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人工合成表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中的高效表达
被引量：
12
1
作者
黄秉仁
蔡良琬
+2 位作者
廖洪涛
唐申秀
周海涛
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第5期512-517,共6页
选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型...
选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型酵母株ＧＳ１１５后筛选出整合型ＭｕｔＳＨｉｓ＋基因型菌株．高密度培养及诱导表达后该株可分泌具完好生物活性和正确物理化学性质的人表皮生长因子，产量达１００ｍｇ／Ｌ，经３次柱层析纯度达９５％以上。
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关键词
人表皮生长因子
甲基营养型酵母
高效表达
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职称材料
利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异
被引量：
1
2
作者
顾继杰
黄秉仁
蔡良琬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第5期610-616,共7页
转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１...
转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段ＬＩＡＲＥＳＴ－１和ＬＩＡＲＥＳＴ－２表达量在凋亡细胞中显著高于不发生凋亡的细胞中，ＧｅｎＢａｎｋ检索表明此二片段为新的ｃＤＮＡ序列并给予登录号Ｕ４７３１５和Ｕ４７３１６．另有一个ｃＤＮＡ片段ＬＩＡＲＣＤ－３在凋亡细胞中受到了明显的抑制，经检索为一已知的与前强啡肽原上游调控区结合的ＤＮＡ结合蛋白ｃＤＮＡ编码区的一部分。
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关键词
神经生长因子
低亲和力受体
细胞凋亡
差示PCR
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职称材料
题名
人工合成表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中的高效表达
被引量：
12
1
作者
黄秉仁
蔡良琬
廖洪涛
唐申秀
周海涛
机构
中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第5期512-517,共6页
基金
国家八五科技攻关课题
文摘
选用酵母菌偏爱密码子人工合成了编码５１个氨基酸的人表皮生长因子（ｈＥＧＦ）基因．将合成基因与编码酵母α因子前导肽８５个氨基酸的ＤＮＡ片段融合后克隆到醇氧化酶基因启动子下游，并构建出多拷贝表达载体．此载体转化甲基营养型酵母株ＧＳ１１５后筛选出整合型ＭｕｔＳＨｉｓ＋基因型菌株．高密度培养及诱导表达后该株可分泌具完好生物活性和正确物理化学性质的人表皮生长因子，产量达１００ｍｇ／Ｌ，经３次柱层析纯度达９５％以上。
关键词
人表皮生长因子
甲基营养型酵母
高效表达
Keywords
Epidermal growth factor(EGF)
High level expression
Yeast Pichia pastoris
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异
被引量：
1
2
作者
顾继杰
黄秉仁
蔡良琬
机构
中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998年第5期610-616,共7页
基金
国家自然科学基金
卫生部青年基金
文摘
转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段ＬＩＡＲＥＳＴ－１和ＬＩＡＲＥＳＴ－２表达量在凋亡细胞中显著高于不发生凋亡的细胞中，ＧｅｎＢａｎｋ检索表明此二片段为新的ｃＤＮＡ序列并给予登录号Ｕ４７３１５和Ｕ４７３１６．另有一个ｃＤＮＡ片段ＬＩＡＲＣＤ－３在凋亡细胞中受到了明显的抑制，经检索为一已知的与前强啡肽原上游调控区结合的ＤＮＡ结合蛋白ｃＤＮＡ编码区的一部分。
关键词
神经生长因子
低亲和力受体
细胞凋亡
差示PCR
Keywords
P
75NGFR
Apoptosis
Differential display
cDNA fragments
分类号
Q251 [生物学—细胞生物学]
Q952.5 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人工合成表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中的高效表达
黄秉仁
蔡良琬
廖洪涛
唐申秀
周海涛
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异
顾继杰
黄秉仁
蔡良琬
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1998
1
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职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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