STAT1通过调控APOL6表达促进喉癌组织中肿瘤相关巨噬细胞脂质沉积

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作者 李晓明 吴岳林 +2 位作者 徐振明 富伟能 孙媛媛 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第10期919-925,共7页

目的探讨STAT1调控APOL6表达介导喉癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAM)脂质沉积的分子机制。方法通过实时PCR、Western blotting、免疫组织化学、酶联免疫吸附试验检测STAT1和APOL6在喉癌组织中的表达水平及STAT1对APOL6表达的调控作用;染... 目的探讨STAT1调控APOL6表达介导喉癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAM)脂质沉积的分子机制。方法通过实时PCR、Western blotting、免疫组织化学、酶联免疫吸附试验检测STAT1和APOL6在喉癌组织中的表达水平及STAT1对APOL6表达的调控作用;染色质免疫共沉淀揭示STAT1调控APOL6的分子机制;应用油红O染色评估TAM中脂质沉积情况。结果STAT1与APOL6在喉癌组织中表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.01)。STAT1转录激活APOL6基因的表达;过表达STAT1显著促进喉癌细胞中APOL6表达和分泌,诱导TAM中脂质沉积。结论STAT1是APOL6基因新的转录因子;STAT1通过调控APOL6表达促进喉癌组织中TAM脂质沉积,重塑TAM的脂质代谢。 展开更多

关键词 STAT1 APOL6 喉癌 肿瘤相关巨噬细胞 脂质代谢

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细胞转录组学和代谢组学整合策略表征突变影响谷氨酰胺合成酶酶活的关键代谢通路 被引量：1

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作者 凌婷 石京 +3 位作者 冯婷泽 裴劭君 李思怿 朴海龙 《色谱》 北大核心 2025年第3期207-219,共13页

谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为... 谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为治疗干预开辟新的途径。已报道的GS酶活缺陷突变包括R324C(第324位精氨酸突变为半胱氨酸)和R341C(第341位精氨酸突变为半胱氨酸)等,本研究新发现了GS的另一个酶活缺陷突变位点K241(第241位赖氨酸)。为了探究GS酶活缺陷突变带来的影响,本研究利用双组学技术对GS的酶活缺陷突变R324C和K241R(第241位赖氨酸突变为精氨酸)在肺癌细胞中的功能进行研究,通过对转录组和代谢组数据的整合揭示了GS酶活缺陷突变对一些重要生物过程的显著影响。GS的缺陷突变阻碍了细胞周期和多种氨基酸代谢途径。除了谷氨酰胺合成受到抑制,精氨酸-脯氨酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-酪氨酸代谢以及天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸代谢在GS突变的细胞中表现出更强的活力,同时,氨酰-tRNA的生物合成途径也显著被激活。进一步的研究发现,GS酶活缺陷带来氨基酸代谢的改变源自谷氨酸的重新定向和相关代谢酶的表达变化,同时,氨酰-tRNA生物合成的激活源自谷氨酰胺在GS酶活缺陷细胞中带来的能量应激激活了特定蛋白的表达,如转录因子4(ATF4)。此外,细胞表型实验表明,GS酶活缺陷细胞的迁移能力低于野生型细胞。以上结果揭示了GS酶活缺陷突变体细胞中的代谢重编程现象,突出了癌细胞代谢的复杂性和适应性。 展开更多

关键词 谷氨酰胺合成酶突变 转录组学 代谢组学 肺癌 谷氨酰胺

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甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼联合应用对胃肠道间质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响

3

作者 李祉剑 王文思 +3 位作者 马鸿滢 贾钧凯 张天彪 赵滢 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期193-198,共6页

目的探讨甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼对胃肠道间质瘤(GIST)细胞迁移和侵袭能力的影响。方法GIST细胞原代培养鉴定后,利用原子力显微镜(AFM)观察细胞形态表征;给予药物作用后,用实时定量PCR检测PI3K/AKT信号通路相关基因表达的变化,... 目的探讨甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼对胃肠道间质瘤(GIST)细胞迁移和侵袭能力的影响。方法GIST细胞原代培养鉴定后,利用原子力显微镜(AFM)观察细胞形态表征;给予药物作用后,用实时定量PCR检测PI3K/AKT信号通路相关基因表达的变化,用AFM检测相关分子结合力的变化;用划痕实验、Transwell实验和流式细胞术测定细胞迁移、侵袭能力和凋亡的变化。结果AFM成像提示伪足平铺在GIST细胞周围,GIST细胞具有易于转移的特征;单独应用甲磺酸伊马替尼或苹果酸舒尼替尼后,PI3K/AKT信号通路相关基因表达明显降低,GIST细胞表面表皮生长因子受体(EGFR)密度下降,与表皮生长因子(EGF)的分子结合力下降,联合用药时上述变化更加明显;单独用药时,GIST细胞侵袭和迁移能力均显著下降,而联合用药对GIST迁移和侵袭的抑制更为显著。结论甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼单独用药均能显著抑制PI3K/AKT信号通路相关基因表达,降低GIST细胞表面EGFR密度,并减弱其与EGF的分子结合力,减弱GIST细胞迁移和侵袭的能力,联合用药比单独用药效果更显著。 展开更多

关键词 胃肠道间质瘤 甲磺酸伊马替尼 苹果酸舒尼替尼 联合用药 迁移 侵袭

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钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ质粒的构建和表达及其与Ca_(V)1.2通道结合的鉴定

4

作者 王红梅 王祥卉 +4 位作者 张文竹 何蕊 廖天佐 高青华 郝丽英 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第1期1-4,11,共5页

目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙... 目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,促进GST融合蛋白的表达。采用DTT联合超声破碎法,谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B(GS-4B)分离、纯化GST-CaMKⅡ长片段后,经过PreScission蛋白酶处理,切除GST标签,得到CaMKⅡ长片段蛋白。采用15%SDS-PAGE鉴定CaMKⅡ长片段蛋白的分子量和相对纯度;采用Bradford方法测定纯化后蛋白的浓度;采用pull-down结合Western blotting鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合能力。结果测序结果表明,CaMKⅡ长片段构建成功。通过DTT联合超声破碎法,得到了较高纯度和浓度的长片段CaMKⅡ蛋白,并能够与心肌Ca_(V)1.2钙通道末端CT1蛋白结合。结论本研究成功构建了CaMKⅡ长片段钙调蛋白激酶融合蛋白质粒,提取、纯化了能够与Ca_(V)1.2通道蛋白结合并具有生物活性的CaMKⅡ长片段蛋白,为深入研究CaMKⅡ蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 质粒构建 分离 纯化 pull-down

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大肠癌LoVo细胞源外泌体通过传递pEGFR促进血管生成的研究

5

作者 程雅洁 周雪彤 +1 位作者 王瑞 方瑾 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第5期1229-1240,共12页

目的探讨大肠癌LoVo细胞来源的外泌体(LoVo-Exos)对肿瘤血管生成的影响,并探讨其促血管生成的可能分子机制。方法超速离心法提取LoVo-Exos,共聚焦显微镜观察其内化进入受体HUVEC细胞,体外管状形成实验分析LoVo-Exos对血管生成的影响;采... 目的探讨大肠癌LoVo细胞来源的外泌体(LoVo-Exos)对肿瘤血管生成的影响,并探讨其促血管生成的可能分子机制。方法超速离心法提取LoVo-Exos,共聚焦显微镜观察其内化进入受体HUVEC细胞,体外管状形成实验分析LoVo-Exos对血管生成的影响;采用小鼠体内基质胶塞实验,分析LoVo-Exos对血管生成的影响。为探讨LoVo-Exos促血管生成的分子机制,蛋白质印迹(Western blot)分析LoVo-Exos携带磷酸化表皮生长因子受体(phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR)进入受体细胞。Western blot及酶联免疫吸附分析(ELISA)方法分析EGFR-ERK通路关键信号蛋白及下游血管生成核心分子表达情况,并观察敲减EGFR及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulatory protein kinase,ERK)抑制剂处理对血管生成的影响。结果共聚焦显微镜观察到LoVo-Exos内化进入HUVEC内皮细胞;体外血管生成实验显示,LoVo-Exos能够显著促进HUVEC细胞管状结构的形成。小鼠皮下基质胶塞实验显示,LoVo-Exos能够促进血管样结构的形成。进一步研究发现,LoVo-Exos递送pEGFR到HUVEC中,激活EGFR-ERK通路,促进血管生成。分析LoVo-Exos对下游血管生成核心分子表达的影响,发现LoVo-Exos能够促进HUVEC细胞白介素-8(interleukin-8,IL-8)的分泌,敲减EGFR后LoVo-Exos中pEGFR水平降低,其对IL-8分泌的促进作用降低,且该促进作用能够被MEK1/2抑制剂U0126抑制。结论LoVo-Exos能够在体内外促进血管生成,其可能机制为LoVo-Exos递送pEGFR到HUVEC中,通过EGFR-ERK途径上调IL-8分泌水平,从而促进HUVEC血管生成能力,为癌症的转移提供新机制。 展开更多

关键词 外泌体 血管生成 表皮生长因子受体 大肠癌

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细胞消融在神经生物学和神经系统疾病研究中的应用

6

作者 陈翀 王思元 +1 位作者 赫小乔 赵伟东 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第7期648-652,669,共6页

细胞消融是近年来用于研究个体发育过程中细胞谱系变化及其功能的技术。神经系统中存在多种类型的细胞群,它们在生理和病理条件下的功能仍不清楚。目前,已有研究报道了多种实现细胞消融的方法,这些方法能在神经系统中特异性消融不同类... 细胞消融是近年来用于研究个体发育过程中细胞谱系变化及其功能的技术。神经系统中存在多种类型的细胞群,它们在生理和病理条件下的功能仍不清楚。目前,已有研究报道了多种实现细胞消融的方法,这些方法能在神经系统中特异性消融不同类型的细胞群,用于研究生理条件下的细胞功能以及神经系统疾病的发病机制。本文总结了常见的细胞消融方法,并重点阐述了细胞消融在神经生物学和神经系统疾病研究中的应用。 展开更多

关键词 细胞消融 神经系统 白喉毒素 胱天蛋白酶

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核心蛋白聚糖、甲磺酸伊马替尼、苹果酸舒尼替尼对胃肠道间质瘤细胞恶性表型的影响

7

作者 唐珊 贾钧凯 +2 位作者 马鸿滢 赵滢 张天彪 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期961-966,共6页

目的探究核心蛋白聚糖(DCN)、甲磺酸伊马替尼、苹果酸舒尼替尼对胃肠道间质瘤(GIST)细胞恶性表型的影响及其分子机制。方法采用Western blotting检测过表达DCN以及甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼单独或联合用药后,GIST细胞(GIST-882)中... 目的探究核心蛋白聚糖(DCN)、甲磺酸伊马替尼、苹果酸舒尼替尼对胃肠道间质瘤(GIST)细胞恶性表型的影响及其分子机制。方法采用Western blotting检测过表达DCN以及甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼单独或联合用药后,GIST细胞(GIST-882)中DCN及其下游相关蛋白表达水平的变化。采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验验证过表达DCN以及甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼单独或联合用药后,GIST-882细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果与对照组比较,过表达DCN以及甲磺酸伊马替尼和苹果酸舒尼替尼单独或联合用药后,GIST-882细胞中DCN蛋白表达水平升高,表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化EGFR(p-EGFR)、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低。结论过表达DCN以及甲磺酸伊马替尼或苹果酸舒尼替尼单独或联合用药,可以通过下调EGFR的表达参与MAPK信号传导通路,进而调控GIST细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 胃肠道间质瘤 核心蛋白聚糖 表皮生长因子受体 甲磺酸伊马替尼 苹果酸舒尼替尼

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长链非编码RNA RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移的影响及其作用机制 被引量：1

8

作者 王雪 李琳 +2 位作者 张红 张雪 王振华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期824-828,834,共6页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌(OSCC)增殖、迁移的影响及其作用机制。方法利用实时qPCR检测lncRNA RUNX1-IT1在OSCC组织和细胞系中的表达水平。采用CCK8、流式细胞术以及Transwell实验检测OSCC细胞生物学行... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌(OSCC)增殖、迁移的影响及其作用机制。方法利用实时qPCR检测lncRNA RUNX1-IT1在OSCC组织和细胞系中的表达水平。采用CCK8、流式细胞术以及Transwell实验检测OSCC细胞生物学行为。利用Western blotting检测上皮-间质转化(EMT)过程相关的蛋白表达。结果lncRNA RUNX1-IT1在OSCC组织和细胞系中表达水平与癌旁正常组织(P<0.001)和正常角质细胞(P<0.01)比较显著增高。lncRNA RUNX1-IT1表达水平和淋巴结转移相关(P<0.05)。过表达或沉默lncRNA RUNX1-IT1后可以调节E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin蛋白水平;也显著上调或下调细胞增殖迁移相关的蛋白(PCNA、Cyclin D1、MMP2)水平。结论lncRNA RUNX1-IT1在OSCC中高表达,且可能通过EMT过程调控OSCC细胞增殖、迁移。 展开更多

关键词 长链非编码RNA RUNX1-IT1 口腔鳞状细胞癌 增殖 迁移 上皮-间质转化

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基于生物信息学分析构建转录因子E2F1调控微RNA及其靶向基因网络 被引量：2

9

作者 朱文韬 曲浩宁 何群 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期231-237,共7页

目的运用生物信息学方法分析构建E2F1对微RNA(miRNA)的转录调控进而影响下游靶基因mRNA的转录因子网络,从而探讨E2F1通过miRNA参与肿瘤发生发展的机制。方法基于TCGA数据库筛选存在E2F1上调表达的肿瘤组,检索存在E2F1差异表达的20种肿... 目的运用生物信息学方法分析构建E2F1对微RNA(miRNA)的转录调控进而影响下游靶基因mRNA的转录因子网络,从而探讨E2F1通过miRNA参与肿瘤发生发展的机制。方法基于TCGA数据库筛选存在E2F1上调表达的肿瘤组,检索存在E2F1差异表达的20种肿瘤组织中差异表达的miRNAs。分析差异表达miRNAs的靶基因,并与差异表达mRNAs取交集以构建E2F1-miRNA-mRNA调控网络,对靶基因进行富集分析(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,构建蛋白质相互作用网络,讨论E2F1调控miRNA及其靶基因,进而影响肿瘤发生发展的生物机制。结果通过生物信息学方法分析构建的TF-miRNA-mRNA调控网络,展现了miR-7,miR-9,miR-17,miR-21,miR-22,miR-24并调节micoRNA in cancer信号通路。结论E2F1转录因子在多种癌症中起促癌作用,本研究为泛基因组癌症的早诊与设计治疗药物提供了潜在的靶点。 展开更多

关键词 泛基因组 E2F1 MIRNA MRNA 调控网络

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circ-PTBP3对血肿瘤屏障通透性的影响 被引量：1

10

作者 马珺 姚一龙 +3 位作者 阮雪蕾 沈书园 邵连奇 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1057-1062,共6页

目的探讨环状RNA(circRNAs)circ-PTBP3(hsa_circ_0088072)在胶质瘤微血管内皮细胞(GECs)中的表达,以及circ-PTBP3对血肿瘤屏障(BTB)通透性的调控作用。方法构建血脑屏障与BTB模型,应用qRT-PCR检测正常脑微血管内皮细胞(ECs)与GECs中circ... 目的探讨环状RNA(circRNAs)circ-PTBP3(hsa_circ_0088072)在胶质瘤微血管内皮细胞(GECs)中的表达,以及circ-PTBP3对血肿瘤屏障(BTB)通透性的调控作用。方法构建血脑屏障与BTB模型,应用qRT-PCR检测正常脑微血管内皮细胞(ECs)与GECs中circ-PTBP3的表达水平。RNase R验证circ-PTBP3对其的抵抗作用。建立circ-PTBP3稳定沉默的GECs,用跨内皮阻抗值(TEER)检测屏障的完整性,通透性测定检测屏障的通透性,Western blotting和免疫荧光实验检测紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin与claudin-5的表达与分布。结果circ-PTBP3在GECs中高表达,沉默circ-PTBP3可显著降低BTB的TEER值,增加BTB的通透性,减少紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin与claudin-5的表达与分布。结论沉默circ-PTBP3可显著增加BTB的通透性,减少紧密连接相关蛋白的表达。circ-PTBP3可能成为开放BTB的分子靶标,有效提高胶质瘤的治疗效果。 展开更多

关键词 环状RNA 血肿瘤屏障 通透性 胶质瘤

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铜稳态失衡相关疾病及铜死亡的研究进展 被引量：1

11

作者 张萌 石萌 刘宝琴 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期1125-1130,共6页

微量元素铜在人体内发挥着重要生理功能,并参与体内许多重要的反应。在多细胞生物体内,铜的代谢包括吸收、分配、隔离和排泄。胞外铜离子的内流主要由高亲和力铜转运蛋白1介导,铜的利用途径包括Atox1-ATP7A/B-Cp途径、COX17-Sco1/2-CCO... 微量元素铜在人体内发挥着重要生理功能,并参与体内许多重要的反应。在多细胞生物体内,铜的代谢包括吸收、分配、隔离和排泄。胞外铜离子的内流主要由高亲和力铜转运蛋白1介导,铜的利用途径包括Atox1-ATP7A/B-Cp途径、COX17-Sco1/2-CCO途径和CCS-SOD1途径,再由ATP7B介导释放到胆汁中的铜离子排出体外。铜转运系统在维持机体内铜稳态,确保组织正常功能方面起着关键性的作用。铜离子不足与过多均有危害,铜的稳态失衡可能会导致各种疾病,并与肿瘤的发生发展有关。最近的研究提出了铜死亡的概念,表明铜依赖性受控细胞死亡方式是一种不同于已知细胞死亡机制的新型细胞死亡方式。本文就铜转运系统、铜稳态失衡相关疾病与铜死亡进行综述,旨在为铜相关疾病的防治提供理论依据。 展开更多

关键词 铜转运 铜稳态失衡 铜死亡

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PI3K/Akt/FOXO3a信号通路介导的保护性自噬参与肺腺癌获得性顺铂耐药表型重塑 被引量：7

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作者 周欢 徐铭 +2 位作者 李波 刘春英 王淳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第9期961-970,共10页

目的:比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法:不同浓度顺铂(cisplatin,DDP)干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8... 目的:比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法:不同浓度顺铂(cisplatin,DDP)干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8法比较两株细胞耐药指数、免疫印迹法比较自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ及p62)表达水平;应用10μmol/L顺铂(相当于亲本A549细胞半数抑制浓度,即A549 IC 50值)干预A549及A549/DDP细胞,构建细胞应激状态,CCK-8法比较两株细胞生存活力,免疫印迹法比较自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ及p62)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3)、转录因子FOXO3a及其磷酸化蛋白(p-FOXO3a)表达水平,免疫荧光法观察FOXO3a亚细胞定位,并利用自噬晚期抑制剂巴弗洛霉素A1(Baf A1)干预A549及A549/DDP细胞,进一步验证顺铂压力下细胞自噬激活情况;利用蛋白激酶抑制剂干预PI3K/Akt信号通路,免疫印迹法检测顺铂压力下A549及A549/DDP细胞Akt、p-Akt及自噬相关蛋白表达水平,以探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。结果:与亲本A549细胞相比,获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞具有更强的顺铂耐药性及较高的基础自噬水平。在10μmol/L顺铂压力下,A549/DDP细胞存活率明显高于A549细胞;A549细胞中,顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达水平,下调Bcl-2表达、促进Bax及Cleaved Caspase-3活性片段表达增加,诱导细胞凋亡;A549/DDP细胞中,相同浓度的顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调Beclin 1及LC3Ⅱ表达、下调p62表达,促进细胞保护性自噬,使耐药细胞获得生存活性。结论:顺铂诱导亲本A549细胞凋亡可能与抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达有关;A549/DDP细胞顺铂耐药表型的获得可能与顺铂抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调细胞保护性自噬相关。 展开更多

关键词 肺腺癌 获得性顺铂耐药 保护性自噬 PI3K/Akt/FOXO3a信号通路 凋亡

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新抑癌基因INPP4B在EB病毒相关胃癌中的表达及其临床意义 被引量：4

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作者 马艺文 谭继超 +5 位作者 张宇 代伟宏 张瑜 林荣锦 罗阳 徐岩 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期587-590,600,共5页

目的研究胃癌中INPP4B的表达情况以及其与EB病毒相关胃癌的关系。方法以301例胃癌手术切除标本为研究对象,利用免疫组织化学方法检测癌细胞及癌旁正常黏膜细胞中INPP4B蛋白表达的情况。利用EBER原位杂交技术检测胃癌标本中EB病毒感染情... 目的研究胃癌中INPP4B的表达情况以及其与EB病毒相关胃癌的关系。方法以301例胃癌手术切除标本为研究对象,利用免疫组织化学方法检测癌细胞及癌旁正常黏膜细胞中INPP4B蛋白表达的情况。利用EBER原位杂交技术检测胃癌标本中EB病毒感染情况,分析INPP4B蛋白表达与临床病理特点的关系,以及与EB病毒相关胃癌的相关性。结果48.5%的胃癌标本中出现了INPP4B蛋白表达明显下降或阴性表达,而且INPP4B蛋白的表达与癌细胞的分化程度和生长方式密切相关。在EB病毒相关胃癌中,INPP4B表达下降的比率显著高于未被EB病毒感染的胃癌。结论新抑癌基因INPP4B在胃癌中出现较高频率的表达下降或阴性表达,尤其在EB病毒相关胃癌中表达下降更加显著,提示INPP4B在胃癌的失活与EB病毒感染相关。 展开更多

关键词 INPP4B 胃癌 EB病毒 蛋白表达

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脂质运载蛋白2在乳腺癌侵袭转移中的作用机制 被引量：5

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作者 叶芸 李彦姝 +1 位作者 张红艳 李丰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期111-114,120,共5页

目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响。方法采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描... 目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在乳腺癌细胞和组织中的表达、定位,及对乳腺癌细胞侵袭转移的影响。方法采用Western blotting检测LCN2在乳腺癌细胞系中的蛋白质表达情况,免疫组织化学检测人乳腺癌组织中LCN2的表达及定位,激光共聚焦扫描显微镜检测内源LCN2在乳腺癌细胞中的表达及定位。构建过表达LCN2的MCF-7、T47D细胞系,采用Western blotting检测与上皮间质转化(EMT)发生相关的标志物E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Slug)的蛋白表达情况。Transwell检测LCN2对乳腺癌细胞T47D迁移能力的影响。结果LCN2在MCF-7,T47D及ZR-75-30乳腺癌细胞系中低表达,在MDA-MB-231中中等表达,在ZR-75-1细胞系中高表达;免疫组织化学以及激光共聚焦扫描显微镜证实LCN2主要定位于细胞质;成功构建了过表达LCN2的乳腺癌细胞系MCF-7和T47D,Western blotting检测发现在过表达LCN2的T47D细胞系中E-cadherin和Claudin-1蛋白表达明显降低,而Slug以及Vimentin表达明显增高。过表达LCN2的T47D细胞系迁移能力增强。结论LCN2在不同乳腺癌细胞系中表达水平不同,主要定位于乳腺癌细胞质,LCN2能促进乳腺癌细胞的迁移,可能通过诱发EMT促进乳腺癌细胞的侵袭转移。 展开更多

关键词 脂质运载蛋白2 乳腺癌 表达 定位 上皮间质转化

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细胞焦亡在肿瘤发生、发展与治疗中的作用 被引量：4

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作者 姜珊 关一夫 李硕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期42-53,共12页

细胞焦亡(pyroptosis)又称细胞炎性坏死,是Gasdermin蛋白家族介导的一种程序性细胞死亡,表现为细胞不断肿胀直至细胞膜破裂,导致细胞内容物释放,进而激活强烈的炎症反应。近年来,细胞焦亡在肿瘤发病机制中的作用变得越来越突出,焦亡信... 细胞焦亡(pyroptosis)又称细胞炎性坏死,是Gasdermin蛋白家族介导的一种程序性细胞死亡,表现为细胞不断肿胀直至细胞膜破裂,导致细胞内容物释放,进而激活强烈的炎症反应。近年来,细胞焦亡在肿瘤发病机制中的作用变得越来越突出,焦亡信号通路分子及细胞焦亡过程中释放的多种炎症介质与肿瘤的发生、发展及对肿瘤化疗和免疫治疗的反应密切相关。由于肿瘤的异质性,细胞焦亡在不同肿瘤中的作用并不相同,因此有必要研究细胞焦亡在不同肿瘤中的具体作用机制。从药理学角度,寻求促进生成炎症小体或激活焦亡通路的分子底物,为肿瘤药物的研发和治疗提供更多思路。细胞焦亡在一定程度上也解答了肿瘤化疗和免疫治疗副作用产生的原因。细胞焦亡在肿瘤治疗过程中是“双刃剑”,如何调节药物在肿瘤组织、正常组织和免疫微环境中诱导细胞焦亡的方式和程度,对于提高肿瘤的化疗和免疫治疗效果,降低毒副作用具有重要的意义。本文就细胞焦亡的类型及分子机制,细胞焦亡在肿瘤的发生发展及其在肿瘤化疗、放射治疗、中药治疗和免疫治疗过程中发挥的作用进行综述,以期为临床肿瘤治疗和预后分析提供新靶点。 展开更多

关键词 细胞焦亡 Gasdermin蛋白家族 胱天蛋白酶家族 细胞焦亡分子机制 肿瘤治疗

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基于GEO和TCGA联合分析SULF1对胃癌总体生存率的影响 被引量：4

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作者 王佳敏 初冬美 +4 位作者 张家铜 员瑜 赵滢 孙威 张天彪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期865-869,共5页

目的应用基因表达数据库(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库联合分析硫酸酯酶1(SULF1)在胃癌组织中的表达情况及其对胃癌总体生存率(OS)的影响,探索SULF1表达与胃癌患者OS的相关性。方法从GEO数据库选取胃癌数据集进行差异表达基因(DEG... 目的应用基因表达数据库(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库联合分析硫酸酯酶1(SULF1)在胃癌组织中的表达情况及其对胃癌总体生存率(OS)的影响,探索SULF1表达与胃癌患者OS的相关性。方法从GEO数据库选取胃癌数据集进行差异表达基因(DEG)分析,使用数据集TCGA-STAD验证SULF1在胃癌组织中表达情况,cBioPortal数据库分析胃癌中SULF1基因的突变情况。单因素和多因素Cox回归分析SULF1与胃癌OS的关系。列线图验证SULF1对胃癌预后的影响。受试者操作特征曲线(ROC)分析SULF1表达对胃癌诊断的价值。结果GEO和TCGA数据集分析发现SULF1在胃癌组织中表达上调(P<0.001),胃癌中存在SULF1基因突变的情况。胃癌的发病、发展与年龄、肿瘤分期、SULF1基因表达有关,SULF1基因高表达与不良预后相关。SULF1基因表达是胃癌患者OS的一个独立预后标志物,SULF1高表达的胃癌患者OS相对较差(P<0.05)。SULF1表达对胃癌有较好的诊断价值。结论SULF1在胃癌中呈高表达,且与不良预后相关,可作为胃癌诊断和治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 基因表达数据库 癌症基因组图谱 硫酸酯酶1 胃癌

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肽基脯氨酰顺反异构酶1对喉癌细胞系Hep-2细胞生物学行为的影响 被引量：2

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作者 王辉 李章富 +2 位作者 温行 刘剑利 李福才 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期681-689,共9页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pc... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pcDNA3.1-Pin1后加核转录因子(NF-κB/p65)抑制剂(BAY11-7082)组(Pin1+7082组)。Pin1干扰分为转染阴性对照组(NC组)、转染siRNA组(Si-Pin1组)、转染siRNA后加NF-κB/p65激活剂(IL-1β)组(Si-Pin1+IL-1β组)。Western blotting检测Pin1、CDK2及NF-κB/p65蛋白表达,实时PCR检测Pin1及CDK2基因表达,免疫荧光实验检测细胞中心体扩增及NF-κB/p65核转位,流式细胞仪检测Hep-2细胞周期、凋亡、克隆形成,CCK-8实验检测Hep-2细胞增殖能力,Transwell及划痕实验检测Hep-2细胞的迁移能力。结果Pin1过表达促进中心体复制异常、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S转化,NF-κB/p65核转位以及CDK2的表达;NF-κB/p65抑制剂能够减弱这些效应。下调Pin1表达能够抑制中心体异常复制、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S的转化,NF-κB/p65入核以及CDK2的表达;NF-κB/p65激活剂能够逆转这些作用。结论Pin1可能经NF-κB通路上调CDK2的表达来影响Hep-2细胞的生物学行为。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1 喉癌细胞系 生物学行为

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高迁移率族蛋白B-1通过细丝蛋白A影响喉癌细胞迁移 被引量：4

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作者 贾茹 孙媛媛 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期490-494,共5页

目的探讨高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)通过细丝蛋白A(FLNA)对喉癌细胞迁移能力的影响。方法实时PCR法检测30例喉癌组织及喉癌Hep2细胞中FLNA的表达,分析FLNA的表达与患者临床病理特征的关系;RNA干扰技术敲减HMGB1表达,Western blotting和实... 目的探讨高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)通过细丝蛋白A(FLNA)对喉癌细胞迁移能力的影响。方法实时PCR法检测30例喉癌组织及喉癌Hep2细胞中FLNA的表达,分析FLNA的表达与患者临床病理特征的关系;RNA干扰技术敲减HMGB1表达,Western blotting和实时PCR方法检测Hep2细胞中FLNA表达;划痕实验、Transwell法检测空白对照组(CON组)、阴性对照组(NC组)、HMGB1-siRNA组、FLNA-siRNA组以及HMGB1-siRNA+FLNA-siRNA组中喉癌Hep2细胞迁移能力。结果患者喉癌组织及喉癌Hep2细胞中FLNA低表达。FLNA表达与患者淋巴结转移、临床分期和分化程度相关(P<0.05)。与NC组比较,HMGB1-siRNA组中Hep2细胞FLNA mRNA和蛋白表达上调,细胞迁移能力显著降低(P<0.01);FLNA-siRNA组Hep2细胞迁移能力明显增加(P<0.01)。与HMGB1-siRNA组比较,HMGB1-siRNA+FLNA-siRNA组Hep2细胞的迁移能力明显降低(P<0.001)。结论HMGB1通过抑制FLNA的表达促进喉癌细胞迁移。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白B-1 细丝蛋白A 喉癌细胞 细胞迁移

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miR-296对人肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2

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作者 刘洋 夏书月 武晶晶 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期224-229,共6页

目的探讨微小RNA-296(miR-296)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及其潜在的分子机制。方法将miR-296表达载体、抑制剂及相应阴性对照分别转染人肺腺癌A549细胞,实时PCR检测miR-296在不同细胞中的表达情况,CCK8法和平板克... 目的探讨微小RNA-296(miR-296)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及其潜在的分子机制。方法将miR-296表达载体、抑制剂及相应阴性对照分别转染人肺腺癌A549细胞,实时PCR检测miR-296在不同细胞中的表达情况,CCK8法和平板克隆实验检测miR-296对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力,Western blotting检测S100A4在各组A549细胞中的表达情况。结果与相应的对照组比较,转染了miR-296表达载体的A549细胞miR-296表达显著上调,细胞增殖和迁移能力明显下降,凋亡率明显上升,S100A4蛋白表达下调,差异均有统计学意义(均P<0.05);而转染了miR-296抑制剂的A549细胞miR-296表达显著下调,细胞增殖和迁移能力明显增强,凋亡率明显下降,S100A4蛋白表达上调,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-296通过靶向调控S100A4表达来抑制A549细胞增殖、迁移,促进凋亡。 展开更多

关键词 微小RNA-296 肺腺癌细胞 增殖 凋亡 迁移 S100A4

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MYCT1通过PRSS21抑制喉癌细胞的增殖和迁移 被引量：3

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作者 陈芸 孙媛媛 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期876-881,共6页

目的探讨MYCT1通过PRSS21对喉癌细胞增殖和迁移的影响。方法应用实时PCR和Western blotting方法检测喉癌中PRSS21的表达水平及MYCT1对PRSS21表达水平的影响;应用CCK-8实验和克隆形成实验检测MYCT1通过PRSS21对喉癌细胞增殖和克隆形成能... 目的探讨MYCT1通过PRSS21对喉癌细胞增殖和迁移的影响。方法应用实时PCR和Western blotting方法检测喉癌中PRSS21的表达水平及MYCT1对PRSS21表达水平的影响;应用CCK-8实验和克隆形成实验检测MYCT1通过PRSS21对喉癌细胞增殖和克隆形成能力的影响;应用划痕实验检测MYCT1通过PRSS21对喉癌细胞迁移能力的影响。结果PRSS21在喉癌中高表达(P<0.05);与对照组相比,MYCT1显著降低PRSS21在喉癌细胞中mRNA和蛋白质的表达水平(P<0.05);MYCT1通过PRSS21显著抑制喉癌细胞的增殖和克隆形成(P<0.05);MYCT1通过PRSS21显著抑制喉癌细胞的迁移能力(P<0.05)。结论MYCT1可通过抑制PRSS21的表达抑制喉癌细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 MYCT1 PRSS21 喉癌 增殖 迁移

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