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外源性神经生长因子对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节 被引量：3
1
作者 杨畅 张宝辉 +3 位作者 刘玉丽 李宁 王旭 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期129-132,152,共5页
目的：探讨外源性神经生长因子（NGF）对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节.方法：鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白（Aβ）老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β（GSK... 目的：探讨外源性神经生长因子（NGF）对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节.方法：鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白（Aβ）老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β（GSK3β）、p-GSK3β、β-连环蛋白（β-catenin）和p-β-catenin的表达.结果：Aβ免疫组织化学显色结果显示,与对照组小鼠大脑内的Aβ老年斑相比较,NGF治疗组转基因小鼠大脑内的Aβ老年斑数量减少了30.22％,沉积减少了35.85％,差异有统计学意义.免疫印迹结果显示,外源性NGF减少APP/PS1转基因小鼠脑内GSK3β的表达,增加β-catenin的表达.结论：外源性NGF可能通过抑制GSK3β的活性和增加β-catenin的活性,激活Wnt/β-catenin信号通路,对神经元起保护作用. 展开更多
关键词 APP/PS1转基因小鼠 神经生长因子 糖原合酶激酶3Β Β-连环蛋白 WNT/Β-CATENIN信号通路
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Toll样受体4与肿瘤坏死因子α在脑缺血再灌注小鼠顶叶皮质神经元中的表达及意义 被引量：3
2
作者 高音 于秀文 +1 位作者 朴贤玉 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期14-18,共5页
目的：探讨Toll样受体4（TLR4）在脑缺血再灌注损伤炎症反应中的作用。方法：采用TLR4抗体封闭TLR4受体，H—E染色观察小鼠顶叶皮质组织病理学改变、免疫印迹法检测顶叶皮质TLR4蛋白表达、RT-PCR检测顶叶皮质TLR4mRNA表达量、免疫组织... 目的：探讨Toll样受体4（TLR4）在脑缺血再灌注损伤炎症反应中的作用。方法：采用TLR4抗体封闭TLR4受体，H—E染色观察小鼠顶叶皮质组织病理学改变、免疫印迹法检测顶叶皮质TLR4蛋白表达、RT-PCR检测顶叶皮质TLR4mRNA表达量、免疫组织化学显色法检测顶叶皮质TNF-α表达情况，TLR4mRNA表达水平与TNF-α含量相关分析。小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和TLR4阻断组，各组又分12、24、48、72h4个时间点组。结果：缺血再灌注组TLR4蛋白、TLR4mRNA、TNF-α表达水平明显高于假手术组表达水平，而TLR4阻断组TLR4蛋白、TLR4mRNA、TNF-α表达水平明显低于缺血再灌注组，相关分析表明，TLR4mRNA表达水平与TNF-α含量呈显著正相关。结论：缺血再灌注可激活TLR4，TLR4在脑缺血再灌注损伤中起重要作用；炎性因子TNF-α的产生、分泌可能与TLR4mRNA表达存在着密切联系。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 TOLL样受体4 肿瘤坏死因子Α 顶叶皮质
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神经生长因子及降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑环磷酸腺苷反应元件结合蛋白mRNA表达的影响 被引量：1
3
作者 张正洪 杨龙珍 +3 位作者 席刚明 庄凤娟 张迎春 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期384-386,共3页
目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)及降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响。方法:用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测... 目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)及降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响。方法:用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA的表达。结果:缺血再灌注组右侧海马CA1区和顶叶皮质神经元CREB mRNA表达比假手术组减少,NGF组及CGRP组的CREB mRNA表达均高于缺血再灌注组,NGF与CGRP联合应用时CREB mRNA的表达分别高于NGF组和CGRP组。结论:NGF及CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质CREB mRNA的表达,NGF与CGRP联合应用则作用更强,NGF和CGRP对缺血神经元的保护作用可能是通过激活CREB基因转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现。 展开更多
关键词 脑缺血 神经生长因子 降钙素基因相关肽 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白
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地塞米松对哮喘豚鼠肺及内脏感觉传入系统神经生长因子表达的抑制作用
4
作者 曹德寿 刘晓湘 +2 位作者 巩永凤 刘丽 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期329-331,共3页
目的:探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:利用免疫组织化学和Western印迹方法,观察生理盐水组、单纯致敏组、哮喘组和地塞米松组豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C... 目的:探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:利用免疫组织化学和Western印迹方法,观察生理盐水组、单纯致敏组、哮喘组和地塞米松组豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)NGF表达的变化。结果:哮喘组豚鼠NGF在肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)表达明显高于对照组,而地塞米松组则明显低于哮喘组。结论:NGF可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠NGF的表达可能是其治疗哮喘的机制之一。 展开更多
关键词 地塞米松 内脏感觉传入 系统 抑制作用 鼠肺 神经生长因子(NGF) Westem印迹 脊髓后角 脊神经节 免疫组织化学 生理盐水组 发病过程 哮喘豚鼠 对照组
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神经生长因子及降钙素基因相关肽减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质tau蛋白磷酸化
5
作者 张正洪 唐杰 +2 位作者 郭青平 席刚明 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期553-556,共4页
目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质神经元tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、免疫印迹法和图像分析方法检测大鼠顶叶皮质ta... 目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质神经元tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、免疫印迹法和图像分析方法检测大鼠顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化程度和总tau蛋白表达,以及NGF与CGRP对tau蛋白过度磷酸化的影响。结果:缺血再灌注组同侧顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平和总tau蛋白明显升高;NGF组及CGRP组大鼠顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平明显低于缺血再灌注组,总tau蛋白也下降;NGF与CGRP合用组顶叶皮质tau蛋白磷酸化水平进一步降低,分别低于NGF组和CGRP组。结论:NGF及CGRP明显减轻脑缺血再灌注大鼠脑tau蛋白磷酸化程度,两者合用作用更强。 展开更多
关键词 神经生长因子 降钙素基因相关肽 脑缺血 TAU蛋白 磷酸化
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磷酸化丝／苏氨酸蛋白激酶B在小鼠过敏性气道反应肺组织炎性细胞中的差异表达 被引量：2
6
作者 刘玉丽 杨畅 +5 位作者 卞镝 田辉 隋月皎 王列 王旭 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期309-311,共3页
目的：探讨丝／苏氨酸蛋白激酶B（Akt）在过敏性小鼠肺组织不同炎性细胞中的活化状况。方法：应用卵蛋白致敏激发BALB／c小鼠制备过敏性气道炎症反应模型，抽取肺泡灌洗液（BALF）进行细胞总数计数和不同炎性细胞分类计数，应用免疫组... 目的：探讨丝／苏氨酸蛋白激酶B（Akt）在过敏性小鼠肺组织不同炎性细胞中的活化状况。方法：应用卵蛋白致敏激发BALB／c小鼠制备过敏性气道炎症反应模型，抽取肺泡灌洗液（BALF）进行细胞总数计数和不同炎性细胞分类计数，应用免疫组织化学检测磷酸化Akt（p-Akt）在过敏性小鼠肺组织中不同炎性细胞的表达。结果：过敏性小鼠BALF中总细胞数明显高于正常鼠；分类细胞计数中，正常组以巨噬细胞为主，而过敏性小鼠的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分比明显升高；免疫组织化学显示p-Akt在过敏性小鼠气道中嗜酸性粒细胞中表达明显高于淋巴细胞和巨噬细胞，而在淋巴细胞中表达明显高于巨噬细胞。结论：Akt在过敏性小鼠的气道炎症中的作用与炎性细胞的种类密切相关，发挥不同的诱导嗜酸性粒细胞和巨噬细胞增多、趋化、释放炎性细胞因子和对抗淋巴细胞凋亡等重要的作用。 展开更多
关键词 过敏性小鼠 肺组织 炎性细胞 磷酸化丝 苏氨酸蛋白激酶B
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NGF对局灶性脑缺血再灌注后大鼠皮质IL-1β表达的调控作用 被引量：2
7
作者 曲鹏 张正洪 +2 位作者 曲晶 孙长斌 方秀斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期751-754,共4页
目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法:线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质IL-1... 目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响。方法:线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质IL-1β蛋白表达变化。结果:假手术组大鼠顶叶皮质IL-1β没有表达,缺血再灌注组顶叶皮质IL-1β蛋白在各时间点明显表达,IL-1β蛋白阳性产物的光密度值高于假手术组;NGF组IL-1β蛋白阳性产物的光密度值低于缺血再灌注组。结论:脑缺血再灌注损伤后诱导IL-1β蛋白表达,NGF明显降低缺血再灌注大鼠顶叶皮质IL-1β蛋白表达,这可能是NGF发挥神经保护作用的分子机制之一。 展开更多
关键词 神经生长因子 局灶性脑缺血再灌注 顶叶皮质 白细胞介素-1β
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pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体的构建及体外表达
8
作者 马腾 唐莹 +1 位作者 刘学政 薛一雪 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第41期22-24,共3页
目的构建毕氏酵母表达载体pPIC9K/Ang-1,并进行体外表达研究。方法从PGEM-T/Ang-1载体中切取目的片段Ang-1,利用定向克隆到毕氏酵母表达载体pPIC9K中,测序正确后,pPIC9K/Ang-1载体经SalⅠ酶切线形化,以电转化法导入GS115毕氏酵母菌株中,... 目的构建毕氏酵母表达载体pPIC9K/Ang-1,并进行体外表达研究。方法从PGEM-T/Ang-1载体中切取目的片段Ang-1,利用定向克隆到毕氏酵母表达载体pPIC9K中,测序正确后,pPIC9K/Ang-1载体经SalⅠ酶切线形化,以电转化法导入GS115毕氏酵母菌株中,经YPD平板G418抗性筛选后获得Ang-1表达阳性菌株;用SDS-PAGE测定其分子量,用Western Blotting检测发酵上清中Ang-1的抗原性和表达量。结果成功切取1.5 kb的Ang-1片段,成功构建pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体,Blast序列分析与GenBank中AY121504一致。酶切线性化的质粒成功转入GS115毕氏酵母中,诱导表达后SDS-PAGE显示重组人Ang-1分子量约66 kD,Western Blotting证实为人Ang-1。结论成功构建pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体,成功获得稳定分泌Ang-1重组蛋白的基因工程菌株。 展开更多
关键词 血管生成因子 克隆 毕氏酵母 基因治疗
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