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MAP激酶家族在淀粉样β蛋白片段25~35引起的大鼠海马炎症反应及细胞凋亡中的作用(英文) 被引量:11
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作者 金英 范莹 +3 位作者 闫恩志 宗志红 包翠芬 李智 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期161-168,共8页
目的 研究淀粉样β蛋白片段2 5~35(Aβ2 5~35)引起的大鼠海马炎症反应、细胞凋亡机制及抗炎药物布洛芬的保护作用。方法 大鼠灌胃给予布洛芬7.5mg·kg- 1,连续应用3周,脑室内单次注射Aβ2 5~35(10 μL ,1mmol·L- 1) ,注... 目的 研究淀粉样β蛋白片段2 5~35(Aβ2 5~35)引起的大鼠海马炎症反应、细胞凋亡机制及抗炎药物布洛芬的保护作用。方法 大鼠灌胃给予布洛芬7.5mg·kg- 1,连续应用3周,脑室内单次注射Aβ2 5~35(10 μL ,1mmol·L- 1) ,注射后继续应用布洛芬1周后,取脑,进行尼氏染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星形胶质细胞激活。Western印迹观察白细胞介素 1β(IL 1β) ,胞外信号调节激酶1/ 2 (ERK1/ 2 ) ,有丝分裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK) ,蛋白激酶C(PKC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(caspase 3)蛋白表达。RT PCR分析IL 1βmRNA表达水平。结果 脑室内注射Aβ2 5~35可引起海马CA1区星形胶质细胞激活和浸润,IL 1β蛋白表达和IL 1βmRNA表达水平明显增加,这种炎症反应伴有海马CA1区锥体神经元损伤。另外,Aβ2 5~35也能引起磷酸化的p38MAPK蛋白表达较对照组明显增加,从对照组0 .16 7±0 .0 91增加到0 .4 97±0 .0 5 9(P <0 .0 1,n =4 )。使磷酸化的ERK1/ 2蛋白表达下调,ERK1的表达从对照组0 .14 6±0 .0 10下降到0 (P <0 .0 1,n =4 )。ERK2表达从对照组的0 .4 12±0 .0 5 4下降到0 .131±0 .0 38(P <0 .0 1,n =4 )。这些改变伴随有caspase 展开更多
关键词 淀粉样Β-蛋白 炎症 MAP激酶信号系统 p38 MAP激酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 细胞凋亡
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靶向REST基因TALEN质粒的快速构建与活性检测 被引量:1
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作者 张殿宝 赵峰 +4 位作者 张涛 林学文 王瑞 施萍 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期883-886,890,共5页
目的针对人REST基因设计并构建特异性类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)质粒,快速获得具有较高突变效率的TALEN。方法根据REST的序列信息设计TALEN靶位,使用单元组装的方法快速构建TALEN质粒,在293T细胞中进行活性检测并计算突变效率... 目的针对人REST基因设计并构建特异性类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)质粒,快速获得具有较高突变效率的TALEN。方法根据REST的序列信息设计TALEN靶位,使用单元组装的方法快速构建TALEN质粒,在293T细胞中进行活性检测并计算突变效率。结果针对REST设计并成功构建5个TALEN质粒,组成6对TALEN并实现基因打靶,其中L1和R3组合的突变效率达到60.9%。结论成功获得了靶向人REST基因的高效TALEN,为进一步研究REST的基因功能及其在相关疾病中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 REST 类转录激活因子效应物核酸酶 质粒构建 活性检测
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miR-608在成釉细胞瘤中的表达及意义 被引量:2
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作者 陈井阳 钟鸣 +1 位作者 沈文静 刘洁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期724-728,共5页
目的研究mi R-608在成釉细胞瘤(AB)中的表达及意义。方法利用实时茎环定量PCR方法检测mi R-608在26例人成釉细胞瘤(AB组)及17例瘤旁组织(对照组)中的表达水平,比较mi R-608在AB组与对照组,原发AB组与复发AB组,以及AB不同临床病理特征的... 目的研究mi R-608在成釉细胞瘤(AB)中的表达及意义。方法利用实时茎环定量PCR方法检测mi R-608在26例人成釉细胞瘤(AB组)及17例瘤旁组织(对照组)中的表达水平,比较mi R-608在AB组与对照组,原发AB组与复发AB组,以及AB不同临床病理特征的组间差异。结果 AB中mi R-608表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);复发组mi R-608的相对表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。mi R-608表达水平在不同年龄、性别和病理分型患者中均无统计学差异(P>0.05)。结论人AB组织中mi R-608表达水平显著下降,可能与该肿瘤的发生和复发相关。 展开更多
关键词 成釉细胞瘤 微小核糖核酸 608 实时茎环定量 PCR 肿瘤复发
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TSG101在病毒出芽过程中的作用及其机制 被引量:1
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作者 许岩 张莹 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2015年第6期90-95,共6页
TSG101基因是新发现的抑癌基因候选者,定位于人类11号染色体p1511-p1512,其编码产物TSG101蛋白N端区域与泛素结合酶(UBC)同源。近年来研究发现,TSG101基因具有多种重要的功能,与多种病毒出芽密切相关,所以TSG101可作为一个新的抗病毒靶... TSG101基因是新发现的抑癌基因候选者,定位于人类11号染色体p1511-p1512,其编码产物TSG101蛋白N端区域与泛素结合酶(UBC)同源。近年来研究发现,TSG101基因具有多种重要的功能,与多种病毒出芽密切相关,所以TSG101可作为一个新的抗病毒靶点。本文主要从TSG101在多种病毒(HIV、IAV、MARV、ASV等)出芽过程中扮演的角色,TSG101与多种蛋白(泛素、Nedd4、ARMMs、Tom1、Gag、VP40、NP等)的相互作用进而辅助病毒出芽的机制,以及TSG101抑制剂的研究等方面进行阐述。 展开更多
关键词 TSG101 UBC 病毒出芽 抗病毒靶点
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LC3在成釉细胞瘤中的表达及意义
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作者 黄碧莹 刘洁 +5 位作者 钟鸣 王珺婷 王小玢 康媛媛 孙妍 乔雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期101-104,共4页
目的探讨自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3 (LC3)在成釉细胞瘤组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测104例成釉细胞瘤组织及20例正常口腔黏膜组织中LC3的表达,通过半定量方法分析其表达与临床病理资料的关系。结果 LC3... 目的探讨自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3 (LC3)在成釉细胞瘤组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测104例成釉细胞瘤组织及20例正常口腔黏膜组织中LC3的表达,通过半定量方法分析其表达与临床病理资料的关系。结果 LC3在成釉细胞瘤上皮细胞中的阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织,差异有统计学意义(P <0.05);LC3的表达在性别、年龄、是否复发方面的差异无统计学意义(P> 0.05);发生于下颌骨的成釉细胞瘤中LC3的阳性表达率高于发生于上颌骨及牙龈的成釉细胞瘤,差异有统计学意义(P <0.05);实性/多囊型中LC3的阳性表达率显著高于其他3种病理分型,差异有统计学意义(P <0.05)。结论成釉细胞瘤中自噬活性显著高于正常口腔黏膜组织,自噬过程在成釉细胞瘤的发生发展中发挥一定作用,可能对成釉细胞瘤的局部侵袭性有一定影响。 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3 成釉细胞瘤 自噬 免疫组织化学
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神经肽P物质通过Ca^(2+)和CREB诱导自然杀伤细胞的活化作用 被引量:3
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作者 赵蔓嘉 范世光 +2 位作者 赵爱农 梁再赋 傅炜昕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期502-507,共6页
目的 体外研究神经肽P物质(SP)对自然杀伤(NK)细胞的活化作用,并探讨SP受体NK-1R在SP调控NK细胞活性中的作用及可能的信号分子机制。方法 采用MTT释放法检测SP对NK92-MI细胞增殖和杀伤活性的影响,荧光定量PCR和流式细胞术检测NK-1R的mRN... 目的 体外研究神经肽P物质(SP)对自然杀伤(NK)细胞的活化作用,并探讨SP受体NK-1R在SP调控NK细胞活性中的作用及可能的信号分子机制。方法 采用MTT释放法检测SP对NK92-MI细胞增殖和杀伤活性的影响,荧光定量PCR和流式细胞术检测NK-1R的mRNA表达水平和膜表达,Fura-2/AM荧光探针法测定NK92-MI细胞胞质钙浓度,Western blotting测定环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平。结果 10^(-12) mol/L SP可促进NK92-MI细胞的增殖和杀伤活性,NK-1R拮抗剂可完全或大部分阻断SP的促进作用。10^(-12) mol/L SP作用下,NK92-MI细胞的NK-1R表达上调,胞质钙浓度升高,提示SP通过增加NK-1R的表达及激活Ca^(2+)信号通路发挥对NK92-MI细胞活性的调节作用。10^(-12) mol/L SP使NK92-MI细胞CREB磷酸化水平明显增高,表明SP可诱导CREB在Ser133位点磷酸化而激活。结论 c AMP信号通路参与了NK-1R介导的SP对NK92-MI细胞的活化作用,且Ca^(2+)和CREB是关键信号分子。 展开更多
关键词 神经肽P物质 自然杀伤细胞 NK-1R
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生物肽SP对NK-92MI细胞迁移及趋化因子受体表达的影响
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作者 孟佳慧 刘国栋 +3 位作者 张亚南 范世光 赵蔓嘉 傅炜昕 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2020年第1期81-87,共7页
探讨生物肽P物质(substance P,SP)对NK92-MI细胞迁移力和细胞表面趋化因子受体表达的影响,能更好地解释SP调控NK细胞迁移的作用机制,为NK细胞的功能研究及潜在的免疫疗法提供补充依据。Transwell法检测SP对NK92-MI细胞迁移能力的影响及S... 探讨生物肽P物质(substance P,SP)对NK92-MI细胞迁移力和细胞表面趋化因子受体表达的影响,能更好地解释SP调控NK细胞迁移的作用机制,为NK细胞的功能研究及潜在的免疫疗法提供补充依据。Transwell法检测SP对NK92-MI细胞迁移能力的影响及SP对趋化因子CCL21和CXCL12对NK92-MI细胞趋化作用的影响;Real-time PCR检测SP对CCR7和CXCR4 mRNA表达水平的影响;流式细胞术检测SP对CCR7和CXCR4膜表达水平的影响。结果显示:①SP促进NK92-MI细胞的迁移,是在低浓度范围(10^-12~10^-10 mol/L)随SP浓度增加,促进作用逐渐增强,高浓度范围(10^-8~10^-6 mol/L)随SP浓度增加,促进作用又有所减弱,SP浓度在10^-10 mol/L时,趋化指数达峰值;SP增强趋化因子CCL21和CXCL12对NK92-MI细胞的趋化作用,这种增强作用在10^-10 mol/L浓度最显著。②SP在10^-12~10^-6 mol/L浓度范围内均能明显促进CCR7 mRNA的表达,且CCR7 mRNA表达水平随着SP浓度增加而增高;SP在10^-10~10^-6 mol/L浓度范围内能明显促进CXCR4 mRNA的表达。③CCR7的膜表达水平随着SP浓度的增加具有逐渐增高的趋势,在10^-8 mol/L和10^-6 mol/L浓度组,CCR7的表达有明显增加;而CXCR4的膜表达则随SP浓度的增加,具有先增高后回降的趋势,在10^-10 mol/L和10^-8 mol/L浓度组,CXCR4的表达有明显增加。SP能直接促进NK92-MI细胞的迁移,说明SP对NK细胞具有直接趋化作用;SP通过上调趋化因子受体CCR7和CXCR4的表达水平,协同趋化因子,间接发挥对NK-92MI细胞的趋化作用。 展开更多
关键词 生物肽SP NK92-MI细胞 迁移 趋化因子受体
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