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激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位 被引量:2
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作者 刘芙蓉 李彦姝 +1 位作者 张红艳 李丰 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期244-249,共6页
目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共... 目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共定位于细胞核内。在雌激素受体拮抗剂刺激下,两者在细胞浆内定位增加。结论:雌激素和雌激素受体拮抗剂刺激乳腺癌细胞改变ERα和MTA1的共定位。 展开更多
关键词 ERΑ MTA1 共定位 激光共聚焦扫描显微镜
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p^(15)基因真核表达重组体及人宫颈癌细胞转染的研究 被引量:1
2
作者 时伟红 王太一 张学 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期52-53,共2页
将含人p15 cDNA质粒pBS-SK-p15以EcoRI和XhoI进行双酶切,再与真核表达载体pCRTM3经相同酶切点连接,转化感受态细菌,筛选、鉴定得到可在真核细胞中表达人p15基因的重组质粒PCR-hp15。以... 将含人p15 cDNA质粒pBS-SK-p15以EcoRI和XhoI进行双酶切,再与真核表达载体pCRTM3经相同酶切点连接,转化感受态细菌,筛选、鉴定得到可在真核细胞中表达人p15基因的重组质粒PCR-hp15。以脂质体介导法转染人宫颈癌细胞,用G418筛选,得到转染的人宫颈癌细胞,转染细胞的恶变程度有所改善。 展开更多
关键词 周期素依赖激酶抑制蛋白 人宫颈癌细胞 脂质体介导 转染 抑癌基因 p^15蛋白 重组质粒
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蛋白激酶CK2-β在SACC-83及SACC-LM细胞中的活性变化
3
作者 郭澍 王玉新 +3 位作者 孙长伏 宗志宏 刘芙蓉 于秉治 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期431-432,共2页
目的 :探讨蛋白激酶CK2 β在涎腺腺样囊性癌 (SACC)及肺转移涎腺腺样囊性癌 (SACC LM )中的活性变化。方法 :利用激酶活性测定方法进行活性测定分析。结果 :与未转移SACC(SACC 83)细胞相比 ,SACC LM细胞中蛋白激酶CK2 β具有较高的活... 目的 :探讨蛋白激酶CK2 β在涎腺腺样囊性癌 (SACC)及肺转移涎腺腺样囊性癌 (SACC LM )中的活性变化。方法 :利用激酶活性测定方法进行活性测定分析。结果 :与未转移SACC(SACC 83)细胞相比 ,SACC LM细胞中蛋白激酶CK2 β具有较高的活性 ;在两种细胞中 ,细胞核中的活性都高于在细胞质中的活性。 结论 :蛋白激酶CK2 展开更多
关键词 腺样囊性癌 肺转移 蛋白激酶CK2-β 激酶活性
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受试者工作特征曲线评价OCT/ALT在肝细胞癌诊断中的价值
4
作者 王晓梅 秦浩歌 李彦姝 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第20期1842-1843,共2页
目的研究鸟氨酸氨甲酰基转移酶/丙氨酸氨基转移酶(OCT/ALT)对肝细胞癌的诊断价值。方法测定87例肝细胞癌、75例慢性肝炎、66例肝硬化和72例健康对照者血清OCT和ALT水平,计算OCT/ALT值。并用受试者工作特征曲线(ROC)进行评价。结果肝细... 目的研究鸟氨酸氨甲酰基转移酶/丙氨酸氨基转移酶(OCT/ALT)对肝细胞癌的诊断价值。方法测定87例肝细胞癌、75例慢性肝炎、66例肝硬化和72例健康对照者血清OCT和ALT水平,计算OCT/ALT值。并用受试者工作特征曲线(ROC)进行评价。结果肝细胞癌组、肝炎组、肝硬化组OCT/ALT与对照组比较,差别均有统计学意义(P<0.05);肝炎组和肝硬化组OCT/ALT与肝细胞癌组比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。血清OCT/ALT的ROC下面积为0.855,OCT/ALT的最优截断点约为3.32,灵敏度和特异度分别为79.3%和87.3%。结论通过ROC评价,血清OCT/ALT可作为鉴别诊断肝细胞癌的指标。 展开更多
关键词 鸟氨酸氨甲酰基转移酶 丙氨酸氨基转移酶 肝细胞
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细胞的内质网的超微结构
5
作者 宋今丹 王明武 +1 位作者 王芸庆 毕卫真 《电子显微学报》 CAS CSCD 1993年第1期14-14,共1页
细胞的内质网呈网状遍布于细胞质内,所以也可称之为内质网膜系统。内质网是细胞的内膜系统的重要成分,在蛋白质合成,脂类合成和糖原代谢等方面起着重要作用。研究证明细胞内的许多膜性结构均来源于内质网,因而它在细胞的内膜系统中占有... 细胞的内质网呈网状遍布于细胞质内,所以也可称之为内质网膜系统。内质网是细胞的内膜系统的重要成分,在蛋白质合成,脂类合成和糖原代谢等方面起着重要作用。研究证明细胞内的许多膜性结构均来源于内质网,因而它在细胞的内膜系统中占有中心地位。内质网的微细结构的观察与研究对了解细胞的正常生理和病理改变具有重要意义。我们对培训的非洲绿猴肾上皮细胞(CV-1),人早幼粒白血病细胞(HL-60)、活检的人体胃粘膜细胞和胃癌细胞以及手术切除的人体结肠细胞和结肠癌细胞等数种细胞的内质网,应用电镜技术和光镜技术进行了观察与分析。 展开更多
关键词 细胞 内质膜 超微结构
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不同侵袭力癌细胞内质网膜系统的对比研究
6
作者 李艳春 王芸庆 宋今丹 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期324-326,共3页
目的:研究癌细胞的内质网膜系统与其侵袭性之间的相互关系。方法:应用共焦激光扫描显微技术观察不同侵袭力的人大肠癌细胞 C C L229 及 C X1 的内质网膜系统,结合流式细胞仪技术测定两者内质网膜系统的荧光强度。结果:... 目的:研究癌细胞的内质网膜系统与其侵袭性之间的相互关系。方法:应用共焦激光扫描显微技术观察不同侵袭力的人大肠癌细胞 C C L229 及 C X1 的内质网膜系统,结合流式细胞仪技术测定两者内质网膜系统的荧光强度。结果:两种癌细胞内均存在着立体网络状结构的内质网膜系统,细胞核周围致密,周边逐渐稀疏。高侵袭力的 C C L229 细胞的内质网发达,伪足中存在独枝或立体网络状的内质网,而低侵袭力的 C X1 细胞的内质网相对不发达,未见伪足样结构。流式细胞仪检测 C C L229 细胞的 E R 的平均荧光强度为1 024 ±50297 , C X1 细胞的 E R 的平均荧光强度为46290 ±21718 ,统计学处理两者差异显著( P< 001) 。结论:高侵袭力的 C C L229 细胞与低侵袭力的 C X1 细胞的内质网膜系统形态及数量上均存在差异,可能与内质网合成和侵袭相关之分泌蛋白的功能有关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 直肠肿瘤 肿瘤浸润 内质网
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p27^(KIP1)和CyclinE在骨肉瘤中表达的意义 被引量:3
7
作者 吕刚 韩壮 +4 位作者 王敏 孙传海 张学 姜彦多 崔军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期204-207,共4页
目的:研究p27KIP1和CyclinE蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法:应用免疫组化S-P方法检测28例骨肉瘤石蜡标本中p27KIP1和CyclinE蛋白的表达情况。结果:p27KIP1蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为42.9%,在对... 目的:研究p27KIP1和CyclinE蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法:应用免疫组化S-P方法检测28例骨肉瘤石蜡标本中p27KIP1和CyclinE蛋白的表达情况。结果:p27KIP1蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为42.9%,在对照组20例骨软骨瘤中为75.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.05)。CyclinE蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为67.9%,在20例骨软骨瘤中为10.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.01)。p27KIP1蛋白在骨肉瘤中的表达阴性率为57.1%,与CyclinE蛋白在骨肉瘤中表达阴性率67.9%相比二者差异不显著(P>0.05)。结论:p27KIP1在骨肉瘤中表达降低,CyclinE在骨肉瘤中高表达,二者与骨肉瘤发生机制有关,且具有相关性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 P27^KIP1蛋白 CYCLINE蛋白 免疫组织化学 临床意义
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脑胶质瘤致癫的化学突触机制研究进展 被引量:2
8
作者 孙洪赞 范国光 +1 位作者 王桂玲 郭启勇 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期446-448,F0003,共4页
Seizures may be the first or sometimes the only manifestation of patients with glioma in clinics. The aim of operation is to eliminate epilepsy far beyond mere resection of tumor mass. The underlyling mechanisms of gl... Seizures may be the first or sometimes the only manifestation of patients with glioma in clinics. The aim of operation is to eliminate epilepsy far beyond mere resection of tumor mass. The underlyling mechanisms of glioma-associated epileptogenesis are poorly understood. Recently the theory of amino-acid like neurotransmitters in chemical synapse is gradually accepted. However, the molecular mechanisms remain to be further investigated on how glutamate release is regulated and how synaptic homeostasis in peripheral neurons is kept or disturbed. So detailed studies are needed to clarify specific molecular target and provide proper evidence for optimal antiepileptic drugs in glioma-associated epileptoge-nesis. 展开更多
关键词 脑肿瘤 神经胶质瘤 癫癎 受体 神经递质 神经递质转运蛋白质类
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ΔNp63蛋白在骨肉瘤中表达的意义 被引量:1
9
作者 韩壮 王敏 +4 位作者 吕刚 张学 姜彦多 孙传海 崔军 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期195-196,共2页
目的 :研究ΔNp6 3蛋白在骨肉瘤中的表达 ,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法 :应用免疫组化S P法检测 2 8例骨肉瘤石蜡标本中ΔNp6 3蛋白的表达情况。 结果 :在 2 8例骨肉瘤中仅有 1例高分化骨肉瘤出现弱阳性反应 ,还有 1例... 目的 :研究ΔNp6 3蛋白在骨肉瘤中的表达 ,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法 :应用免疫组化S P法检测 2 8例骨肉瘤石蜡标本中ΔNp6 3蛋白的表达情况。 结果 :在 2 8例骨肉瘤中仅有 1例高分化骨肉瘤出现弱阳性反应 ,还有 1例骨肉瘤ΔNp6 3表达为阴性 ,二者癌旁组织呈阳性反应 (+)。对照组的 15例骨软骨瘤中 ,共有 3例阳性 ,其中 2例为 (+) ,另 1例为强阳性 (+++)。结论 :ΔNp6 3在骨软骨瘤和骨肉瘤的癌旁正常组织中呈阳性或强阳性反应 ,推测 p6 3可能具有肿瘤抑制基因功能。 展开更多
关键词 骨肉瘤 △Np63蛋白 免疫组织化学
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人大肠癌组织中纤维连接蛋白的分布 被引量:3
10
作者 王红梅 宋今丹 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期15-17,共3页
目的:探讨纤维连接蛋白(FN)与大肠癌的关系。方法:应用灵敏度高、特异性强的生物素-卵白素酶标记复合物免疫组化技术,结合计算机图像分析系统,对正常大肠粘膜、大肠癌组织FN的分布进行了全面系统的定性、定量研究。结果:发... 目的:探讨纤维连接蛋白(FN)与大肠癌的关系。方法:应用灵敏度高、特异性强的生物素-卵白素酶标记复合物免疫组化技术,结合计算机图像分析系统,对正常大肠粘膜、大肠癌组织FN的分布进行了全面系统的定性、定量研究。结果:发现随着肿瘤分化程度的降低,细胞FN阳性标记的密度、阳性细胞百分率逐渐降低,平均灰度值逐渐升高;Dukes分期由A至C期,细胞FN阳性标记的密度亦逐渐降低,平均灰度值逐渐升高,而基膜FN和间质FN无明显变化。结论:表明细胞FN与大肠癌组织分化、侵袭和转移有关。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 纤维连接蛋白 分化
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PAK4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
11
作者 代炜 张红艳 +2 位作者 李彦姝 李妍 孙长伏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期11-14,F0002,共5页
目的:构建PAK4基因RNAi慢病毒载体,并对其在涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞中干扰效率进行鉴定。方法:针对PAK4基因RNAi有效靶序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCsil-GFP载体连接产生shPAK4i-LV慢病毒... 目的:构建PAK4基因RNAi慢病毒载体,并对其在涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞中干扰效率进行鉴定。方法:针对PAK4基因RNAi有效靶序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCsil-GFP载体连接产生shPAK4i-LV慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用shPAK4i-LV载体、pHelper1.0载体和pHelper 2.0质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达水平测定病毒滴度。结果:PCR扩增出插入片段,测序证实成功构建了PAK4-shRNA慢病毒载体shPAK4i-LV。包装并浓缩慢病毒,滴度为2E+9TU.mL-1。将病毒感染SACC-83细胞,real-time PCR检测PAK4的mRNA表达下调70%以上。结论:成功构建了shPAK4i-LV病毒载体并建立了SACC-83-shPAK4i细胞模型,为PAK4在肿瘤信号转导通路中的研究提供工作基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 PAK4基因 质粒构建 慢病毒 腺样囊性
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人SCG10基因原核质粒构建及其重组蛋白表达
12
作者 刘芙蓉 李彦姝 +3 位作者 张红艳 苏楠 李家滨 李丰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期491-493,共3页
目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用... 目的构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至pGEX-5X-1载体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆菌中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定。结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆菌中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCG10蛋白,Wstern blot检测到蛋白表达。结论构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达。 展开更多
关键词 SCG10蛋白纯化 融合蛋白 WESTERN BLOT
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Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
13
作者 张红艳 王春玉 +3 位作者 姚远 李彦姝 王迪 李丰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期202-206,共5页
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。... 目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。结果:Smad2/3/4全长基因序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1myc-HisA中,酶切鉴定片段为1 401、1 275和1 656 bp。Western blotting检测到融合蛋白pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4的表达。结论:成功构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达。 展开更多
关键词 SMAD 蛋白免疫印记 融合蛋白
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一种高效、简便、实用的酶标应用软件
14
作者 纪晓辉 宋今丹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第S2期75-77,共3页
酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)准确性,高操作简便,已广泛应用于细胞学、免疫学等各领域。我们在进行结肠癌单克隆抗体(ND-1)
关键词 结肠癌 单克隆抗体 应用软件 免疫学 酶标板 小鼠腹水 抗体活性 标准曲线 异步通讯 待测样品
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RUNX3全长和不同结构域原核表达载体的构建及其重组蛋白表达
15
作者 宋艳艳 王桂玲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1112-1115,共4页
目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表... 目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌(E.coli)BL21中诱导其融合蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测其蛋白表达情况。结果:EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后得到与预期大小相符的FL(1 245bp)、ΔRunt(843bp)、Nter(159bp)、Runt(402bp)和Cter(684bp)5个载体片段。SDS-PAGE电泳检测,RUNX3全长及各个结构域截短GST-RUNX3截短融合蛋白(GST-FL、GST-Runt、GST-Nter和GST-Cter)相对分子质量分别为72 000、40 000、32 000和51 000。结论:成功构建RUNX3全长和各个结构域截短的GST标签的原核表达载体,并实现其重组蛋白在原核细胞中的表达。 展开更多
关键词 RUNX3 载体 蛋白诱导 蛋白表达
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癌基因扩增结构—双微体的扫描电镜观察
16
作者 谢荣林 王芸庆 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第4期265-266,共2页
本文应用扫描电镜观察了人急性早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)细胞中癌基因扩增的结构双微体,镜下其数量不等,范围在0~43之间,直径一段为0.5~0.8μm,约1/3为单球体。
关键词 癌基因 双微体 扫描电镜 白血病
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