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rAAV载体介导基因对糖尿病大鼠视网膜转染的实验研究 被引量：1
1
作者 禹海 陈蕾 姜晶 《眼科新进展》 CAS 2008年第11期809-812,共4页
目的以重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus,rAAV)携带色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因转染入糖尿病大鼠视网膜,观察其定位及表达情... 目的以重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus,rAAV)携带色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因转染入糖尿病大鼠视网膜,观察其定位及表达情况。方法Wistar大鼠分为正常组(CON)及实验组。实验组以链脲佐菌素诱导形成糖尿病模型后,随机分为1个月组(DM1)、3个月组(DM3)和6个月组(DM6)。右眼玻璃体腔内注射2μLrAAV2-CMV-hPEDF,左眼注射等量rAAV2-CMV-GFP。CON组右眼注射2μL生理盐水。用荧光显微镜观察GFP表达部位,用RT-PCR测定PEDF的表达情况。结果荧光显微镜显示,DM1组视网膜全层,主要是节细胞层表达强荧光。DM3组全层视网膜和部分巩膜表达强荧光。DM6组视网膜及巩膜全层表达强荧光,荧光强度、范围与DM3组相比明显增加。RT-PCR显示,人PEDF mRNA在CON、GFP注射眼组大鼠视网膜均无表达。在右眼实验组1个月时可见hPEDF mRNA表达,并随时间延长,表达不断增强,持续到6个月。结论AAV载体可将PEDF及GFP基因有效地转染入糖尿病大鼠视网膜内并长期表达超过6个月。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 绿色荧光蛋白 重组腺相关病毒 基因转导
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