检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较被引量：2: 1; 作者李晓航张佳林 +5 位作者李乐康铁利程颖石蕊赵宁刘永锋《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期108-111,共4页; 目的比较分析OptiPrep和Ficoll两种介质纯化大鼠胰岛细胞的效果。方法将24只SD大鼠随机分成2组,采用明尼苏达大学改良方法提取大鼠胰岛细胞,消化分离胰岛细胞后,分别采用不连续密度梯度Ficoll离心法和OptiPrep离心法纯化胰岛细胞,比较... 展开更多; 关键词胰岛细胞纯化分离大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

Cre/LoxP系统联合SV40 LTag诱导可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系的建立被引量：2: 2; 作者李晓航张佳林 +5 位作者康铁利李乐程颖石蕊赵宁刘永锋《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期979-982,共4页; 目的探索可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞的建立方法。方法采用胰酶消化法分离培养大鼠皮肤成纤维细胞;逆转录病毒载体(SSR69)转染成纤维细胞,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化成纤维细胞;用表达Cre重组酶的腺病毒感染永生化成纤维细胞,... 展开更多; 关键词永生化猿猴病毒大T抗原基因 Cre/LoxP位点特异性重组酶系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

1种新型功能性杂交胰岛β细胞系的建立被引量：1: 3; 作者李晓航张佳林 +6 位作者李乐康铁利程颖石蕊张城硕赵宁刘永锋《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期143-148,共6页; 目的通过应用基因转染及细胞融合技术构建永生化细胞,建立1种功能良好、无致瘤性、增殖可控的杂交胰岛β细胞系。方法通过脂质体介导逆转录病毒载体SSR69转染至原代成纤维细胞中,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化细胞。提取大鼠胰岛,通过... 展开更多; 关键词胰岛移植永生化电融合杂交胰岛β细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响被引量：1: 4; 作者钟嘉明张佳林 +3 位作者李晓航张成钧程颖刘永锋《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期694-697,共4页; 目的探讨提高小鼠胰岛分离纯化后数量和质量的适宜消化条件。方法通过胆总管逆行灌注胶原酶P溶液进行小鼠胰腺消化,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度和消化时间对胰岛分离结果的影响。结果胶原酶浓度和... 展开更多; 关键词胰岛细胞分离纯化小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

肝癌患者外周血CD4^＋CD25^highT淋巴细胞亚群变化及临床意义被引量：2: 5; 作者张成钧张佳林 +3 位作者钟嘉明褚志强李晓航程颖《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期539-541,共3页; 目的探讨原发性肝细胞癌(肝癌)患者外周血调节性T细胞亚群变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测34例肝癌患者及30例同龄健康人群外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比例;MTT法用于检测部分病人外周血PBMC的... 展开更多; 关键词肝肿瘤 CD4^+CD25^HIGH 流式细胞仪; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较被引量：2: 1; 作者李晓航张佳林李乐康铁利程颖石蕊赵宁刘永锋; 机构中国医科大学附属第一医院普通外科教研室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期108-111,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30371359,30870644),国家自然科学基金专项基金资助项目(31140059); 文摘目的比较分析OptiPrep和Ficoll两种介质纯化大鼠胰岛细胞的效果。方法将24只SD大鼠随机分成2组,采用明尼苏达大学改良方法提取大鼠胰岛细胞,消化分离胰岛细胞后,分别采用不连续密度梯度Ficoll离心法和OptiPrep离心法纯化胰岛细胞,比较纯化后胰岛细胞数量、纯度、存活率及功能,观察OptiPrep和Ficoll两种介质对大鼠胰岛细胞纯化效果的影响。结果与Ficoll组相比,OptiPrep组胰岛细胞的产量(分别为304±13.57和346±9.09)和纯度(分别为88.25%±2.22%和94.00%±0.82%)均显著增加(P<0.05);OptiPrep组与Ficoll组胰岛细胞的存活率(分别为93.50%±1.29%和91.50%±1.29%)和功能(胰岛素释放指数分别为3.04±0.05和3.02±0.06)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OptiPrep法纯化大鼠胰岛细胞比传统的Ficoll法更有优势,而且OptiPrep价格相对便宜,可以作为纯化大鼠胰岛的常规方法。; 关键词胰岛细胞纯化分离大鼠; Keywords islets of langerhans purification isolation rat; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Cre/LoxP系统联合SV40 LTag诱导可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系的建立被引量：2: 2; 作者李晓航张佳林康铁利李乐程颖石蕊赵宁刘永锋; 机构中国医科大学附属第一医院普通外科教研室肝胆外科暨器官移植科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期979-982,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30371359 30870644 31140059); 文摘目的探索可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞的建立方法。方法采用胰酶消化法分离培养大鼠皮肤成纤维细胞;逆转录病毒载体(SSR69)转染成纤维细胞,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化成纤维细胞;用表达Cre重组酶的腺病毒感染永生化成纤维细胞,筛选获得回复后成纤维细胞。对原代、永生化及回复后成纤维细胞,倒置显微镜下观察细胞生长状态;采用细胞生长曲线法测定细胞增殖能力。免疫荧光染色检测Vimentin在原代及永生化成纤维细胞中的表达情况,平板克隆实验评价回复后成纤维细胞的致瘤性。结果提取了大鼠皮肤成纤维细胞,并筛选出表达SV40 LTag的永生化成纤维细胞,二者形态无明显差异,均贴壁生长,呈长梭形或多角形,但永生化成纤维细胞体外增殖能力明显高于原代成纤维细胞(P<0.05),在体外培养传代>25代。细胞免疫荧光提示两种细胞均在细胞质内表达Vimentin。回复后成纤维细胞不表达SV40 LTag,其体外增殖能力与原代细胞无明显差异(P>0.05),无致瘤性。结论应用Cre/LoxP系统联合SV40 LTag可以建立可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系。; 关键词永生化猿猴病毒大T抗原基因 Cre/LoxP位点特异性重组酶系统; Keywords immortalization simian virus 40 lange T antigen（SV40 LTag） cre/loxP site-specific recombinase system; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名1种新型功能性杂交胰岛β细胞系的建立被引量：1: 3; 作者李晓航张佳林李乐康铁利程颖石蕊张城硕赵宁刘永锋; 机构中国医科大学附属第一医院普通外科教研室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期143-148,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(30870644 31140059) 辽宁省自然科学基金资助项目(201202274); 文摘目的通过应用基因转染及细胞融合技术构建永生化细胞,建立1种功能良好、无致瘤性、增殖可控的杂交胰岛β细胞系。方法通过脂质体介导逆转录病毒载体SSR69转染至原代成纤维细胞中,筛选稳定表达SV40 LTag的永生化细胞。提取大鼠胰岛,通过胰蛋白酶及DNA酶裂解成单胰岛细胞。对永生化成纤维细胞及单个胰岛β细胞进行电融合,通过有限稀释法获得杂交胰岛β细胞克隆。比较杂交及正常β细胞内胰岛素的含量及对葡萄糖刺激胰岛素释放反应。通过RT-PCR及Westernblot分析杂交胰岛β细胞中SV40 LTag、insulin、葡萄糖激酶(GK)及葡萄糖转运体-2(Glut-2)基因的表达。结果建立的永生化成纤维细胞系的增殖能力明显优于原代成纤维细胞(P<0.05)。成功获得杂交胰岛β细胞克隆,其细胞呈短梭形或扁圆形,且具有贴壁生长等特性。透射电子显微镜下可见细胞内胰岛素分泌颗粒,杂交与正常胰岛β细胞之间细胞内胰岛素含量、胰岛素释放指数及insulin、GK、Glut-2蛋白及mRNA表达水平无统计学差异(P>0.05),但2种细胞内insulin、GK、Glut-2的表达水平显著高于RIN-m5F细胞(P<0.05)。结论可通过永生化成纤维细胞及单个胰岛β细胞电融合诱导生成杂交胰岛β细胞,且杂交细胞能够对葡萄糖的变化产生应答反应。; 关键词胰岛移植永生化电融合杂交胰岛β细胞系; Keywords islet transplantation inunorhalization eleetrofusion hybrid islet β cell line; 分类号 R318.15 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响被引量：1: 4; 作者钟嘉明张佳林李晓航张成钧程颖刘永锋; 机构中国医科大学附属第一医院普通外科教研室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期694-697,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30870644,30371359); 文摘目的探讨提高小鼠胰岛分离纯化后数量和质量的适宜消化条件。方法通过胆总管逆行灌注胶原酶P溶液进行小鼠胰腺消化,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度和消化时间对胰岛分离结果的影响。结果胶原酶浓度和消化时间对小鼠胰岛分离效果有重要影响。在胶原酶P浓度为1.0 mg/ml、37℃消化25 min条件下,胰岛分离效果最佳。结论胶原酶浓度和消化时间影响小鼠胰岛分离结果,优化消化条件可提高胰岛分离数量和质量。; 关键词胰岛细胞分离纯化小鼠; Keywords islets of langerhans isolation purification mouse; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌] Q455 [生物学—生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肝癌患者外周血CD4^＋CD25^highT淋巴细胞亚群变化及临床意义被引量：2: 5; 作者张成钧张佳林钟嘉明褚志强李晓航程颖; 机构中国医科大学附属第一医院普通外科教研室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期539-541,共3页; 文摘目的探讨原发性肝细胞癌(肝癌)患者外周血调节性T细胞亚群变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测34例肝癌患者及30例同龄健康人群外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比例;MTT法用于检测部分病人外周血PBMC的增殖情况。结果肝癌组CD4+CD25high/CD4+的比率较健康对照组显著增加(P<0.01);肝癌Ⅲ期患者CD4+CD25high/CD4+T比例高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01);肝癌组PBMC增殖水平较健康对照组明显下降(P<0.01)。结论肝癌患者CD4+CD25high调节性T细胞比例显著升高,外周血PBMC增殖水平较健康人群明显下降,可能与肝癌导致机体免疫功能异常有关。; 关键词肝肿瘤 CD4^+CD25^HIGH 流式细胞仪; Keywords hepatocellular carcinoma CD4^＋CD25^high flow cytometer; 分类号 R730.45 [医药卫生—肿瘤] R730.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较	李晓航张佳林李乐康铁利程颖石蕊赵宁刘永锋	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Cre/LoxP系统联合SV40 LTag诱导可复性永生化大鼠皮肤成纤维细胞系的建立	李晓航张佳林康铁利李乐程颖石蕊赵宁刘永锋	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	1种新型功能性杂交胰岛β细胞系的建立	李晓航张佳林李乐康铁利程颖石蕊张城硕赵宁刘永锋	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响	钟嘉明张佳林李晓航张成钧程颖刘永锋	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	肝癌患者外周血CD4^＋CD25^highT淋巴细胞亚群变化及临床意义	张成钧张佳林钟嘉明褚志强李晓航程颖	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料