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P27^(Kip1)和TGF-β1在原代APL细胞凋亡中作用机制的研究 被引量：2
1
作者 王蕾 李艳 +2 位作者 王萍萍 卢香兰 王柏勋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期324-330,共7页
本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对原代APL细胞凋亡及周期的影响,As2O2作用前后P27Kip1、TGF-β1、cyclinE和bcl-2的变化以及P27Kip1在As2O3诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡中的作用。用细胞形态学及流式细胞仪分别检测... 本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对原代APL细胞凋亡及周期的影响,As2O2作用前后P27Kip1、TGF-β1、cyclinE和bcl-2的变化以及P27Kip1在As2O3诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡中的作用。用细胞形态学及流式细胞仪分别检测原代APL细胞凋亡和细胞周期改变,免疫组织化学法和RT-PCR技术检测药物处理前后细胞P27Kip1、TGF-β1、cyclinE以及BCL-2蛋白和基因表达的变化。结果表明:As2O3与APL细胞共同培养24小时,浓度为1、5、10μmol/L时,凋亡细胞所占比例分别为1.42%、4.57%、10.67%;至48小时,凋亡细胞分别为8.92%、16.07%和18.90%,明显高于相同浓度的As2O3作用24小时(p<0.05);至72小时,细胞以碎片为主。同一时段随着As2O3浓度的增加,APL细胞凋亡不断增多;同一浓度As2O3作用于APL细胞,随着作用时间的延长,APL细胞凋亡也随之增多。5、10μmol/L的As2O3作用于APL细胞24、48、72小时可见细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例均明显高于对照组(p<0.05),而1μmol/LAs2O3作用后的细胞周期无明显变化。1、5和10μmol/LAs2O3作用于APL细胞,P27Kip1蛋白表达增高,P27Kip1mRNA与β-actin灰度值之比(P27Kip1/β-actin)分别为0.181、0.489和0.921,表明随着As2O3浓度的增高,P27Kip1mRNA表达水平显著上调(p<0.05),P27Kip1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.55,p<0.05);与对照组相比,TGF-β1蛋白和mRNA表达上调,伴有CyclinE、BCL-2蛋白和mRNA表达下调,TGF-β1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.51,p<0.05),TGF-β1表达与P27Kip1表达之间也存在正相关(r=0.31,p<0.05)。结论:As2O3体外可诱导原代APL细胞凋亡,存在时间-剂量依赖关系,并使细胞周期阻滞于G1期。P27Kip1表达的变化情况与As2O3诱导细胞凋亡的作用效果密切相关,As2O3诱导原代APL细胞凋亡的机制可能是通过上调TGF-β1,从而上调P27Kip1,拮抗CyclinE和BCL-2的作用,抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞于G1期,从而诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 P27^KIP1 TGF-Β1 急性早幼粒细胞白血病 细胞凋亡 CYCLIN E 三氧化二砷
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急性白血病患者P-糖蛋白的表达及功能分析 被引量：2
2
作者 高峰 何娟 +4 位作者 李艳 郑志红 侯科佐 卢香兰 刘云鹏 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期462-463,468,共3页
目的:研究P-糖蛋白(P-gp)在急性白血病(AL)患者中的表达及功能。方法:用免疫组化检测CD34、P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的表达、功能。结果:CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关(P=0.001,r=0.475;P=0.003,r=0.429),P-gp表达与功能呈... 目的:研究P-糖蛋白(P-gp)在急性白血病(AL)患者中的表达及功能。方法:用免疫组化检测CD34、P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的表达、功能。结果:CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关(P=0.001,r=0.475;P=0.003,r=0.429),P-gp表达与功能呈正相关(P=0.031,r=0.341)。初治急性早幼粒细胞白血病(APL)组中无P-gp表达+、P-gp功能+,明显低于初治急性髓细胞白血病(AML)组(41.1%,35.3%,P<0.05)。初治急性淋巴细胞白血病(ALL)组中P-gp表达+28.6%,P-gp功能+28.6%,与初治AML组无差异(P>0.05)。初治AL组P-gp表达+25%,复发/难治组中P-gp表达+33.3%,两组无差异(P>0.05);P-gp功能+22.7%,低于复发/难治组P-gp功能+66.7%(P<0.05)。<50岁初治AL组P-gp表达+26.3%,与≥50岁初治AL组无差异(P>0.05);P-gp功能+15.8%,低于≥50岁初治AL组(P<0.05)。结论:P-gp功能的检测对AL的化疗更有临床指导意义。 展开更多
关键词 多药耐药 急性白血病 P-糖蛋白
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TGF-β1和(或)三氧化二砷作用于HL-60细胞后P27^(Kip1)表达及凋亡情况的研究 被引量：2
3
作者 于锦香 孟艳立 李艳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期893-897,共5页
本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE和BCL-2的变化情况。As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期... 本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE和BCL-2的变化情况。As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期改变情况,应用免疫组织化学检测药物处理前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE以及BCL-2表达的变化情况。结果表明:As2O3和TGF-β1单用均可以诱导HL-60细胞发生凋亡,联合处理对HL-60细胞生长抑制作用强于单药处理,其中5μmol/LAs2O3作用最强,5ng/mlTGF-β1处理可引起HL-60细胞的细胞周期阻滞于G1期(p<0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组P27Kip1的表达较对照组增强(p<0.05);5μmol/LAs2O3处理组P27Kip1的表达与对照组比较无明显差异(p>0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组均可见cyclinE蛋白表达下调(p<0.05)。5μmol/LAs2O3和联合处理组可见内源性TGF-β1表达上调(p<0.05)。结论:As2O3、外源性TGF-β1均可诱导HL-60细胞凋亡,联合处理组诱导凋亡作用强于对照组和单药处理组,TGF-β1处理可引起HL-60细胞周期阻滞于G1期。TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡过程中P27Kip1表达增强,拮抗cyclinE和BCL-2的作用,细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡,这表明P27Kip1是TGF-β引起细胞周期阻滞的关键效应物,外源性TGF-β1又通过上调内源性TGF-β1的表达增强As2O3诱导原代APL细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 TGF-Β1 CYCLIN E 三氧化二砷 BCL-2 HL-60细胞 P27^KIP1 细胞凋亡
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