能分析结果表明:这些UniGenes可能参与代谢、转录、信号转导、转运、细胞生长分裂、细胞结构、细胞命运、蛋白质合成与降解、防御等与个体发育密切相关的生物学过程。对部分ESTs的表达谱进行分析,结果表明这些ESTs均在落叶松体细胞胚胎发生的不同阶段特异表达。 展开更多

关键词 落叶松 体细胞胚成熟 差异表达基因 抑制性消减杂交

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生姜ZoWRKY1基因的克隆及其与6-姜酚生物合成的相关性分析 被引量：5

12

作者 唐建民 齐力旺 +2 位作者 贺小婷 蒋雨欣 李哲馨 《湖南农业科学》 2020年第10期1-5,16,共6页

生姜(Zingiber officinale Roscoe)是药食兼用的高附加值特色经济作物,姜辣素是生姜的核心药用成分,6-姜酚则是姜辣素的主要成分。以川渝特色生姜品种竹根姜根茎为研究材料,克隆ZoWRKY1基因并分析其在竹根姜不同发育阶段的表达及其与6-... 生姜(Zingiber officinale Roscoe)是药食兼用的高附加值特色经济作物,姜辣素是生姜的核心药用成分,6-姜酚则是姜辣素的主要成分。以川渝特色生姜品种竹根姜根茎为研究材料,克隆ZoWRKY1基因并分析其在竹根姜不同发育阶段的表达及其与6-姜酚含量增量的相关性,探讨不同浓度NaCl胁迫下ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL的表达及其相关性。结果表明:克隆的ZoWRKY1基因cDNA全长1026 bp,登录号为MT414710;氨基酸序列分析显示ZoWRKY1属于WRKY家族的第二类成员;ZoWRKY1的表达水平在竹根姜发育的第二阶段即播种后1个月左右高度上调,且与6-姜酚含量增量存在显著的相关性;在25 g/L NaCl胁迫下,ZoWRKY1与6-姜酚合成酶基因ZoPAL、ZoC4H和Zo4CL高度上调表达,且ZoWRKY1与ZoC4H和Zo4CL的表达存在显著相关性,推测ZoWRKY1基因与ZoC4H及Zo4CL基因存在调控关系并进一步影响6-姜酚的生物合成。 展开更多

关键词 生姜 WRKY转录因子 6-姜酚合成 相关性

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日本落叶松体细胞胚胎发生相关基因LaSERK1的克隆与表达分析 被引量：5

13

作者 李龙 张立峰 +1 位作者 齐力旺 韩素英 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2013年第6期673-680,共8页

本研究克隆了日本落叶松体细胞胚胎发生相关受体类蛋白激酶基因LaSERK1,并检测了在不同培养条件下LaSERK1的表达情况,发现LaSERK1与已发现的其他物种SERK1基因有高度相似性,qRT-PCR结果显示:LaSERK1在体胚发生早期高表达。结果表明:LaSE... 本研究克隆了日本落叶松体细胞胚胎发生相关受体类蛋白激酶基因LaSERK1,并检测了在不同培养条件下LaSERK1的表达情况,发现LaSERK1与已发现的其他物种SERK1基因有高度相似性,qRT-PCR结果显示:LaSERK1在体胚发生早期高表达。结果表明:LaSERK1可能在落叶松体胚发育早期起重要作用,LaSERK1也可能成为早期胚性细胞的标记基因。 展开更多

关键词 日本落叶松 体细胞胚胎发生 SERK1 表达分析

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脱水胁迫对梭梭和胡杨苗叶绿素荧光特性的影响 被引量：25

14

作者 施征 史胜青 +1 位作者 肖文发 齐力旺 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2008年第4期566-570,共5页

应用IMAG ING-PAM荧光仪测定了离体脱水胁迫不同时期梭梭和胡杨的叶绿素荧光动力学参数。结果表明:离体胁迫初期(3 h)Fv/Fm、qP和ETR轻微降低,但胡杨的降低幅度比梭梭大;而此时qN却明显增加,胡杨的增加幅度远大于梭梭。随着离体时间的延... 应用IMAG ING-PAM荧光仪测定了离体脱水胁迫不同时期梭梭和胡杨的叶绿素荧光动力学参数。结果表明:离体胁迫初期(3 h)Fv/Fm、qP和ETR轻微降低,但胡杨的降低幅度比梭梭大;而此时qN却明显增加,胡杨的增加幅度远大于梭梭。随着离体时间的延长(6、12 h),胡杨的Fv/Fm、qP和ETR明显降低,梭梭的降低幅度仍相对较小;而此时qN呈降低趋势,梭梭低于对照水平,而胡杨仍旧高于对照。这也说明遭遇不同程度胁迫时,梭梭和胡杨启动了不同的过剩光能防御机制。 展开更多

关键词 梭梭 胡杨 脱水胁迫 叶绿素荧光

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三倍体杨树核型分析 被引量：18

15

作者 陈成彬 齐力旺 +4 位作者 张守攻 韩素英 李秀兰 宋文芹 陈瑞阳 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 2004年第6期565-567,共3页

对4种三倍体杨树核型进行了比较分析,三倍体毛白杨核型为:2n=3x=57=1M+31m+10sm+15st;三倍体I-214为:2n=3x=57=2M+33m(2SAT)+10sm(1SAT)+10st(3SAT)+2t;三倍体武黑1号为:2n=3x=57=2M+38m(4SAT)+14sm(2SAT)+3st;三倍体廊坊3号为:2n=3x=57... 对4种三倍体杨树核型进行了比较分析,三倍体毛白杨核型为:2n=3x=57=1M+31m+10sm+15st;三倍体I-214为:2n=3x=57=2M+33m(2SAT)+10sm(1SAT)+10st(3SAT)+2t;三倍体武黑1号为:2n=3x=57=2M+38m(4SAT)+14sm(2SAT)+3st;三倍体廊坊3号为:2n=3x=57=35m+10sm(1SAT)+10st(2SAT)+2t(1SAT)。结果显示三倍体毛白杨核型与三倍体黑杨核型有显著不同,表明它们的基因组结构不同,起源各异。 展开更多

关键词 杨树 三倍体 核型分析

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日本落叶松小RNA文库构建及其microRNA鉴定 被引量：5

16

作者 吴涛 张俊红 +3 位作者 韩素英 杨文华 李万峰 齐力旺 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2012年第6期677-684,共8页

以2年生日本落叶松实生苗为材料构建其小RNA文库,对283个克隆进行PCR验证后测序,通过生物信息学分析鉴定文库中的microRNA并进行qRT-PCR验证。结果表明:(1)小RNA文库的体积为50 mL,总库容量为5.25×106cfu,重组率为92.6%,插入片段... 以2年生日本落叶松实生苗为材料构建其小RNA文库,对283个克隆进行PCR验证后测序,通过生物信息学分析鉴定文库中的microRNA并进行qRT-PCR验证。结果表明:(1)小RNA文库的体积为50 mL,总库容量为5.25×106cfu,重组率为92.6%,插入片段长度约65 bp,与小RNA连接片段长度吻合。(2)去除rRNA(86个)、tRNA(14个)等非目的序列后,获得日本落叶松28个保守miRNAs,属于17个miRNA家族;其中,15个miRNAs(miR159c、miR160a、miR162a、miR164b、miR165a、miR166a、miR166a*、miR166b*、miR169a、miR169b、miR171a、miR171b、miR172a、miR319b、miR396a)的序列与其它植物完全一致,其余13个miRNAs(miR156a、miR159a、miR159b、miR164a、miR166b、miR168a、miR169b*、miR319a、miR396b、miR408、miR482a、miR2111、miR3701)则高度相似。(3)测序结果与本室落叶松转录组数据进行序列比对,新发现4个miRNAs(lle-miR1、lle-miR2、lle-miR3、lle-miR4)及其前体。(4)qRT-PCR验证表明,miR159a、miR159b等16个保守的和lle-miR1 lle-miR4等共20个miRNAs存在于日本落叶松中。(5)通过靶基因预测及UniProt数据库分析发现,32个miRNAs中有24个对应69个靶基因,其功能主要为转录因子、信号转导、胁迫抗性和代谢相关酶及未知功能蛋白。 展开更多

关键词 日本落叶松 小RNA 文库 MIRNA 转录组

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落叶松扦插生根过程SSH文库构建及部分基因的表达分析 被引量：5

17

作者 冯健 齐力旺 +1 位作者 孙晓梅 张守攻 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期27-34,共8页

为研究落叶松在扦插生根过程中基因的表达情况,以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞无性系为材料构建差异表达cDNA文库,获得正、反2个消减文库。随机挑取正库和反库各500个克隆进行测序。将测序结果整理后,正库得到272个UniEST,... 为研究落叶松在扦插生根过程中基因的表达情况,以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞无性系为材料构建差异表达cDNA文库,获得正、反2个消减文库。随机挑取正库和反库各500个克隆进行测序。将测序结果整理后,正库得到272个UniEST,反库得到249个UniEST。经生物信息学分析表明,这些UniEST分别属于新陈代谢、信号途径、物质运输、抗性相关、生长发育等类别基因,这些基因可能在扦插生根过程中具有重要作用。选择部分有代表性的基因,运用半定量PCR技术对这些基因在落叶松不同器官、不同扦插阶段的表达情况及对IBA的响应进行检测。检测结果表明激素在落叶松扦插生根过程中发挥重要作用,除激素类基因外,小G蛋白、ABC转运蛋白类、因伤诱导物质等相关基因也参与落叶松扦插生根的过程。 展开更多

关键词 落叶松 SSH文库 扦插 生长素

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毛白杨纤维素合酶基因(PtoCesA1)的克隆及其在烟草中的遗传转化 被引量：3

18

作者 李春秀 齐力旺 +3 位作者 史胜青 汪阳东 王建华 张守攻 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期39-45,共7页

克隆毛白杨纤维素合酶基因（PtoCesAl），全长为3215bp，与欧洲颤杨的PtrCesAl基因的同源性为97％，具有开放的阅读框，编码区在52～2988碱基之间，为2937bp。构建PtoCesAl基因的全长正义植物表达载体为pBIPAl，经酶切和PCR鉴定确认载... 克隆毛白杨纤维素合酶基因（PtoCesAl），全长为3215bp，与欧洲颤杨的PtrCesAl基因的同源性为97％，具有开放的阅读框，编码区在52～2988碱基之间，为2937bp。构建PtoCesAl基因的全长正义植物表达载体为pBIPAl，经酶切和PCR鉴定确认载体构建正确。通过农杆菌介导的方法将pBIPAl表达载体转入烟草中，转基因植株的纤维细胞壁厚度和木质部厚度都有不同程度的下降，形态表征为植株明显变矮，叶片变小。 展开更多

关键词 毛白杨 纤维素合酶基因 遗传转化

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木本植物老根老叶总RNA的提取方法 被引量：7

19

作者 周春娥 段红英 齐力旺 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第10期2831-2832,共2页

对于含有大量多糖、酚、酯、萜类等其他二次代谢产物的木本植物的老根和老叶,要从它们的组织中提取高质量的RNA一般都比较困难。以小叶杨的老根、麻黄的老根、沙冬青的老叶、梭梭老根为材料提取出质量比较好的RNA。

关键词 木本植物 二次代谢产物 老根 老叶 提取RNA

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落叶松扦插生根过程抑制消减杂交文库构建及分析

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作者 冯健 齐力旺 +2 位作者 孙晓梅 韩素英 张守攻 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2009年第5期672-676,共5页

以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞优良无性系茎和根为材料,应用抑制消减杂交技术构建了扦插生根过程中2个差异表达cDNA文库,酶切效率检测、连接效率检测、差减效率检测结果表明:这2个落叶松扦插生根过程差异表达cDNA文库构建... 以落叶松扦插生根率存在显著差异的2个全同胞优良无性系茎和根为材料,应用抑制消减杂交技术构建了扦插生根过程中2个差异表达cDNA文库,酶切效率检测、连接效率检测、差减效率检测结果表明:这2个落叶松扦插生根过程差异表达cDNA文库构建成功。利用PCR扩增和点杂交试验筛选阳性克隆,将阳性克隆测序,并经生物信息学分析,最终获得521个Un iEST。 展开更多

关键词 落叶松 抑制消减杂交文库 扦插

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