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激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位
被引量：
2
1
作者
刘芙蓉
李彦姝
+1 位作者
张红艳
李丰
《电子显微学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期244-249,共6页
目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共...
目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共定位于细胞核内。在雌激素受体拮抗剂刺激下,两者在细胞浆内定位增加。结论:雌激素和雌激素受体拮抗剂刺激乳腺癌细胞改变ERα和MTA1的共定位。
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关键词
ERΑ
MTA1
共定位
激光共聚焦扫描显微镜
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职称材料
人SCG10基因原核质粒构建及其重组蛋白表达
2
作者
刘芙蓉
李彦姝
+3 位作者
张红艳
苏楠
李家滨
李丰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期491-493,共3页
目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用...
目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定。结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆菌中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCG10蛋白,Wstern blot检测到蛋白表达。结论构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达。
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关键词
SCG10蛋白纯化
融合蛋白
WESTERN
BLOT
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职称材料
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
3
作者
张红艳
王春玉
+3 位作者
姚远
李彦姝
王迪
李丰
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期202-206,共5页
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。...
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。结果:Smad2/3/4全长基因序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1myc-HisA中,酶切鉴定片段为1 401、1 275和1 656 bp。Western blotting检测到融合蛋白pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4的表达。结论:成功构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达。
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关键词
SMAD
蛋白免疫印记
融合蛋白
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职称材料
题名
激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位
被引量：
2
1
作者
刘芙蓉
李彦姝
张红艳
李丰
机构
中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室
出处
《电子显微学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期244-249,共6页
基金
国家自然科学基金重大研究计划资助项目(No.90813038)
国家自然科学基金资助项目(No.30771128)
文摘
目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共定位于细胞核内。在雌激素受体拮抗剂刺激下,两者在细胞浆内定位增加。结论:雌激素和雌激素受体拮抗剂刺激乳腺癌细胞改变ERα和MTA1的共定位。
关键词
ERΑ
MTA1
共定位
激光共聚焦扫描显微镜
Keywords
ERα
MTA1
colocalization
confocal laser scanning microscope
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人SCG10基因原核质粒构建及其重组蛋白表达
2
作者
刘芙蓉
李彦姝
张红艳
苏楠
李家滨
李丰
机构
中国医科大学
细胞
生物学
教研室
卫生部
细胞
生物学
重点
实验室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期491-493,共3页
基金
国家自然科学基金重大研究计划(90813038)
国家自然科学基金资助项目(30771128,31000627)
文摘
目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定。结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆菌中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCG10蛋白,Wstern blot检测到蛋白表达。结论构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达。
关键词
SCG10蛋白纯化
融合蛋白
WESTERN
BLOT
Keywords
SCG10
protein purification
fusion protein
Western blot
分类号
Q257 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
3
作者
张红艳
王春玉
姚远
李彦姝
王迪
李丰
机构
中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室
辽宁沈阳
辽宁省人民医院消化内科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期202-206,共5页
基金
国家自然科学基金资助课题(31171360,30900752,30800415)
教育部博士点基金资助课题(20102104110016)
文摘
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。结果:Smad2/3/4全长基因序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1myc-HisA中,酶切鉴定片段为1 401、1 275和1 656 bp。Western blotting检测到融合蛋白pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4的表达。结论:成功构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达。
关键词
SMAD
蛋白免疫印记
融合蛋白
Keywords
Smad
Western blotting
fusion protein
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位
刘芙蓉
李彦姝
张红艳
李丰
《电子显微学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人SCG10基因原核质粒构建及其重组蛋白表达
刘芙蓉
李彦姝
张红艳
苏楠
李家滨
李丰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
张红艳
王春玉
姚远
李彦姝
王迪
李丰
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
已选择
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