PBL教学模式在病原生物学、免疫学及感染病学课程整合改革中的探索与实践 被引量：36

1

作者 王美莲 王斯 +4 位作者 曹雅明 齐赞梅 庞维 曹妍 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期106-109,共4页

探讨问题导向教学(PBL)方法在病原生物学、免疫学及感染病学课程整合改革中的教学效果及意义。以中国医科大学2009级七年制临床系学生240人为研究对象,随机分为实验组和对照组各120人。实验组采用PBL教学方法,教学内容采用病原生物学、... 探讨问题导向教学(PBL)方法在病原生物学、免疫学及感染病学课程整合改革中的教学效果及意义。以中国医科大学2009级七年制临床系学生240人为研究对象,随机分为实验组和对照组各120人。实验组采用PBL教学方法,教学内容采用病原生物学、免疫学及感染病学整合,对照组采用传统教学方法,教学内容为传统病原生物学课程,2组由相同教师授课,采用期末考试和教学效果自评调查问卷的方式评价教学效果。实验组与对照组相比,期末考试成绩无统计学差异(P>0.05),但病例分析题成绩有统计学差异(P<0.01)。2种学生的自评调查问卷中,实验组的自学能力、团队协作能力及发现问题解决问题的能力均显著高于对照组(P均<0.01)。PBL教学模式能有效提高教学质量,具有一定的示范及推广价值。 展开更多

关键词 问题导向教学 病原生物学 教学改革

在线阅读 下载PDF 职称材料

关于提高病原生物学教学质量的几点思考 被引量：1

2

作者 刘英杰 王继春 +1 位作者 王舰 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期111-112,共2页

关键词 病原生物学 教学质量 基础学科 医学微生物学 教学内容 高等教育 寄生虫学 教学方式 生命科学 临床医学

在线阅读 下载PDF 职称材料

CircRALB对宫颈癌细胞株Hela细胞生物学行为影响的研究

3

作者 都田赵 王雪莲 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期52-57,共6页

探讨circRALB对宫颈癌细胞株Hela细胞生物学行为的影响。化学合成circRALB干扰序列si_RALB以及无关序列si_nc,瞬时转染Hela细胞。荧光定量PCR法检测干扰序列si_RALB对Hela细胞中circRALB表达的影响;细胞计数、MTS法、流式细胞术、细胞... 探讨circRALB对宫颈癌细胞株Hela细胞生物学行为的影响。化学合成circRALB干扰序列si_RALB以及无关序列si_nc,瞬时转染Hela细胞。荧光定量PCR法检测干扰序列si_RALB对Hela细胞中circRALB表达的影响;细胞计数、MTS法、流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验检测circRALB对Hela细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果显示,瞬时转染效率为(89.67±3.1)%。干扰序列si_RALB转染Hela细胞,circRALB表达量为si_nc组的(47.3±1.5)%,差异有统计学意义;si_RALB转染组细胞增殖活性明显低于si_nc对照组,差异有统计学意义;si_RALB转染组细胞凋亡率为(9.17±1.17)%,si_nc对照组细胞凋亡率为(7.2±0.32)%,空白对照组细胞凋亡率(5.63±0.31)%,尽管si_RALB细胞凋亡率大于si_nc对照组细胞凋亡率,但差异无统计学意义;si_RALB转染组与si_nc转染组相比,划痕间距缩小不明显;si_RALB转染组Hela细胞穿膜数为(21.33±2.19)个,显著低于si_nc组(45.33±1.76)个和空白对照组(52±1.53)个。化学合成的circRALB干扰序列转染Hela细胞后,能显著降低细胞中circRALB的表达量。CircRALB表达下调可显著抑制宫颈癌细胞系Hela细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但对其凋亡无明显影响。结果提示CircRALB的表达与宫颈癌细胞的生物学行为有关,可能成为有效的宫颈癌治疗靶标。 展开更多

关键词 circRALB 宫颈癌 HELA 生物学行为

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺孢子菌肺炎的病原学诊断及其临床特征分析 被引量：7

4

作者 王雪莲 李华军 安春丽 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第7期633-634,共2页

关键词 临床特征分析 病原学诊断 肺炎 PNEUMONIA 致病性病原体 基因表达产物 机能低下 世界性分布 分析结果 基因序列 80年代 肺孢子虫 AIDS 恶性肿瘤 移植术后 致命性 患者 免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

吉林地区HFRS病原体基因型分析 被引量：4

5

作者 赵臣 赵阳 +4 位作者 李艳 袁忠海 孙可歆 张磊 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期101-104,共4页

为调查吉林地区褐家鼠中汉坦病毒病原体基因型及其分布情况,采用免疫荧光法检测吉林市区及吉林市所属各县市收集的鼠肺标本,对汉坦病毒抗原阳性标本以巢式RT-PCR法扩增S基因片段上的核苷酸序列并测序,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒... 为调查吉林地区褐家鼠中汉坦病毒病原体基因型及其分布情况,采用免疫荧光法检测吉林市区及吉林市所属各县市收集的鼠肺标本,对汉坦病毒抗原阳性标本以巢式RT-PCR法扩增S基因片段上的核苷酸序列并测序,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒序列进行同源性分析及系统进化树分析。序列分析发现吉林地区褐家鼠携带的汉坦病毒均为汉城病毒,S3亚型;未发现普马拉病毒存在。结果表明吉林市褐家鼠主要携带S3亚型的汉城型汉坦病毒。 展开更多

关键词 肾综合征出血热(HFRS) 基因型 汉坦病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

我国卡氏肺孢子虫肺炎100例综合分析 被引量：43

6

作者 苏晓平 安春丽 +1 位作者 郭福生 王敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期91-93,共3页

关键词 中国 PCP 临床表现 治疗 预后 病例分析 卡氏肺孢子虫肺炎

在线阅读 下载PDF 职称材料

内眼手术患者术前结膜囊细菌分布及药物敏感性分析 被引量：11

7

作者 任春阳 何静娜 +6 位作者 王琳 柳姗姗 孙晶 曹咏 王海林 李若溪 张绍丹 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期704-709,共6页

目的探讨内眼手术患者术前结膜囊细菌分布情况以及药物敏感性,为临床预防性用药和术后眼内炎的治疗提供依据。方法采用前瞻性病例对照研究设计,连续收集2015年2—8月于沈阳市第四人民眼科住院拟行内眼手术的非感染性眼病患者,在术前预... 目的探讨内眼手术患者术前结膜囊细菌分布情况以及药物敏感性,为临床预防性用药和术后眼内炎的治疗提供依据。方法采用前瞻性病例对照研究设计,连续收集2015年2—8月于沈阳市第四人民眼科住院拟行内眼手术的非感染性眼病患者,在术前预防性使用抗生素等处理前进行结膜囊标本采集并进行需氧菌和厌氧菌培养,观察结膜囊细菌培养阳性率和菌种分布情况。采用全自动微生物药物敏感试验分析系统对培养阳性的需氧菌进行眼科常用抗菌药物的敏感性试验。结果本研究共纳入患者192例192眼,其中男88例,占45.83%;平均年龄(58±15)岁。结膜囊标本需氧菌培养阳性81例,阳性率为42.19%。共分离需氧菌91株,主要为革兰阳性菌占91.21%;其中表皮葡萄球菌,占64.84%,其次为缓慢葡萄球菌和金黄色葡萄球菌,分别占7.69%和3.30%。革兰阴性菌包括克氏枸橼酸杆菌、摩根菌、变形杆菌和阴沟肠杆菌。凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)占所有阳性需氧菌的80.22%。厌氧菌培养阳性标本28例,占14.58%,主要为疮疱丙酸杆菌和大芬戈尔德菌,分别占71.43%和10.71%。药物敏感性试验结果显示,大多数CNS对庆大霉素和万古霉素敏感,耐药率小于10%,而普遍对红霉素和头孢他啶耐药,耐药率分别占69.86%和63.01%。对于眼科常用的左氧氟沙星、环丙沙星和莫西沙星,细菌耐药性分别是42.47%、39.73%和17.81%。对3种及以上抗生素同时耐药的CNS占38.36%。结论内眼手术患者结膜囊存在较高比例的需氧菌及厌氧菌生长。CNS是常见的分离菌种,且相当一部分对眼科常用的抗生素耐药。根据地区常见菌种和药物敏感试验结果调整预防性措施或治疗性用药对于提高手术安全性和治疗有效性具有重要意义。 展开更多

关键词 内眼手术 结膜囊 细菌 耐药性

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫活性地龙肽的制备及其对小鼠巨噬细胞活性的影响 被引量：16

8

作者 傅炜昕 李建华 +5 位作者 董占双 梁再赋 秦博 李铁英 贾秀坤 范世光 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期36-40,共5页

分离纯化免疫活性地龙肽并研究其对小鼠巨噬细胞活性的影响。通过抽提、离心、超滤及色谱等步骤提取小分子量免疫活性地龙肽;通过体外实验测定其对巨噬细胞吞噬活性的影响。结果表明,一定浓度的3种免疫活性地龙肽在体外均可明显增强小... 分离纯化免疫活性地龙肽并研究其对小鼠巨噬细胞活性的影响。通过抽提、离心、超滤及色谱等步骤提取小分子量免疫活性地龙肽;通过体外实验测定其对巨噬细胞吞噬活性的影响。结果表明,一定浓度的3种免疫活性地龙肽在体外均可明显增强小鼠巨噬细胞的吞噬活性,提示其具有免疫调节功能。 展开更多

关键词 免疫活性地龙肽 巨噬细胞 免疫调节

在线阅读 下载PDF 职称材料

双歧杆菌、大肠杆菌菌体外多糖对iIEL激活作用的对比研究 被引量：4

9

作者 周正任 王舰 +1 位作者 杨晓临 王丹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期296-298,301,共4页

目的 :对比研究双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖对iIEL的激活作用。方法 :采用Percoll非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞 (iIEL) ;应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与iIEL细胞共同孵育作用后 ,检测iIEL细... 目的 :对比研究双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖对iIEL的激活作用。方法 :采用Percoll非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞 (iIEL) ;应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与iIEL细胞共同孵育作用后 ,检测iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL 2产生能力。结果 :大肠杆菌、双歧杆菌菌体外多糖均能显著增强iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL 2的产生能力 (P <0 0 1) ,双歧杆菌组的作用显著高于大肠杆菌组 (P <0 0 1)。结论 :双歧杆菌和大肠杆菌菌体外多糖均对iIEL细胞具有免疫激活作用 ,但双歧杆菌菌体多糖的作用强。 展开更多

关键词 双歧杆菌菌体外多糖 小肠上皮间淋巴细胞 IFNΓ IL-2 iIEL 免疫激活作用 双歧杆菌 大肠杆菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

单核细胞增生性李斯特氏菌种、株随机扩增DNA多态性研究 被引量：5

10

作者 金莉莉 王秋雨 王海鹏 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期38-41,共4页

目的　分析单核细胞增生性李斯特氏菌种、株基因组DNA多态性 ,为其分型、鉴定提供理论依据。方法　应用随机扩增多态性DNA技术对李斯特氏菌基因组DNA进行扩增 ,根据DNA指纹图谱分析单核细胞增生性李斯特氏菌种、株的遗传多样性 ,同时构... 目的　分析单核细胞增生性李斯特氏菌种、株基因组DNA多态性 ,为其分型、鉴定提供理论依据。方法　应用随机扩增多态性DNA技术对李斯特氏菌基因组DNA进行扩增 ,根据DNA指纹图谱分析单核细胞增生性李斯特氏菌种、株的遗传多样性 ,同时构建相似性系数矩阵和树状图。结果　不同序列的随机引物扩增的RAPD图谱的多态性程度不同 ,其中单一引物P-7与复合引物P-1P-3 、P-4P-9扩增产生的指纹图谱对单核细胞增生性李斯特氏菌种、株均具有良好的区分能力。由该 3种引物扩增的RAPD图谱计算出的相似性系数矩阵及由此构建的聚类树状图均能得到李斯特氏菌的系统发育关系。结论　RAPD技术可用于李斯特氏菌的快速鉴定。 展开更多

关键词 单核细胞增生性李斯特氏菌 菌种 菌株 基因扩增 基因多态性 DNA指纹图谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

从患者脑脊液中检出广州管圆线虫发育期雄性和雌性成虫 被引量：17

11

作者 安春丽 郑兰艳 王雪莲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期63-64,共2页

本文报道和描述了送检脑膜脑炎病人脑脊液中的虫体。也是我国大陆首次于脑脊液中同时检出广州管圆线虫未发育成熟雄虫和雌虫。

关键词 广州管圆线虫 脑膜脑炎 脑脊液

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺癌患者耶氏肺孢子菌的隐性感染研究 被引量：6

12

作者 王雪莲 孙晓红 +1 位作者 逯晓波 安春丽 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期393-396,共4页

目的检查肺癌患者的耶氏肺孢子菌(Pneumocystisjiroveci,P.jiroveci)的隐性感染情况,为癌症患者的化疗、肺孢子菌肺炎的预防提供参考依据。方法收集了50份未接受化疗的肺癌患者的肺癌旁肺组织标本及其相关信息,采用Giemsa、GMS病原学染... 目的检查肺癌患者的耶氏肺孢子菌(Pneumocystisjiroveci,P.jiroveci)的隐性感染情况,为癌症患者的化疗、肺孢子菌肺炎的预防提供参考依据。方法收集了50份未接受化疗的肺癌患者的肺癌旁肺组织标本及其相关信息,采用Giemsa、GMS病原学染色法和PCR扩增技术检测该组患者P.jiroverci的自然隐性感染率。并对感染者的年龄及性别进行了相关性分析。结果Giemsa、GMS、PCR三种方法检测到P.jiroveci的隐性感染率分别为Giemsa法2%;GMS法10%;PCR法为16%。X2检验结果显示三种不同检测方法的检测结果具有显著性差异(P<0.05)。对患者的年龄及性别的相关性分析结果表明,该组患者的P.jiroveci隐性感染情况无性别及年龄相关性。结论肺癌患者携带P.jroveci病原体,感染率为16%,提示这类患者存在发生肺孢子菌肺炎和成为传染源的潜在危险。对比本实验采用的三种检测方法,以PCR技术较为敏感。 展开更多

关键词 肺癌 耶氏肺孢子菌(P.jiroveci) 隐性感染

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺炎支原体P1黏附蛋白基因的克隆与表达 被引量：7

13

作者 赵芝娜 王桂珍 +1 位作者 董占双 李保强 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期470-472,478,共4页

目的对肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,Mp)3’端的P1黏附蛋白基因片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和表达产物的免疫性分析,为临床诊断试剂和疫苗的研制打下基础。方法应用PCR技术直接从MpFH株染色体DNA中扩增894bp的3’端p1基... 目的对肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,Mp)3’端的P1黏附蛋白基因片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和表达产物的免疫性分析,为临床诊断试剂和疫苗的研制打下基础。方法应用PCR技术直接从MpFH株染色体DNA中扩增894bp的3’端p1基因片段(p1’),将此基因片段插入表达载体pGEX-6P-1后,转入大肠杆菌BL21扩增后提取重组质粒进行酶切、PCR扩增及核苷酸测序进行鉴定。诱导阳性克隆株表达重组蛋白后纯化,用兔抗Mp多克隆血清通过免疫印迹实验鉴定其免疫反应性。结果插入重组质粒的p1基因片段经测序后,与GenBank中p1基因核苷酸序列(AF290001、AF290002、AF286371、AE000002、M21519、M18639)比较,其同源性为99.66%～100%。氨基酸序列同源性为99.32%～100%。经SDS-PAGE分析,重组蛋白的相对分子量约为59kDa。免疫印迹实验证实重组蛋白是P1黏附蛋白抗原。结论成功构建了pGEX-6P-1-p1’重组质粒并获得表达。此p1’基因重组质粒表达的蛋白具有免疫反应性,有希望成为特异性抗原诊断试剂和疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 肺炎支原体 P1黏附蛋白 克隆表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热早期诊断方法的比较 被引量：4

14

作者 史俊岩 郑兰艳 +1 位作者 牟玲 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期101-103,共3页

应用免疫-PCR方法和ELISA法对比检测96份肾综合征出血热(HFRS)患者血清标本中特异性IgM抗体,结果免疫-PCR方法的阳性检出率高于ELISA法,表明免疫-PCR方法是一种可用于HFRS早期诊断的高敏感性的血清学检测方法。

关键词 免疫-PCR ELISA 肾综合征出血热 早期诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

检测肠道病毒71型RT-LAMP技术的建立及其应用 被引量：3

15

作者 耿英芝 姚文清 +4 位作者 郭军巧 于伟 毛玲玲 陈静乙 安春丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期176-179,共4页

目的为肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染的快速诊断建立一种简捷、敏感、特异的基因检测方法,即逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)。方法针对EV71VP1基因的8个区域设计6条特异性引物,建立检测该靶序列的RT-LAMP方法,对其特... 目的为肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染的快速诊断建立一种简捷、敏感、特异的基因检测方法,即逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)。方法针对EV71VP1基因的8个区域设计6条特异性引物,建立检测该靶序列的RT-LAMP方法,对其特异性及敏感性进行了验证;并对手足口病患者标本进行检测,并与RT-PCR及Real-time PCR方法进行了比较。结果利用RT-LAMP方法能成功检测到EV71VP1基因区,等温条件下60min内即可完成检测,该方法简便快捷、敏感性高、特异性好;其阳性率高于RT-PCR方法(P<0.05),与Real-time PCR结果呈现很好的一致性(P>0.05)。结论 RT-LAMP方法具有灵敏度高,特异性强,操作过程简捷快速,无需特复杂仪器等优点。适用于EV71感染的快速检测及分子流行病学的监测,具有很好的开发应用前景。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 手足口病 逆转录环介导等温核酸扩增技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

三种疟原虫检测方法的比较研究 被引量：4

16

作者 罗恩杰 刘英杰 +1 位作者 王继春 牟玲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期62-64,共3页

应用聚合酶链反应 (PCR)及微滴度板杂交试验 (MPH)对来自高疟疾流行区、收集于滤纸片的 112例干血滴样品进行检测 ,并对同一人群作镜检进行比较。结果表明显微镜检查恶性疟原虫检出率 2 7.6 9% (31/ 112 ) ,而PCR及MPH方法检出率分别为 ... 应用聚合酶链反应 (PCR)及微滴度板杂交试验 (MPH)对来自高疟疾流行区、收集于滤纸片的 112例干血滴样品进行检测 ,并对同一人群作镜检进行比较。结果表明显微镜检查恶性疟原虫检出率 2 7.6 9% (31/ 112 ) ,而PCR及MPH方法检出率分别为 37.5 % (4 2 / 112 )、5 0 % (5 6 / 112 )。实验结果提示镜检虽然简便、易行、成本低 ,但由于一般观察极限的限制 ,影响了检出率。PCR方法敏感、特异 ,疟原虫检出率较高 ,但有假阳性及假阴性 ,且无法作种属鉴定。三种方法中MPH方法恶性疟原虫检出率最高 ,不仅可进行种属鉴定 ,也可进行混合感染的检测。此法疟原虫检出率 71.43% (80 / 112 ) ,其中混合感染者为 39.2 9% (4 4/ 112 )。但该法的结果难以被其它方法证实。表明该法特异性尚待证实 ,加上MPH成本高 。 展开更多

关键词 疟原虫 显微镜检 聚合酶链反应 微滴度板杂交试验 疟疾

在线阅读 下载PDF 职称材料

伯氏疟原虫再感染过程中树突状细胞表面分子表达水平的实验观察 被引量：2

17

作者 刘英杰 潘艳艳 +3 位作者 李莹 冯永辉 刘军 曹雅明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期403-406,共4页

目的探讨疟疾感染早期根治性治疗对再感染过程中树突状细胞（dendritic cells,DCs）成熟和功能的影响。方法用伯氏疟原虫（Plasmodium bergheiANKA,PbA）感染DBA/2小鼠,感染后3d进行根治性治疗,并于初次感染后90d进行再感染。通过吉姆... 目的探讨疟疾感染早期根治性治疗对再感染过程中树突状细胞（dendritic cells,DCs）成熟和功能的影响。方法用伯氏疟原虫（Plasmodium bergheiANKA,PbA）感染DBA/2小鼠,感染后3d进行根治性治疗,并于初次感染后90d进行再感染。通过吉姆萨薄血膜染色法计数红细胞感染率,流式细胞术检测再感染前（0d）和再感染后（1d、3d、5d）不同时间点脾细胞中表达CD80、CD86、CD40和MHC-II分子的DCs以及活化性T细胞的百分含量。结果同种疟原虫再感染后,根治性治疗小鼠仅出现短暂的低水平虫体血症;表达CD80、CD86、CD40和MHC-II分子的DCs百分率均于再感染后第3d出现了有意义的升高;再感染后第1-5d活化性T细胞百分率持续升高。结论初次感染早期根治性治疗后,同种疟原虫再攻击可诱导DCs的成熟和功能的发挥。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 再感染 树突状细胞 树突状细胞表面分子

在线阅读 下载PDF 职称材料

成纤维生长因子-2与肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的作用比较 被引量：4

18

作者 王佐周 胡晶 +1 位作者 牟玲 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期63-67,共5页

比较成纤维生长因子-2(FGF-2)与肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞分化的能力,并进一步的研究BM-MSCs诱导成肝细胞所需的最佳诱导因子以及其用量。体外获取、培养大鼠BM-MSCs,将第3代BM-MSCs采用不同剂量的... 比较成纤维生长因子-2(FGF-2)与肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞分化的能力,并进一步的研究BM-MSCs诱导成肝细胞所需的最佳诱导因子以及其用量。体外获取、培养大鼠BM-MSCs,将第3代BM-MSCs采用不同剂量的FGF-2和HGF诱导。诱导后,在显微镜下观察细胞形态学的改变;Shiff染色法检测糖原的分泌;ELISA法检测AFP的分泌;免疫细胞化学法检测白蛋白和CK19的分泌。诱导后BM-MSCs由梭形向多角形、卵圆形方向变化,AFP第3天就有分泌,第12天达到高峰,以后逐渐减少;白蛋白、CK19和糖原第12天即有阳性表达,以后随着诱导时间的延长阳性率逐渐升高。第2组和第4组比其他组分泌的白蛋白、CK19和糖原均多。FGF-2比HGF具有更强的诱导BM-MSCs向肝细胞分化的能力。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 成纤维生长因子-2 肝细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫-PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体方法的建立 被引量：3

19

作者 史俊岩 牟玲 +6 位作者 罗恩杰 刘祥宁 王楠 张晓棠 吴云萍 赵新艳 林松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期397-400,共4页

目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗... 目的　建立高灵敏性和高特异性的免疫 -PCR方法检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中抗核衣壳蛋白抗体。方法　用汉坦病毒 ( 76 - 118株 )重组核衣壳蛋白为抗原包被聚苯乙烯微滴度板 ,与经ELISA法和临床均已确诊为HFRS患者的血清进行抗原抗体特异性反应 ,以链霉亲和素为桥梁将生物素标记的抗体与生物素标记的DNA指示分子相连 ,PCR扩增DNA指示分子 ,通过检测指示分子DNA来反映肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的水平 ,并与传统的ELISA法进行比较。结果　免疫 -PCR检测肾综合征出血热患者血清中抗核衣壳蛋白抗体的敏感性是ELISA法的 2 5 0 0 0倍 ;30例HFRS阳性患者血清免疫 -PCR检测均为阳性 ,2 0例甲型肝炎阳性血清和 2 0例正常人血清免疫 -PCR检测均为阴性。结论　免疫 -PCR方法敏感性高 ,特异性强 。 展开更多

关键词 免疫-PCR 肾综合征出血热 抗核衣壳蛋白抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

人免疫球蛋白重链可变区基因引物设计方法的改良 被引量：4

20

作者 姜晶 孙颖 +2 位作者 刘红艳 牟玲 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期60-63,共4页

针对抗体胚系基因数据库的数据不断更新和完善,为获得人全部免疫球蛋白(Ig)重链可变区基因,改进引物设计方法,自主设计针对可变区基因高度保守的框架区1(FR1)和框架区4(FR4)的引物,提取未经免疫的健康人外周血单个核细胞,通过RT-PCR扩... 针对抗体胚系基因数据库的数据不断更新和完善,为获得人全部免疫球蛋白(Ig)重链可变区基因,改进引物设计方法,自主设计针对可变区基因高度保守的框架区1(FR1)和框架区4(FR4)的引物,提取未经免疫的健康人外周血单个核细胞,通过RT-PCR扩增重链可变区基因。其DNA序列与GenBank数据库和IMGT/V-QUEST软件比对,序列分析符合人免疫球蛋白重链基本框架结构,为胚系基因重排产生的序列。多个克隆的测序结果对比分析显示了良好的多样性。获得的重链序列为研制基因工程抗体及构建噬菌体抗体库奠定了物质基础,也为扩增其他物种Ig可变区基因的引物提供新的设计思路。 展开更多

关键词 重链可变区 引物设计 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料