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PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖 被引量:1
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作者 于昕博 黄昌伟 +2 位作者 路天琦 袁莹 李晓东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期115-120,共6页
目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的... 目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的定位和共定位位置;采用CCK-8实验探究过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞周期的影响;采用Western blotting检测过表达PAK4、RCBTB1对cyclin D1蛋白表达水平的影响。结果PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内存在相互作用。PAK4与RCBTB1共定位于胰腺癌细胞核和核周细胞质内。过表达PAK4、RCBTB1促进胰腺癌细胞增殖,加速胰腺癌细胞的细胞周期进程,促进cyclin D1的表达。结论PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 p21激活激酶4 RCC1和BTB结构域包含蛋白1 相互作用 胰腺癌 增殖
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CRISPR/Cas9沉默PAK5抑制乳腺癌细胞增殖并促进细胞衰老 被引量:1
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作者 胡冰涛 邢瑶 +1 位作者 李洋 李丰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期495-503,共9页
p21活化激酶5(p21-activated kinase 5,PAK5)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,调节多种细胞进程,包括细胞骨架重构、细胞增殖、迁移和侵袭。研究表明,PAK5是调控乳腺癌进程的关键因子,但与衰老关系的研究尚未见报道。本研究利用CRISPR/Cas9慢... p21活化激酶5(p21-activated kinase 5,PAK5)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,调节多种细胞进程,包括细胞骨架重构、细胞增殖、迁移和侵袭。研究表明,PAK5是调控乳腺癌进程的关键因子,但与衰老关系的研究尚未见报道。本研究利用CRISPR/Cas9慢病毒感染方法,构建敲低PAK5的人乳腺癌MDA-MB-231和BT474稳转细胞系。通过CCK-8和克隆形成实验检测敲低PAK5对乳腺癌细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测敲低PAK5对细胞周期的影响;通过β-半乳糖苷酶染色观察敲低PAK5对细胞衰老的影响;Western印迹检测敲低PAK5的MDA-MB-231和BT474细胞衰老相关蛋白质p53、p21和p16的表达;使用CHX与MG132处理细胞,探究PAK5对p53蛋白质表达可能的调控机制。结果显示,敲低PAK5抑制细胞增殖(P<0.05),使细胞停滞在G0/G1期;而且,敲低PAK5通过上调细胞衰老相关蛋白质p53、p21及p16的表达(P<0.05)促进细胞衰老。进一步研究证明,PAK5可能泛素化降解p53。这些发现表明,敲低PAK5能够抑制乳腺癌细胞增殖,同时促进细胞衰老,为乳腺癌治疗提供新思路。 展开更多
关键词 乳腺癌 p21活化激酶5 细胞增殖 细胞衰老
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利用生物信息学分析LMO2在乳腺癌中的表达和功能
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作者 张明慧 李彦姝 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期390-397,共8页
目的探讨LMO2在乳腺癌中的表达及其共表达基因的生物学作用。方法通过Oncomine数据库挖掘LMO2在多种肿瘤中的表达水平,并基于基因表达谱数据动态分析(GEPIA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库检索LMO2在乳腺癌组织与正常组织中的表达差... 目的探讨LMO2在乳腺癌中的表达及其共表达基因的生物学作用。方法通过Oncomine数据库挖掘LMO2在多种肿瘤中的表达水平,并基于基因表达谱数据动态分析(GEPIA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库检索LMO2在乳腺癌组织与正常组织中的表达差异。采用KM plotter数据库评估LMO2在乳腺癌中的预后价值。利用Coexpedia数据库构建LMO2在乳腺癌中的共表达基因网络,并用FunRich软件对score>3的共表达基因注释;通过GEPIA筛选出差异有统计学意义的关键基因,进一步分析LMO2与这些关键基因的相关性,并对这些基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集。结果乳腺癌组织中,LMO2 mRNA和蛋白表达较正常乳腺组织均明显下调(P<0.05),LMO2低表达预示着乳腺癌患者更差的预后。LMO2的共表达基因主要有ADGRL4、GIMAP6、PECAM1、TGFBR2、MEF2C、CD93、S1PR1、LHFP、GMFG、A2M、LDB2、KCTD12、PTPRB和CAV1。其生物学功能主要富集于信号传导等方面。其中,表达显著上调的基因有CAV1,显著下调的基因有GIMAP6、TGFBR2、LHFP和PTPRB(P<0.05)。LMO2与GIMAP6(r=0.51)、TGFBR2(r=0.46)、LHFP(r=0.52)、PTPRB(r=0.48)和CAV1(r=0.43)等关键基因的表达呈显著正相关。结论LMO2在乳腺癌组织中呈低表达,LMO2与GIMAP6、TGFBR2、CAV1等关键基因共同参与了乳腺癌发生相关的功能与通路。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤的基因表达调控 LMO2
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脂质运载蛋白2在乳腺癌侵袭转移中的作用机制 被引量:5
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作者 叶芸 李彦姝 +1 位作者 张红艳 李丰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期111-114,120,共5页
目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响。方法采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描... 目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响。方法采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描显微镜检测内源LCN2在乳腺癌细胞中的表达及定位。构建过表达LCN2的MCF-7、T47D细胞系,采用Western blotting检测与上皮间质转化(EMT)发生相关的标志物E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)的蛋白表达情况。Transwell检测LCN2对乳腺癌细胞T47D迁移能力的影响。结果LCN2在MCF-7,T47D及ZR-75-30乳腺癌细胞系中低表达,在MDA-MB-231中中等表达,在ZR-75-1细胞系中高表达;免疫组织化学以及激光共聚焦扫描显微镜证实LCN2主要定位于细胞质;成功构建了过表达LCN2的乳腺癌细胞系MCF-7和T47D,Western blotting检测发现在过表达LCN2的T47D细胞系中E-cadherin和Claudin-1蛋白表达明显降低,而Slug以及Vimentin表达明显增高。过表达LCN2的T47D细胞系迁移能力增强。结论LCN2在不同乳腺癌细胞系中表达水平不同,主要定位于乳腺癌细胞质,LCN2能促进乳腺癌细胞的迁移,可能通过诱发EMT促进乳腺癌细胞的侵袭转移。 展开更多
关键词 脂质运载蛋白2 乳腺癌 表达 定位 上皮间质转化
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