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腺病毒介导的TSP-1f基因转移抑制视网膜新生血管的实验研究
被引量:
3
1
作者
王爱媛
刘晓梅
+1 位作者
陈立忠
高殿文
《眼科新进展》
CAS
2008年第4期266-269,共4页
目的构建表达凝血酶敏感蛋白-1(thrombin sensitive protein-1,TSP-1)抗新生血管活性片段(TSP-1f)腺病毒载体,并观察其对氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用。方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP-1fcDNA序列;采...
目的构建表达凝血酶敏感蛋白-1(thrombin sensitive protein-1,TSP-1)抗新生血管活性片段(TSP-1f)腺病毒载体,并观察其对氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用。方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP-1fcDNA序列;采用AdEasy系统构建TSP-1f重组腺病毒ADV-TSP-1f。将鼠龄为7d的40只C57BL/6J新生鼠置于体积分数75%的氧环境中连续生活5d,然后回到正常环境中建立氧诱导的鼠血管增生性视网膜病变动物模型;每只鼠随机选取一眼为实验组,而对侧眼为对照组,在鼠生后12d时实验组玻璃体腔注射ADV-TSP-1f,对照组注射ADV-LacZ。1周后麻醉处死小鼠,Western印迹方法检测TSP-1f在实验组视网膜中的表达;视网膜铺片ADP酶法观察视网膜血管变化,组织学切片观察比较突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量。结果成功构建表达TSP-1f重组腺病毒载体并转染鼠视网膜,Western blotting检测到实验组视网膜目的基因表达。视网膜铺片实验组视网膜未见明显的无灌注区形成,新生血管几乎消失。组织切片实验组突破内界膜的内皮细胞核数目(10.18±1.74)明显减少,与对照组(48.89±2.98)相比差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论腺病毒介导的TSP-1f对氧诱导的鼠视网膜新生血管有显著的抑制作用,为视网膜新生血管性疾病的基因治疗奠定基础。
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关键词
凝血酶敏感蛋白-1
视网膜新生血管
腺病毒载体
基因治疗
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职称材料
腺病毒介导的PEDF基因转移对脐静脉血管内皮细胞的作用
被引量:
2
2
作者
王爱媛
陈晓隆
+2 位作者
刘晓梅
陈立忠
高殿文
《眼科新进展》
CAS
2008年第5期334-336,共3页
目的研究腺病毒介导的色素上皮衍生因子(adenovirus pigment epithelium-de-rived factor,Ad-PEDF)对体外培养的血管内皮细胞增生及凋亡的作用。方法采用MTT法观察PEDF基因对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增生的影响。TUNEL染...
目的研究腺病毒介导的色素上皮衍生因子(adenovirus pigment epithelium-de-rived factor,Ad-PEDF)对体外培养的血管内皮细胞增生及凋亡的作用。方法采用MTT法观察PEDF基因对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增生的影响。TUNEL染色、流式细胞仪AnnexinV/碘化丙啶双染法,检测腺病毒介导的PEDF基因作用后人脐静脉血管内皮细胞的凋亡。结果Ad-PEDF(感染复数分别为25和50)作用72h后,ECV304细胞数显著少于PBS组和Ad-LacZ组(P<0.05);TUNEL染色,ECV304细胞出现典型的凋亡形态学改变。以感染复数为50的Ad-PEDF处理ECV304细胞72h后,细胞凋亡率为(26.51±1.54)%,PBS组为(2.90±0.79)%,Ad-LacZ组为(3.28±0.73)%,Ad-PEDF组与Ad-LacZ组、PBS组相比差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论腺病毒介导的PEDF基因可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增生,同时对人脐静脉血管内皮细胞的凋亡具有诱导作用。
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关键词
色素上皮衍生因子
血管内皮细胞
细胞凋亡
基因治疗
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职称材料
经脐单孔腹腔镜治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效分析
被引量:
51
3
作者
马丽丽
徐延波
袁正伟
《中国内镜杂志》
北大核心
2017年第5期13-18,共6页
目的分析经脐单孔腹腔镜术(UOTLA)治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效。方法总结2012年1月-2015年10月在该院治疗的78例复杂性阑尾炎患者临床资料,其中单孔腹腔镜手术的44例患者为UOTLA组,开腹手术治疗的34例患者为开腹阑尾切除术组(OA),对两...
目的分析经脐单孔腹腔镜术(UOTLA)治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效。方法总结2012年1月-2015年10月在该院治疗的78例复杂性阑尾炎患者临床资料,其中单孔腹腔镜手术的44例患者为UOTLA组,开腹手术治疗的34例患者为开腹阑尾切除术组(OA),对两组患者的手术时间、术后住院时间、术后腹腔脓肿、切口感染、早期炎性肠梗阻和疼痛程度等指标进行统计分析。结果化验指标中C反应蛋白(CRP)在两组中无明显差异,外周血白细胞总数(WBC)在腹腔镜组下降较开腹组明显;手术相关指标中,UOTLA组手术时间较OA组缩短,但差异无统计学意义[(66.59±33.24)vs(72.86±30.36)min,P>0.05],术后住院时间更短[(8.21±1.67)vs(9.21±2.01)d,P<0.05]。术后腹腔脓肿UOTLA组3例,OA组1例(P>0.05);切口感染:UOTLA组6例,OA组9例(P>0.05);早期炎性肠梗阻:UOTLA组1例,OA组5例(P>0.05);疼痛程度比较,UOTLA组较OA组术后恢复正常活动时间明显缩短(P<0.05),UOTLA组的平均住院费用与OA组比较,差异无统计学意义[(10 639.37±2 970.92)vs(10 765.04±2 902.64)元,P>0.05]。结论 UOTLA治疗小儿复杂性阑尾炎不但具有创伤小、恢复快、住院时间短和美容效果等优点,而且并没有明显增加手术费用,术后并发症也没有明显增加,是一种安全有效的手术方式,可用于治疗小儿化脓穿孔性阑尾炎及坏疽穿孔性阑尾炎等相对复杂的阑尾炎。
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关键词
小儿复杂性阑尾炎
经脐单孔腹腔镜术
开腹阑尾切除术
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职称材料
马凡综合征一家系的致病基因筛查
4
作者
夏文佼
巩雪
+1 位作者
高红
肖伟
《国际眼科杂志》
CAS
2016年第5期948-951,共4页
目的:对中国辽宁省一个具有常染色体显性遗传特点的马凡综合征(Marfan syndrome,MFS)家系进行突变基因的筛查。方法:分别采集家系成员的外周静脉血,提取基因组DNA,通过对与马凡综合征相关的致病基因进行遗传学研究和分析,选取候选基因...
目的:对中国辽宁省一个具有常染色体显性遗传特点的马凡综合征(Marfan syndrome,MFS)家系进行突变基因的筛查。方法:分别采集家系成员的外周静脉血,提取基因组DNA,通过对与马凡综合征相关的致病基因进行遗传学研究和分析,选取候选基因并设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段后进行琼脂糖凝胶电泳分离,利用直接测序法确定致病基因及其突变位点。结果:该家系遗传方式符合常染色体显性遗传,先证者表型为双眼晶状体向鼻上方脱位,通过对候选基因外显子直接测序,发现该家系内患者原纤维蛋白基因-1(fibrillin-1 gene,FBN1)第7个外显子第640位碱基有1个A>G的点突变,此突变导致蛋白第214位的甘氨酸被丝氨酸取代(G214S)。结论:FBN1基因c.A640G(p.G214S)突变为该马凡综合征家系的致病因素。
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关键词
马凡综合征
FBN1基因
突变
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职称材料
题名
腺病毒介导的TSP-1f基因转移抑制视网膜新生血管的实验研究
被引量:
3
1
作者
王爱媛
刘晓梅
陈立忠
高殿文
机构
中国医科大学附属盛京医院
眼科
中国医科大学附属盛京医院中心实验室
出处
《眼科新进展》
CAS
2008年第4期266-269,共4页
文摘
目的构建表达凝血酶敏感蛋白-1(thrombin sensitive protein-1,TSP-1)抗新生血管活性片段(TSP-1f)腺病毒载体,并观察其对氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用。方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP-1fcDNA序列;采用AdEasy系统构建TSP-1f重组腺病毒ADV-TSP-1f。将鼠龄为7d的40只C57BL/6J新生鼠置于体积分数75%的氧环境中连续生活5d,然后回到正常环境中建立氧诱导的鼠血管增生性视网膜病变动物模型;每只鼠随机选取一眼为实验组,而对侧眼为对照组,在鼠生后12d时实验组玻璃体腔注射ADV-TSP-1f,对照组注射ADV-LacZ。1周后麻醉处死小鼠,Western印迹方法检测TSP-1f在实验组视网膜中的表达;视网膜铺片ADP酶法观察视网膜血管变化,组织学切片观察比较突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量。结果成功构建表达TSP-1f重组腺病毒载体并转染鼠视网膜,Western blotting检测到实验组视网膜目的基因表达。视网膜铺片实验组视网膜未见明显的无灌注区形成,新生血管几乎消失。组织切片实验组突破内界膜的内皮细胞核数目(10.18±1.74)明显减少,与对照组(48.89±2.98)相比差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论腺病毒介导的TSP-1f对氧诱导的鼠视网膜新生血管有显著的抑制作用,为视网膜新生血管性疾病的基因治疗奠定基础。
关键词
凝血酶敏感蛋白-1
视网膜新生血管
腺病毒载体
基因治疗
Keywords
thrombospidin-1
retinal neovascularization
adenovirus vector
gene therapy
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
腺病毒介导的PEDF基因转移对脐静脉血管内皮细胞的作用
被引量:
2
2
作者
王爱媛
陈晓隆
刘晓梅
陈立忠
高殿文
机构
中国医科大学附属盛京医院
眼科
中国医科大学附属盛京医院中心实验室
出处
《眼科新进展》
CAS
2008年第5期334-336,共3页
基金
辽宁省自然科学基金资助(编号:20052089)~~
文摘
目的研究腺病毒介导的色素上皮衍生因子(adenovirus pigment epithelium-de-rived factor,Ad-PEDF)对体外培养的血管内皮细胞增生及凋亡的作用。方法采用MTT法观察PEDF基因对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增生的影响。TUNEL染色、流式细胞仪AnnexinV/碘化丙啶双染法,检测腺病毒介导的PEDF基因作用后人脐静脉血管内皮细胞的凋亡。结果Ad-PEDF(感染复数分别为25和50)作用72h后,ECV304细胞数显著少于PBS组和Ad-LacZ组(P<0.05);TUNEL染色,ECV304细胞出现典型的凋亡形态学改变。以感染复数为50的Ad-PEDF处理ECV304细胞72h后,细胞凋亡率为(26.51±1.54)%,PBS组为(2.90±0.79)%,Ad-LacZ组为(3.28±0.73)%,Ad-PEDF组与Ad-LacZ组、PBS组相比差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论腺病毒介导的PEDF基因可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增生,同时对人脐静脉血管内皮细胞的凋亡具有诱导作用。
关键词
色素上皮衍生因子
血管内皮细胞
细胞凋亡
基因治疗
Keywords
pigment epithelium-derived factor:vascular endothelial cells
cell apoptosis
gene therapy
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
经脐单孔腹腔镜治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效分析
被引量:
51
3
作者
马丽丽
徐延波
袁正伟
机构
福建省厦门市妇幼保健院小儿外科
中国医科大学附属盛京医院中心实验室
出处
《中国内镜杂志》
北大核心
2017年第5期13-18,共6页
基金
2013科技惠民计划-科技惠民项目(No:3502Z20134034)
文摘
目的分析经脐单孔腹腔镜术(UOTLA)治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效。方法总结2012年1月-2015年10月在该院治疗的78例复杂性阑尾炎患者临床资料,其中单孔腹腔镜手术的44例患者为UOTLA组,开腹手术治疗的34例患者为开腹阑尾切除术组(OA),对两组患者的手术时间、术后住院时间、术后腹腔脓肿、切口感染、早期炎性肠梗阻和疼痛程度等指标进行统计分析。结果化验指标中C反应蛋白(CRP)在两组中无明显差异,外周血白细胞总数(WBC)在腹腔镜组下降较开腹组明显;手术相关指标中,UOTLA组手术时间较OA组缩短,但差异无统计学意义[(66.59±33.24)vs(72.86±30.36)min,P>0.05],术后住院时间更短[(8.21±1.67)vs(9.21±2.01)d,P<0.05]。术后腹腔脓肿UOTLA组3例,OA组1例(P>0.05);切口感染:UOTLA组6例,OA组9例(P>0.05);早期炎性肠梗阻:UOTLA组1例,OA组5例(P>0.05);疼痛程度比较,UOTLA组较OA组术后恢复正常活动时间明显缩短(P<0.05),UOTLA组的平均住院费用与OA组比较,差异无统计学意义[(10 639.37±2 970.92)vs(10 765.04±2 902.64)元,P>0.05]。结论 UOTLA治疗小儿复杂性阑尾炎不但具有创伤小、恢复快、住院时间短和美容效果等优点,而且并没有明显增加手术费用,术后并发症也没有明显增加,是一种安全有效的手术方式,可用于治疗小儿化脓穿孔性阑尾炎及坏疽穿孔性阑尾炎等相对复杂的阑尾炎。
关键词
小儿复杂性阑尾炎
经脐单孔腹腔镜术
开腹阑尾切除术
Keywords
complicated appendicitis in children
umbilical one-trocar laparoscopic appendectomy
open appendectomygery
分类号
R726.1 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
马凡综合征一家系的致病基因筛查
4
作者
夏文佼
巩雪
高红
肖伟
机构
中国医科大学附属盛京医院
眼科
中国医科大学附属盛京医院中心实验室
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2016年第5期948-951,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30973276)~~
文摘
目的:对中国辽宁省一个具有常染色体显性遗传特点的马凡综合征(Marfan syndrome,MFS)家系进行突变基因的筛查。方法:分别采集家系成员的外周静脉血,提取基因组DNA,通过对与马凡综合征相关的致病基因进行遗传学研究和分析,选取候选基因并设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段后进行琼脂糖凝胶电泳分离,利用直接测序法确定致病基因及其突变位点。结果:该家系遗传方式符合常染色体显性遗传,先证者表型为双眼晶状体向鼻上方脱位,通过对候选基因外显子直接测序,发现该家系内患者原纤维蛋白基因-1(fibrillin-1 gene,FBN1)第7个外显子第640位碱基有1个A>G的点突变,此突变导致蛋白第214位的甘氨酸被丝氨酸取代(G214S)。结论:FBN1基因c.A640G(p.G214S)突变为该马凡综合征家系的致病因素。
关键词
马凡综合征
FBN1基因
突变
Keywords
Marfan syndrome
FBN1 gene
mutation
分类号
R596 [医药卫生—内科学]
R771.3 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒介导的TSP-1f基因转移抑制视网膜新生血管的实验研究
王爱媛
刘晓梅
陈立忠
高殿文
《眼科新进展》
CAS
2008
3
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下载PDF
职称材料
2
腺病毒介导的PEDF基因转移对脐静脉血管内皮细胞的作用
王爱媛
陈晓隆
刘晓梅
陈立忠
高殿文
《眼科新进展》
CAS
2008
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
经脐单孔腹腔镜治疗小儿复杂性阑尾炎的疗效分析
马丽丽
徐延波
袁正伟
《中国内镜杂志》
北大核心
2017
51
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职称材料
4
马凡综合征一家系的致病基因筛查
夏文佼
巩雪
高红
肖伟
《国际眼科杂志》
CAS
2016
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