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抗人纤维蛋白单链抗体的人源化 被引量:3
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作者 李文平 许静 +2 位作者 李彬 蔡英林 宋增璇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期569-571,共3页
目的:人源化抗人纤维蛋白单链抗体,降低人抗鼠抗体反应。方法:从人免疫球蛋白基因数据库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体scFv-8E5重链(VH-8E5)和轻链(VLSM)同源性最高的序列,作为人源化改造的框架,其中... 目的:人源化抗人纤维蛋白单链抗体,降低人抗鼠抗体反应。方法:从人免疫球蛋白基因数据库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体scFv-8E5重链(VH-8E5)和轻链(VLSM)同源性最高的序列,作为人源化改造的框架,其中植入scFv-8E5的互补决定区。人工合成其DNA片段,用DNA连接酶连接成完整的人源化VH-8E5和VL-8E5,构建表达载体,转化JM109后用IPTG诱导表达,ELISA测定其抗原结合活性。结果:表达产物分子量30kD左右,人源化scFv-8E5与亲本抗体scFv-8E5抗原结合活性无明显差别,可耐受至少2w,4℃保存,数次反复冰融或一定时间的37℃孵育。结论:人源化scFv-8E5具有特异性识别人纤维蛋白的活性,鼠源scFv-8E5的人源化基本获得成功。 展开更多
关键词 单链抗体 免疫原性 人源化
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流体的不同流动方式对血管内皮细胞血管细胞粘附分子-1、核因子κB表达的影响 被引量:3
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作者 钱冠清 刘会齐 刘晓辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期753-756,I001,共5页
目的 :探讨在低切应力时不同流态对粘附分子表达的影响。方法 :置人脐静脉内皮细胞单层于平板流动腔内 ,经切应力 0 2Pa层流或振荡流作用 4h、18h ,用组织免疫化学方法测其血管细胞粘附因子 - 1(VCAM - 1)表达及核因子 (NF -κB)核转... 目的 :探讨在低切应力时不同流态对粘附分子表达的影响。方法 :置人脐静脉内皮细胞单层于平板流动腔内 ,经切应力 0 2Pa层流或振荡流作用 4h、18h ,用组织免疫化学方法测其血管细胞粘附因子 - 1(VCAM - 1)表达及核因子 (NF -κB)核转位活性 ,原位杂交法检测VCAM - 1mRNA表达。结果 :在相同的低切应力作用下 ,层流组未见VCAM - 1mRNA、VCAM - 1有明显变化 ,而振荡流组则明显上调VCAM - 1mRNA、VCAM - 1表达分别为对照组 2倍、2 4倍及NF -κB核转位活性明显高于对照。结论 :VEC在低切应力作用下 ,振荡流明显上调VCAM - 1表达 。 展开更多
关键词 血管内皮 血液动力学 转录因子 流态 低切应力 血管细胞粘附分子-1 动脉粥样硬化
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抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的稳定性及对动物纤维蛋白的识别 被引量:1
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作者 李文平 许静 +1 位作者 隋建华 宋增璇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期391-393,共3页
目的:探索抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白的应用前景。方法:构建抗人纤维蛋白单链抗体scFv8E5基因与链亲和素基因的重组表达载体pSTE28E5 ,表达的融合蛋白可特异性识别人纤维蛋白,同时有生物素的结合... 目的:探索抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白的应用前景。方法:构建抗人纤维蛋白单链抗体scFv8E5基因与链亲和素基因的重组表达载体pSTE28E5 ,表达的融合蛋白可特异性识别人纤维蛋白,同时有生物素的结合位点。转化JM109 后用IPTG 诱导表达,ELISA 观察融合蛋白的稳定性。结果:抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白稳定性好,可耐受至少2 w ,4 ℃保存、数次反复冻融或一定时间的37 ℃孵育。它能与大鼠和豚鼠的纤维蛋白结合,而与猪纤维蛋白反应不明显。结论:抗人纤维蛋白单链抗体链亲和素融合蛋白适用于大鼠或豚鼠血栓病模型,是临床前研究的有用材料。 展开更多
关键词 链亲和素 融合蛋白 抗纤维蛋白 稳定性
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嵌合抗CD20 Fab′诱导Raji细胞凋亡
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作者 范冬梅 赖增祖 +3 位作者 熊冬生 许元富 彭晖 杨纯正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第7期20-22,共3页
为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细... 为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细胞凋亡作用 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD2 0Fab′通过诱导Raji细胞凋亡的机制抑制Raji细胞生长。 展开更多
关键词 B淋巴细胞瘤 嵌合Fab' CD20 细胞凋亡 抗CD20Fab’ 临床 单克隆抗体 抗肿瘤活性
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