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耳蜗内毛细胞突触对氨基糖甙类药物毒性的反应特性
被引量：
10
1
作者
柳柯
姜学钧
+5 位作者
李姝娜
吴南
刘会占
张悦
杨伟炎
杨仕明
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第2期162-166,共5页
目的探讨氨基糖甙类药物毒性对小鼠耳蜗内毛细胞突触数量的影响。方法采用固定剂量(100mg/kg)的庆大霉素对C57BL/6J小鼠每日进行腹腔注射造模,分别在注射后的第4天、7天和10天观察耳蜗基底膜顶回区域的内毛细胞突触数量的变化,以同窝未...
目的探讨氨基糖甙类药物毒性对小鼠耳蜗内毛细胞突触数量的影响。方法采用固定剂量(100mg/kg)的庆大霉素对C57BL/6J小鼠每日进行腹腔注射造模,分别在注射后的第4天、7天和10天观察耳蜗基底膜顶回区域的内毛细胞突触数量的变化,以同窝未注射小鼠的耳蜗基底膜顶回作为实验对照。内毛细胞突触前后膜分别采用CtbP2和GluR2/3进行免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下进行观察。采用3dmax8.0对实验结果进行三维重建,在此基础上计数耳蜗内毛细胞突触的数量。结果所有小鼠内外毛细胞均无缺失和错排,但和对照组相比,内毛细胞突触数量存在明显变化(P<0.01);其数量在庆大霉素注射第7天时达到峰值,之后明显减少。结论在氨基糖甙类药物毒性环境中,耳蜗内毛细胞突触数量表现先增加后下降的规律。这提示在氨基糖甙类药物毒性作用的过程中,内毛细胞突触数量的增加可能表明耳蜗内毛细胞带状突触存在通过改变自身数量来反映氨基糖甙类药物毒性损害的机制。
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关键词
庆大霉素
耳蜗
内毛细胞突触
激光共聚焦显微镜
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职称材料
C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记观察及其意义
被引量：
1
2
作者
施磊
赵宁
+4 位作者
陈丽平
商秀丽
徐义策
王雪峰
柳柯
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第4期456-460,共5页
目的探讨小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记特点及其应用方法。方法在成年的C57BL/6J小鼠上剥取新鲜的耳蜗基底膜标本,灌洗及漂洗处理之后分别使用Ctbp2(C-terminal binding protein 2,C末端结合蛋白2;1∶200),GluR 2/3(glutama...
目的探讨小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记特点及其应用方法。方法在成年的C57BL/6J小鼠上剥取新鲜的耳蜗基底膜标本,灌洗及漂洗处理之后分别使用Ctbp2(C-terminal binding protein 2,C末端结合蛋白2;1∶200),GluR 2/3(glutamate receptor2/3,AMPA receptor subunit 2/3,谷氨酸受体亚单位2/3;1∶200)和Dapi(4',6-Diamidino-2-phenylindole,4',6-二脒基-2-苯基吲哚)染色剂对内毛细胞突触的前膜特异结构RIBEYE、突触后膜的谷氨酸受体以及细胞核进行单独、双重和三重免疫标记,并利用激光共聚焦显微镜能够连续扫描和叠加图像的特性,观察耳蜗内毛细胞带状突触的表达、空间分布情况以及与内、外毛细胞之间的位置关系。结果单独应用Ctbp2可以清晰显示内毛细胞突触前膜所标记的结构,结合使用抗体GluR2/3进行免疫双标则可以完整显示内毛细胞突触前后膜的相关蛋白,而结合应用Dapi细胞核染色的方法可以明确标记其存在的位置以及和内、外毛细胞之间的关系,如果在此基础上加上激光共聚焦显微镜下的平光图像,则会使标记结果更加清晰、客观和准确。结论本方法可以准确显示耳蜗内毛细胞带状突触的表达、空间分布情况以及与内外毛细胞之间的位置关系,如果在实验中合理应用多重免疫荧光标记方法,将会对不同生理和病理条件下深入研究耳蜗内毛细胞突触的可塑性及其在听力变化中的作用具有重要的价值。
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关键词
内毛细胞传入神经突触
RIBEYE/Ctbp2
免疫标记
激光共聚焦显微镜
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职称材料
题名
耳蜗内毛细胞突触对氨基糖甙类药物毒性的反应特性
被引量：
10
1
作者
柳柯
姜学钧
李姝娜
吴南
刘会占
张悦
杨伟炎
杨仕明
机构
中国
人民解放军总
医院
耳
鼻
喉研究所
中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉-头颈外科
江苏省镇江市
第一
人民
医院
耳
鼻
喉科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第2期162-166,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(30871398)
国家自然科学基金重点项目(30730040)
国家863项目(2007AA02Z150)资助
文摘
目的探讨氨基糖甙类药物毒性对小鼠耳蜗内毛细胞突触数量的影响。方法采用固定剂量(100mg/kg)的庆大霉素对C57BL/6J小鼠每日进行腹腔注射造模,分别在注射后的第4天、7天和10天观察耳蜗基底膜顶回区域的内毛细胞突触数量的变化,以同窝未注射小鼠的耳蜗基底膜顶回作为实验对照。内毛细胞突触前后膜分别采用CtbP2和GluR2/3进行免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下进行观察。采用3dmax8.0对实验结果进行三维重建,在此基础上计数耳蜗内毛细胞突触的数量。结果所有小鼠内外毛细胞均无缺失和错排,但和对照组相比,内毛细胞突触数量存在明显变化(P<0.01);其数量在庆大霉素注射第7天时达到峰值,之后明显减少。结论在氨基糖甙类药物毒性环境中,耳蜗内毛细胞突触数量表现先增加后下降的规律。这提示在氨基糖甙类药物毒性作用的过程中,内毛细胞突触数量的增加可能表明耳蜗内毛细胞带状突触存在通过改变自身数量来反映氨基糖甙类药物毒性损害的机制。
关键词
庆大霉素
耳蜗
内毛细胞突触
激光共聚焦显微镜
Keywords
Gentamicin
Cochlea
Cochlear ribbon synapse
Laser confocal microscope
分类号
R339.16 [医药卫生—人体生理学]
R978.12 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记观察及其意义
被引量：
1
2
作者
施磊
赵宁
陈丽平
商秀丽
徐义策
王雪峰
柳柯
机构
中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉-头颈外科
辽宁医学院
附属
第一
医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
中国
人民解放军总
医院
耳
鼻
咽喉
-
头颈
外科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010年第4期456-460,共5页
基金
国家自然基金项目(31040038)
中国博士后科学基金(20100470103,201003779)资助项目
文摘
目的探讨小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记特点及其应用方法。方法在成年的C57BL/6J小鼠上剥取新鲜的耳蜗基底膜标本,灌洗及漂洗处理之后分别使用Ctbp2(C-terminal binding protein 2,C末端结合蛋白2;1∶200),GluR 2/3(glutamate receptor2/3,AMPA receptor subunit 2/3,谷氨酸受体亚单位2/3;1∶200)和Dapi(4',6-Diamidino-2-phenylindole,4',6-二脒基-2-苯基吲哚)染色剂对内毛细胞突触的前膜特异结构RIBEYE、突触后膜的谷氨酸受体以及细胞核进行单独、双重和三重免疫标记,并利用激光共聚焦显微镜能够连续扫描和叠加图像的特性,观察耳蜗内毛细胞带状突触的表达、空间分布情况以及与内、外毛细胞之间的位置关系。结果单独应用Ctbp2可以清晰显示内毛细胞突触前膜所标记的结构,结合使用抗体GluR2/3进行免疫双标则可以完整显示内毛细胞突触前后膜的相关蛋白,而结合应用Dapi细胞核染色的方法可以明确标记其存在的位置以及和内、外毛细胞之间的关系,如果在此基础上加上激光共聚焦显微镜下的平光图像,则会使标记结果更加清晰、客观和准确。结论本方法可以准确显示耳蜗内毛细胞带状突触的表达、空间分布情况以及与内外毛细胞之间的位置关系,如果在实验中合理应用多重免疫荧光标记方法,将会对不同生理和病理条件下深入研究耳蜗内毛细胞突触的可塑性及其在听力变化中的作用具有重要的价值。
关键词
内毛细胞传入神经突触
RIBEYE/Ctbp2
免疫标记
激光共聚焦显微镜
Keywords
Cochlear afferent ribbon synapse
RIBEYE/Ctbp2
Immunostaining
Laser confocal microscope
分类号
R322.923 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R338.13 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
耳蜗内毛细胞突触对氨基糖甙类药物毒性的反应特性
柳柯
姜学钧
李姝娜
吴南
刘会占
张悦
杨伟炎
杨仕明
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的免疫学标记观察及其意义
施磊
赵宁
陈丽平
商秀丽
徐义策
王雪峰
柳柯
《中华耳科学杂志》
CSCD
2010
1
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