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TrkA基因的表达抑制神经母细胞瘤血管生成的实验研究 被引量：3
1
作者 张继红 张锦华 刘戈飞 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期248-251,共4页
目的:探讨TrkA基因通过抑制神经母细胞瘤(NB)血管生成而阻止其生长、转移的可行性。方法:常规培养对照组SY5Y细胞、TrkA基因高表达的实验组细胞(SY5Y-TrkA)和表达载体基因的空载体组细胞(SY5Y-Vec);比较三组细胞的裸鼠皮下致瘤性;通过RT... 目的:探讨TrkA基因通过抑制神经母细胞瘤(NB)血管生成而阻止其生长、转移的可行性。方法:常规培养对照组SY5Y细胞、TrkA基因高表达的实验组细胞(SY5Y-TrkA)和表达载体基因的空载体组细胞(SY5Y-Vec);比较三组细胞的裸鼠皮下致瘤性;通过RT-PCR、免疫组织化学、微血管面积计算检测并比较三种细胞所致的肿瘤瘤体内血管生成情况。结果:SY5Y-TrkA细胞在裸鼠皮下的致瘤性和其所致肿瘤的血管生成能力明显下降。肿瘤终体积:对照组1.736±0.485cm3,空载体组1.803±0.751cm3,实验组0.3945±0.015cm3(P<0.01);对照组与实验组相比,血管内皮生长因子(VEGF)的表达差别显著(P<0.01);微血管密度(MVD):对照组27.21±14.58,空载体组27.76±14.15,实验组4.08±4.72(P<0.01)。结论:TrkA基因能有效抑制神经母细胞瘤的血管生成和肿瘤生长,为应用基因抗血管治疗神经母细胞瘤提供理论依据。 展开更多
关键词 TrkA基因 血管生成 神经母细胞瘤
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联合应用hIL-2和hGM-CSF基因瘤苗抗肿瘤作用的研究 被引量：2
2
作者 宋永胜 杨威 张学 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期21-22,29,共3页
目的 :探讨联合应用人白细胞介素 2 (hIL 2 )和人粒细胞巨噬细胞刺激因子 (hGM CSF)基因瘤苗抗肿瘤作用。方法 :经逆转录病毒载体将hIL 2基因及hGM CSF基因导入大鼠Walker瘤细胞WRC2 5 6中 ,制备瘤苗接种荷瘤大鼠。结果 :经PCR Southern... 目的 :探讨联合应用人白细胞介素 2 (hIL 2 )和人粒细胞巨噬细胞刺激因子 (hGM CSF)基因瘤苗抗肿瘤作用。方法 :经逆转录病毒载体将hIL 2基因及hGM CSF基因导入大鼠Walker瘤细胞WRC2 5 6中 ,制备瘤苗接种荷瘤大鼠。结果 :经PCR SouthernBlot检测证实hIL 2基因及hGM CSF基因已成功导入WRC2 5 6细胞基因组中 ,经生物学活性检测证实转基因细胞具有分泌hIL 2及hGM CSF活性。转基因瘤苗经 6 0GyX线灭活 ,接种荷瘤Walker瘤模型。两种瘤苗确可诱导有效抗肿瘤反应 ,但与单独应用一种瘤苗相比较 ,联合应用无相加或协同作用。结论 :两种瘤苗可诱导有效抗肿瘤反应 。 展开更多
关键词 人白细胞介素2 人粒细胞巨噬细胞刺激因子 基因转移 肿瘤疫苗
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ATRA对NB细胞增殖抑制及诱导分化作用的研究 被引量：1
3
作者 佟海侠 张锦华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期81-84,共4页
目的 :通过对神经母细胞瘤 (NB)细胞系SH SY5Y和SMS KCNR的体外实验 ,探讨全反式维甲酸 (A TRA)对NB细胞增殖抑制的可能分子机制及脑源性神经营养因子 (BDNF) TrkB信号转导途径在NB细胞分化中的作用。方法 :通过台盼蓝拒染计数活细胞 ... 目的 :通过对神经母细胞瘤 (NB)细胞系SH SY5Y和SMS KCNR的体外实验 ,探讨全反式维甲酸 (A TRA)对NB细胞增殖抑制的可能分子机制及脑源性神经营养因子 (BDNF) TrkB信号转导途径在NB细胞分化中的作用。方法 :通过台盼蓝拒染计数活细胞 ,用倒置相差显微镜观察加药处理前后细胞形态学变化。结果 :5 μmol/LATRA抑制NB细胞系SMS KCNR和SH SY5Y细胞增殖 ,而 5nmol/LATRA无此作用 ;ATRA可诱导SMS KCNR细胞分化成熟 ,对SH SY5Y细胞诱导分化作用极弱 ;BDNF可使经ATRA处理的SY5Y细胞发生显著形态学分化。结论 :5 μmol/LATRA对人NB细胞系SMS KCNR和SH SY5Y细胞的体外增殖有抑制作用 ;ATRA能诱导人NB细胞系SMS KCNR细胞分化成熟 ,ATRA与BDNF共同作用可使SH SY5Y发生显著形态学分化 ;BDNF TrkB信号转导途径的激活可能是ATRA体外诱导NB细胞分化逆转的分子生物学机制之一。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 全反式维甲酸 诱导分化 增殖抑制 脑源性神经营养因子
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可溶性纤维蛋白促进细胞伸展及其临床意义
4
作者 杨威 张敬东 +2 位作者 宋永胜 朝仓伸司 松田道生 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期272-275,共4页
目的：探讨可溶性纤维蛋白（ Ｓ Ｆ）使细胞粘附伸展的可能性及其机理。方法：利用 Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ３００ 层析柱及 Ｉ Ｆ１ 单克隆抗体亲和层析柱纯化血浆 Ｓ Ｆ。应用细胞粘附及粘附抑制方法观察 Ｓ Ｆ及弥散性血管内凝血... 目的：探讨可溶性纤维蛋白（ Ｓ Ｆ）使细胞粘附伸展的可能性及其机理。方法：利用 Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ３００ 层析柱及 Ｉ Ｆ１ 单克隆抗体亲和层析柱纯化血浆 Ｓ Ｆ。应用细胞粘附及粘附抑制方法观察 Ｓ Ｆ及弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ）患者血浆 Ｓ Ｆ使细胞伸展的情况。结果：细胞能在固定的 Ｓ Ｆ上伸展，并能被外源性 Ｓ Ｆ精氨酸甘氨酸天冬氨酸（ Ｒ Ｇ Ｄ）合成肽所抑制，但不能被纤维蛋白原和纤维蛋白单体所抑制，片段 Ｘ（缺乏 Ｒ Ｇ Ｄ２ 序列的纤维蛋白原片段）与纤维蛋白单体形成的复合物，使细胞伸展活性明显减低。结论： Ｓ Ｆ形成后其结构变化是引起细胞伸展的关键。在 Ｓ Ｆ结构中，纤维蛋白原的 Ｒ Ｇ Ｄ２ 序列在细胞伸展中起重要作用。 Ｓ Ｆ做为一个粘附分子在体内血栓形成过程中起重要调节作用。 展开更多
关键词 可溶性纤维蛋白 细胞伸展 血管内凝血 DIC
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激活的高分子激肽原抗细胞伸展与体外连接蛋白结构变化关系的探讨 被引量：2
5
作者 杨威 宋永胜 +3 位作者 李春义 徐大庆 陈世洁 张锦华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期5-8,共4页
目的 :通过观察结构上改变的体外连接蛋白 (aVN)底物上激活的高分子激肽原 (HKa)对细胞伸展的影响 ,比较VN与aVN上HKa对细胞抑制活性。方法 :采用细胞杂交及细胞粘附方法观察在HKa存在与否下VN对细胞伸展的影响。结果 :HKa存在下MG 6 3... 目的 :通过观察结构上改变的体外连接蛋白 (aVN)底物上激活的高分子激肽原 (HKa)对细胞伸展的影响 ,比较VN与aVN上HKa对细胞抑制活性。方法 :采用细胞杂交及细胞粘附方法观察在HKa存在与否下VN对细胞伸展的影响。结果 :HKa存在下MG 6 3细胞不能在固定的VN上伸展 ,但能在aVN上伸展 ;天然VN固定于塑料表面后用尿素处理 ,HKa存在或缺乏状态下细胞伸展活性相同。细胞杂交结果显示 ,在包被VN的硝酸纤维素膜上MG 6 3细胞伸展 ,存在HKa状态下细胞不能伸展于天然VN ,而伸展于aVN底物。结论 :在天然VN与aVN底物上HKa对细胞的抑制活性不同 。 展开更多
关键词 激活 高分子激肽原 体外连接蛋白 细胞粘附 细胞杂交
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K252a对表达TrkB的NB细胞耐药性的影响 被引量：4
6
作者 张继红 李爱敏 +2 位作者 滕绍春 张可仞中国医科大学第二临床学院小儿外科 张锦华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期1144-1147,共4页
目的:使用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5YNB(SY5Y)细胞的TrkB表达,加入BDNF激活TrkB/BDNF信号传导通路使TrkB磷酸化,然后用特异性酪氨酸激酶抑制剂K252a阻断该通路,观察NB细胞对化疗药物—顺铂(CDDP)敏感性的变化。方法:用ATRA诱导SY5Y... 目的:使用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5YNB(SY5Y)细胞的TrkB表达,加入BDNF激活TrkB/BDNF信号传导通路使TrkB磷酸化,然后用特异性酪氨酸激酶抑制剂K252a阻断该通路,观察NB细胞对化疗药物—顺铂(CDDP)敏感性的变化。方法:用ATRA诱导SY5Y细胞的TrkB高表达后,用BDNF、CDDP和TrkB信号传导通路的特异性阻断剂—K252a处理,MTT法检测细胞的存活率变化;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;应用免疫组化法检测细胞磷酸化TrkB(p-TrkB)的表达水平。结果:ATRA能特异性诱导TrkB的表达,加入BDNF后可激活TrkB/BDNF信号传导通路并能引起TrkB的自动磷酸化;K252a能够阻断TrkB的磷酸化和TrkB/BDNF信号传导通路;经CDDP处理的SY5Y细胞的存活率下降、凋亡率上升。结论:阻断TrkB/BDNF信号传导通路可提高共表达TrkB/BDNF的NB细胞的化疗敏感性。因此,应用TrkB的抑制剂治疗NB有望提高该病的临床治愈率。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 TrkB/BDNF信号传导通路 化疗耐药 K252A
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隐蔽型神经母细胞瘤的影像学定位诊断 被引量：3
7
作者 蒲英英 张锦华 +5 位作者 王善伯 耿文清 杨学忠 周微微 柳雅君 孙悦 《中国医学影像学杂志》 CSCD 1998年第2期109-111,共3页
目的：对腹部不能触及肿块的小儿神经母细胞瘤（隐蔽型）于手术前进行超声、ＣＴ与磁共振检查，以确定原发肿瘤的部位。材料与方法：本组共７１例，均来自中国医科大学第二临床学院小儿内、外科与眼科，５岁以下者５７例。均做过超声检... 目的：对腹部不能触及肿块的小儿神经母细胞瘤（隐蔽型）于手术前进行超声、ＣＴ与磁共振检查，以确定原发肿瘤的部位。材料与方法：本组共７１例，均来自中国医科大学第二临床学院小儿内、外科与眼科，５岁以下者５７例。均做过超声检查，２２例曾做ＣＴ检查，２５例曾做磁共振检查。结果：７１例中５２例超声于肾上腺或后腹壁显示实质性肿块，检出率７３％；ＣＴ检查２２例，１２例检出肿瘤，检出率５４５％；磁共振检查２５例，１９例检出肿瘤，检出率７６％。３９例行手术治疗，与手术对照，超声３８例符合，诊断符合率９７％；其中１２例曾做ＣＴ检查，仅６例符合，诊断符合率仅５０％；其中１６例曾做磁共振检查，全部与手术一致（１６／１６）。结论：影像学难以对本病作出定性诊断，而手术前影像学定位诊断，应以超声检查为主，必要时再对部分病例进行磁共振检查。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 CT 超声波诊断
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纤维蛋白单体的制备及其引起细胞伸展的分子机理分析 被引量：3
8
作者 杨威 朝仓伸司 松田道生 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期85-87,共3页
目的：探讨纤维蛋白单体引起细胞伸展的机理。方法：通过２ｍｏｌ／ＬＮａＢｒ溶解纤维蛋白制成纤维蛋白单体。采用细胞粘附及抑制方法观察细胞伸展状况。结果：人神经胶质瘤细胞不能在固定的纤维蛋白原上伸展，但能在纤维蛋白单体上伸... 目的：探讨纤维蛋白单体引起细胞伸展的机理。方法：通过２ｍｏｌ／ＬＮａＢｒ溶解纤维蛋白制成纤维蛋白单体。采用细胞粘附及抑制方法观察细胞伸展状况。结果：人神经胶质瘤细胞不能在固定的纤维蛋白原上伸展，但能在纤维蛋白单体上伸展，此伸展过程不能被外来的纤维蛋白原、片段Ｅ和Ｄ抑制，但能被纤维蛋白单体和ＲＧＤ（精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸）序列所抑制。结论：纤维蛋白单体引起细胞伸展的可能机理为纤维蛋白单体α链上的两个ＲＧＤ序列Ａα（９５－９７）和Ａα（５７２－５７４）暴露，从而促使纤维蛋白单体与细胞作用。 展开更多
关键词 纤维蛋白单体 制备 细胞伸展 分子机理
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可溶性血纤蛋白促进细胞伸展及其作用机制 被引量：2
9
作者 杨威 松田道生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期260-264,共5页
可溶性血纤蛋白（ｓｏｌｕｂｌｅｆｉｂｒｉｎ，ＳＦ）为血纤蛋白单体和血纤蛋白原１∶２的复合物．现已知在血液凝固系统被激活的病理状态下，存在于循环血液中，然而它的生理作用仍然不明．首次发现细胞能在固定的ＳＦ上伸展，并能被... 可溶性血纤蛋白（ｓｏｌｕｂｌｅｆｉｂｒｉｎ，ＳＦ）为血纤蛋白单体和血纤蛋白原１∶２的复合物．现已知在血液凝固系统被激活的病理状态下，存在于循环血液中，然而它的生理作用仍然不明．首次发现细胞能在固定的ＳＦ上伸展，并能被外源性ＳＦ及精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸（ＲＧＤ）合成肽所抑制，但不能被血纤蛋白原和血纤蛋白单体所抑制，提示ＳＦ形成后其结构变化是引起细胞伸展的关键．片段Ｘ（缺乏ＲＧＤ２序列的血纤蛋白原片段）与血纤蛋白单体形成的复合物，使细胞伸展活性明显减低，提示在ＳＦ结构中，血纤蛋白原的ＲＧＤ２序列在细胞伸展中起重要作用．同时发现ＤＩＣ患者血浆中的ＳＦ也具有细胞伸展活性． 展开更多
关键词 可溶性血纤蛋白 细胞伸展 弥散性 血管内凝血
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依赖纤维蛋白单体的细胞伸展及其意义
10
作者 杨威 朝仓伸司 松田道生 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期166-168,共3页
目的：检测肿瘤细胞表面纤维蛋白受体的分布情况及整合素相关蛋白（ｉｎｔｅｇｒｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＩＡＰ）参与细胞伸展的状况。方法：采用免疫组织化学法观察纤维蛋白单体做为配体时人神经胶质瘤细胞表面受体... 目的：检测肿瘤细胞表面纤维蛋白受体的分布情况及整合素相关蛋白（ｉｎｔｅｇｒｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＩＡＰ）参与细胞伸展的状况。方法：采用免疫组织化学法观察纤维蛋白单体做为配体时人神经胶质瘤细胞表面受体的分布情况；并采用细胞粘附及抑制方法观察ＩＡＰ与纤维蛋白单体引起的细胞伸展的关系。结果：纤维蛋白单体不仅能识别体外连接蛋白受体（ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，αｖβ３），而且能识别纤维连接蛋白受体（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，α５β１）；纤维蛋白单体介导的细胞伸展不能被抗ＩＡＰ抗体所抑制。结论：纤维蛋白单体可能动员两个或两个以上的整合素引起细胞仲展。α５β１可能较αｖβ３更为重要。 展开更多
关键词 纤维蛋白单体 细胞伸展 受体 肿瘤 病理
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