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M_2-G_(i1α)融合蛋白在Sf9细胞中的表达及M_2AChR特异性药物的鉴别
1
作者
张雪薇
郭政东
+2 位作者
白立川
姜爱民
孙科
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期428-431,共4页
目的通过杆状病毒-Sf9细胞系统表达M2-Gi1α融合蛋白,并利用M2-Gi1α融合蛋白为工具筛选毒蕈碱性乙酰胆碱受体亚型2(M2AChR)特异性配体,探讨M2-Gi1α融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法通过两步PCR反应建立M2AChR与Gi1α融合cDNAs,并...
目的通过杆状病毒-Sf9细胞系统表达M2-Gi1α融合蛋白,并利用M2-Gi1α融合蛋白为工具筛选毒蕈碱性乙酰胆碱受体亚型2(M2AChR)特异性配体,探讨M2-Gi1α融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法通过两步PCR反应建立M2AChR与Gi1α融合cDNAs,并在Sf9昆虫细胞中表达M2-Gi1α融合蛋白。通过[3H]羟苯二乙酸奎宁酯([3H]QNB)配体饱和结合实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测M2-Gi1α融合蛋白表达水平,并筛选M2AChR的特异性配体。结果 M2-Gi1α融合蛋白的表达水平为(8.44±0.39)nmol·g-1膜蛋白。不同配体使M2-Gi1α融合蛋白中Gi1α与GDP的亲和力发生变化,乙酰胆碱、氧化震颤素、槟榔碱、阿托品、fangchinoline、levitimide的IC50值分别为:21.35,23.86,11.91,0.13,1.05,1.75μmol·L-1,无配体存在时为2.50μmol·L-1。结论杆状病毒-Sf9细胞表达系统表达的M2-Gi1α融合蛋白具备M受体与配体结合的特性和组分间的耦联功能,通过检测GDP亲和力的大小有利于筛选和鉴别M2受体亚型特异性药物。
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关键词
融合蛋白
毒蕈碱型乙酰胆碱受体
G蛋白耦联受体
兴奋剂
拮抗剂
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职称材料
滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响
被引量：
4
2
作者
迟天燕
李智
范颖
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期130-131,共2页
目的:研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2(IL-2)含量的变化及滨蒿内酯(Sco)对其的影响。方法:建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值,比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素(PHA)诱导的T淋巴细胞转化以...
目的:研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2(IL-2)含量的变化及滨蒿内酯(Sco)对其的影响。方法:建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值,比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素(PHA)诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果:Sco剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用;Sco能够抑制PHA诱导的哮喘豚鼠T淋巴细胞转化;哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组,Sco也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论:Sco在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平,可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。
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关键词
滨蒿内酯
哮喘
淋巴细胞转化
白细胞介素2
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职称材料
题名
M_2-G_(i1α)融合蛋白在Sf9细胞中的表达及M_2AChR特异性药物的鉴别
1
作者
张雪薇
郭政东
白立川
姜爱民
孙科
机构
中国医科大学药学院天然药物学研究室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期428-431,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30171077)
文摘
目的通过杆状病毒-Sf9细胞系统表达M2-Gi1α融合蛋白,并利用M2-Gi1α融合蛋白为工具筛选毒蕈碱性乙酰胆碱受体亚型2(M2AChR)特异性配体,探讨M2-Gi1α融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法通过两步PCR反应建立M2AChR与Gi1α融合cDNAs,并在Sf9昆虫细胞中表达M2-Gi1α融合蛋白。通过[3H]羟苯二乙酸奎宁酯([3H]QNB)配体饱和结合实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测M2-Gi1α融合蛋白表达水平,并筛选M2AChR的特异性配体。结果 M2-Gi1α融合蛋白的表达水平为(8.44±0.39)nmol·g-1膜蛋白。不同配体使M2-Gi1α融合蛋白中Gi1α与GDP的亲和力发生变化,乙酰胆碱、氧化震颤素、槟榔碱、阿托品、fangchinoline、levitimide的IC50值分别为:21.35,23.86,11.91,0.13,1.05,1.75μmol·L-1,无配体存在时为2.50μmol·L-1。结论杆状病毒-Sf9细胞表达系统表达的M2-Gi1α融合蛋白具备M受体与配体结合的特性和组分间的耦联功能,通过检测GDP亲和力的大小有利于筛选和鉴别M2受体亚型特异性药物。
关键词
融合蛋白
毒蕈碱型乙酰胆碱受体
G蛋白耦联受体
兴奋剂
拮抗剂
Keywords
fusion protein
muscarinic acetylcholine receptor
G protein coupled receptor
agonists
antagonists
分类号
R962 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响
被引量：
4
2
作者
迟天燕
李智
范颖
机构
中国医科大学药学院天然药物学研究室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期130-131,共2页
基金
辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2000-142)
文摘
目的:研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2(IL-2)含量的变化及滨蒿内酯(Sco)对其的影响。方法:建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值,比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素(PHA)诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果:Sco剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用;Sco能够抑制PHA诱导的哮喘豚鼠T淋巴细胞转化;哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组,Sco也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论:Sco在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平,可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。
关键词
滨蒿内酯
哮喘
淋巴细胞转化
白细胞介素2
Keywords
scoparone
asthma
lymphocyte proliferation
interleukin-2
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
M_2-G_(i1α)融合蛋白在Sf9细胞中的表达及M_2AChR特异性药物的鉴别
张雪薇
郭政东
白立川
姜爱民
孙科
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
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职称材料
2
滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响
迟天燕
李智
范颖
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
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