人类发育与遗传学整合课程教学体会 被引量：12

1

作者 邱广蓉 李晓明 +8 位作者 陈芳杰 李春义 刘洪 李福才 金春莲 孙桂媛 刘彩霞 赵彦艳 孙开来 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期397-403,共7页

人类发育与遗传学整合课程体系的建立是课程改革的重要部分。通过整合教学内容,稳定教学队伍、开展教材建设、实施PBL(Problem-based learning)教学模式等进一步完善了整合课程体系,确立了整合+PBL教学模式,并通过教学实践证明切实可行... 人类发育与遗传学整合课程体系的建立是课程改革的重要部分。通过整合教学内容,稳定教学队伍、开展教材建设、实施PBL(Problem-based learning)教学模式等进一步完善了整合课程体系,确立了整合+PBL教学模式,并通过教学实践证明切实可行,在提高教学效果、培养学生能力上发挥一定的作用。 展开更多

关键词 人类发育与遗传学 整合课程 问题为基础的学习方式(PBL) 教学

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中国人肢带型肌营养不良相关遗传标记多态性研究 被引量：2

2

作者 孙桂凤 武盈玉 +2 位作者 张学 金春莲 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期329-331,共3页

目的：寻找中国人肢带型肌营养不良（ＬＧＭＤ）的致病基因。方法：应用ＰＣＲ技术对５０名正常无关个体和２２ 名来自３ 个肢带型肌营养不良症家系的成员，进行了１３ｑ１２ 区的Ｄ１３Ｓ１２０，Ｄ１３Ｓ１４１ 以及１７ｑ２１ 区的... 目的：寻找中国人肢带型肌营养不良（ＬＧＭＤ）的致病基因。方法：应用ＰＣＲ技术对５０名正常无关个体和２２ 名来自３ 个肢带型肌营养不良症家系的成员，进行了１３ｑ１２ 区的Ｄ１３Ｓ１２０，Ｄ１３Ｓ１４１ 以及１７ｑ２１ 区的ａｄ－ＣＡ遗传标记基因型分析，对此３ 个标记的杂合度和多态性信息含量（ＰＩＣ）进行了计算。结果：发现Ｄ１３Ｓ１２０ 和ａｄ－ＣＡ标记的杂合度较高，ＰＩＣ为０．６６ 和０．７３，１３ｑ１２区的Ｄ１３Ｓ１４１ 的ＰＩＣ＜ ０．２５。结论：Ｄ１３Ｓ１２０和ａｄ－ＣＡ 标记是中国人群开展ＬＧＭＤ产前诊断的有价值的遗传标记，Ｄ１３Ｓ１４１ 展开更多

关键词 肢带型 肌营养不良 遗传标记 多态性研究

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中国北方人PAH基因外显子6,12的突变研究 被引量：5

3

作者 李红杰 张学 +1 位作者 金春元 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期332-334,346,共4页

目的：检测中国北方人中苯丙酮尿症（ＰＫＵ）患者苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子６，１２ 中的突变。方法：应用聚合酶链反应—变性梯度凝胶电泳（ｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅ... 目的：检测中国北方人中苯丙酮尿症（ＰＫＵ）患者苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子６，１２ 中的突变。方法：应用聚合酶链反应—变性梯度凝胶电泳（ｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ， ＰＣＲ－ＤＧＧＥ）及直接测序方法，检测突变。结果：中国北方人３４ 例ＰＫＵ 患者外周血ＤＮＡ 中鉴定ＰＡＨ 基因外显子６，１２ 中的３种突变：Ｙ２０４Ｃ，Ｑ２３２Ｑ 和Ｒ４１３Ｐ，其频率分别为５．９％ （４／６８），４．４％ （３／６８），５．９％ （４／６８）。结论：本实验提示Ｑ２３２Ｑ 可能为中国北方人中较常见的一种新突变，并可能为协助苯丙酮尿症的诊断提供方便手段。同时证实了ＤＧＧＥ法不仅是一种高效快速的突变检测技术，而且作为一种鉴定已知点突变及通过连锁分析进行产前诊断的简便策略。 展开更多

关键词 苯丙酮尿症 苯丙氯酸羟化酶 聚合酶链反应

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东北汉族人群7p14-15区域内9个STR位点的遗传多态分析

4

作者 娄毅 邱广蓉 +3 位作者 辛娜 刘红波 孙桂凤 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期113-115,共3页

目的:分析东北汉族人群中7p14-15区域内9个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性。方法:采用荧光标记PCR扩增技术和毛细管电泳方法,对7p14-15区域内9个STR多态位点在100名随机选取的无血缘关系的东北汉族人群中的遗传多态性进行分析。结... 目的:分析东北汉族人群中7p14-15区域内9个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性。方法:采用荧光标记PCR扩增技术和毛细管电泳方法,对7p14-15区域内9个STR多态位点在100名随机选取的无血缘关系的东北汉族人群中的遗传多态性进行分析。结果:在东北汉族人群中,7p14-15区域的D7S526、D7S690、D7S2252、D7S817、D7S683、D7S656、D7S484、D7S2250、D7S2251位点分别检测出6、6、8、6、4、6、7、8和7个等位基因,17、19、29、17、10、17、24、27和22种基因型,杂合度分别为84%、85%、79%、82%、79%、85%、89%、88%和83%。结论:7p14-15区域的9个STR位点的基因频率和基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,并在东北汉族人群中呈现较好的遗传多态性。 展开更多

关键词 短串联重复序列 遗传多态性 Hardy—Weinberg平衡 7p14—15区域

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DLL4、VEGF在肺腺癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系 被引量：12

5

作者 李晓平 张清富 +4 位作者 陆斌 邱雪杉 罗阳 张卫东 许顺 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第2期117-121,共5页

背景与目的血管发生(angiogenesis)依赖于多种促进血管发生因子和抑制血管发生因子的综合交互作用调控。血管内皮生长因子(VEGF)和Notch信号传递途径(Notch signaling pathway)参与了此过程。本研究旨在探讨肺腺癌组织中Notch配体DLL4、... 背景与目的血管发生(angiogenesis)依赖于多种促进血管发生因子和抑制血管发生因子的综合交互作用调控。血管内皮生长因子(VEGF)和Notch信号传递途径(Notch signaling pathway)参与了此过程。本研究旨在探讨肺腺癌组织中Notch配体DLL4、VEGF的表达及其与肺腺癌血管生成的关系及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测80例肺腺癌(包括细支气管肺泡癌和普通肺腺癌)石蜡切片组织中DLL4、VEGF和CD34的表达。结果DLL4、VEGF的表达与肺腺癌患者的肿瘤直径、临床分期、组织学分级、淋巴结转移密切相关,DLL4阳性表达病例中VEGF表达率明显比DLL4阴性表达病例高,DLL4、VEGF共表达时与微血管密度的相关性比DLL4单独表达更明显。DLL4的表达在普通肺腺癌中明显高于细支气管肺泡癌。结论肺腺癌的预后与血管生成明显相关,DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关。 展开更多

关键词 DLL4 VEGF CD34 肺肿瘤 免疫组织化学

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HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的相关研究 被引量：6

6

作者 王莉莉 富伟能 +1 位作者 李增刚 孙开来 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-50,共5页

为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL... 为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL1基因上游HOXD13的结合位点,凝胶阻滞试验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证HOXD13和FHL1的相互作用。结果84例先天性马蹄内翻足患者中未发现HOXD13基因编码区突变存在。与同期正常足部肌肉组织相比HOXD13(33.3%),FHL1(46.6%)在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中表达明显下调。EMSA结果表明,当HOXD13存在时出现特异的DNA阻滞条带。上述结果说明:HOXD13的编码区突变可能不是先天性马蹄内翻足发生的原因,而HOXD13和FHL1表达水平的改变可能与马蹄内翻足畸形的发生有关,HOXD13可能通过直接调控FHL1发挥作用。 展开更多

关键词 先天性马蹄内翻足 HOXD13 FHL1 突变 表达

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从小鼠不同组织有效提取总RNA的一种简单方法 被引量：7

7

作者 宋军 张鸣镝 +3 位作者 张学 金春莲 孙开来 唐小任 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1995年第2期143-145,共3页

从小鼠不同组织有效提取总ＲＮＡ的一种简单方法宋军，张鸣镝，张学，金春莲，孙开来（中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室）唐小任（日本筑波理化学研究所ＤＮＡ银行）关键词总ＲＮＡ；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹在研究动物的基因及某... 从小鼠不同组织有效提取总ＲＮＡ的一种简单方法宋军，张鸣镝，张学，金春莲，孙开来（中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室）唐小任（日本筑波理化学研究所ＤＮＡ银行）关键词总ＲＮＡ；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹在研究动物的基因及某些人类遗传病基因的过程中，常需分析... 展开更多

关键词 总RNA NORTHERN印迹 RNA 提取

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GLI3、EN1基因在单纯性马蹄内翻足发生中的功能研究 被引量：6

8

作者 曹东华 王谦 +3 位作者 林长坤 王正东 张炫 金春莲 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1214-1220,共7页

为了探讨人类GLI3基因在单纯性马蹄内翻足(Idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)发生时所起的作用,文章构建了大鼠Gli3基因启动子区域荧光素酶报告基因表达载体来分析Gli3基因启动子的活性,并利用P-Match软件预测大鼠Gli3... 为了探讨人类GLI3基因在单纯性马蹄内翻足(Idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)发生时所起的作用,文章构建了大鼠Gli3基因启动子区域荧光素酶报告基因表达载体来分析Gli3基因启动子的活性,并利用P-Match软件预测大鼠Gli3基因启动子区域可能的调控元件,应用ChIP实验加以验证。并利用RT-PCR、免疫组化和Western blotting的方法分析大鼠En1与ICTEV的相关性。经P-Match软件预测,Gli3基因启动子区域有3个转录因子En1的可能结合位点,经ChIP实验证实位点1是真正结合位点。RT-PCR、免疫组化和Western blotting方法都证实En1基因在马蹄内翻足模型鼠中表达下降。结果提示大鼠的转录因子En1可能是Gli3基因的上游负调控元件。在ICTEV患者中,很可能是由于EN1基因表达水平的下降导致了GLI3基因表达水平的上升,最终导致ICTEV的发生。 展开更多

关键词 GLI3基因 EN1基因 单纯性马蹄内翻足

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IL-8基因在幽门螺杆菌相关性胃疾病中的表达 被引量：6

9

作者 付浩 王旭光 +3 位作者 富伟能 孙秀菊 袁媛 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期26-27,共2页

目的研究白细胞介素8(IL-8)基因与幽门螺杆菌(H.pylor)i相关性胃疾病发生发展的关系。方法采用免疫组化技术检测144例H.pylori相关性胃疾病胃黏膜标本中IL-8蛋白表达,其中浅表性胃炎54例、胃溃疡33例、萎缩性胃炎57例;另外探讨了72例不... 目的研究白细胞介素8(IL-8)基因与幽门螺杆菌(H.pylor)i相关性胃疾病发生发展的关系。方法采用免疫组化技术检测144例H.pylori相关性胃疾病胃黏膜标本中IL-8蛋白表达,其中浅表性胃炎54例、胃溃疡33例、萎缩性胃炎57例;另外探讨了72例不同胃黏膜标本H.pylori感染及其根除治疗对IL-8蛋白产生的影响。结果胃疾病IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组(55.4%,40.3%);浅表性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组(P<0.05);胃溃疡和萎缩性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组。H.pylori阳性组和H.pylori阴性组从浅表性胃炎→胃溃疡→萎缩性胃炎中IL-8蛋白阳性表达率逐渐上升(P<0.05)。根除H.pylori治疗后IL-8蛋白阳性表达率低于根除H.pylori治疗前。结论IL-8表达增强可能与HP相关性胃疾病有关。H.pylori感染可能通过IL-8介导促进癌前状态的发生。根除H.pylori治疗可以影响癌前状态。 展开更多

关键词 白细胞介素8 幽门螺杆菌 癌前状态

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应用差异显示法对小细胞肺癌转移相关基因的筛选 被引量：12

10

作者 李明江 田大力 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期31-33,共3页

目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BL... 目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BLAST检索分析其同源性。结果:小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达具有明显差异,共获得差异片段(EST,表达序列标签)24个,选择差异明显的3个片段克隆测序后,发现3片段均位于肿瘤高度相关的3q、7q和10q,均为未知序列,未发现同源基因,可能为新的基因片段。用RT-PCR对位于抑癌基因PTEN上游的L1片段进行验证的结果证实了该片段在小细胞肺癌的高表达率,具有统计学意义(P<0.05)。结论:人小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达存在差异,所测序的3个基因片段均为未知基因序列,这些片段可能为小细胞肺癌的转移相关候选基因,其序列和功能值得进一步深入研究。应用DDRT-PCR技术有望找到调控肿瘤转移的基因,为肿瘤的诊断和治疗提供新的线索。 展开更多

关键词 激光俘获显微切割 MRNA差异显示 转移相关基因 小细胞肺癌

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Kleihauer抗酸染色法标记母血中的胎儿有核红细胞 被引量：4

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作者 刘维瑜 金春莲 +3 位作者 刘丽英 林长坤 王雁 孙开来 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期289-292,共4页

以18例孕7～25周的孕妇外周血为材料,经Percoll不连续密度梯度离心初步富集胎儿有核红细胞。然后用Kleihauer抗酸染色法进行标记,结果阳性胎儿有核红细胞的胞浆呈深红色,而母亲的有核红细胞胞浆无色。显微操作法获取单个胎儿有核红细胞... 以18例孕7～25周的孕妇外周血为材料,经Percoll不连续密度梯度离心初步富集胎儿有核红细胞。然后用Kleihauer抗酸染色法进行标记,结果阳性胎儿有核红细胞的胞浆呈深红色,而母亲的有核红细胞胞浆无色。显微操作法获取单个胎儿有核红细胞,经全基因组扩增后,产物进行性别鉴定及STR连锁分析检测,验证有核红细胞的来源,并完成9例杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)的无创性产前基因诊断。应用Kleihauer抗酸染色法标记胎儿有核红细胞,它是一种快速、简单、直接的化学染色方法,更易于推广到临床应用。 展开更多

关键词 Kleihauer抗酸染色法 无创性产前基因诊断 有核红细胞

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应用10对引物多重PCR方法检测DMD基因缺失 被引量：3

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作者 林长坤 姜懿凌 +3 位作者 王谦 曹东华 崔婉婷 金春莲 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期346-348,共3页

目的建立适合于Duchenne型进行性肌营养不良(DMD)临床基因诊断的10对引物多重PCR方法 ,并探讨其临床应用价值。方法抽提55例DMD患者及正常对照者外周血DNA,选取肌营养不良蛋白基因的10对外显子引物,应用多重PCR反应方法 ,同时扩增10个... 目的建立适合于Duchenne型进行性肌营养不良(DMD)临床基因诊断的10对引物多重PCR方法 ,并探讨其临床应用价值。方法抽提55例DMD患者及正常对照者外周血DNA,选取肌营养不良蛋白基因的10对外显子引物,应用多重PCR反应方法 ,同时扩增10个特异性片段,扩增产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果 55例DMD患者中,28例(50.9%)存在外显子缺失,27例(49.1%)未检测到缺失;25例缺失片段集中于第45～53外显子,3例缺失片段集中于第12～19外显子。第50外显子缺失频率最高;其次为外显子45、47、51、52,再次之为外显子12、53。结论 DMD基因缺失片段主要分布于第45～53、12～19外显子2个缺失热点区域。该方法具有临床应用价值,是检测DMD基因缺失的首选方法 。 展开更多

关键词 DUCHENNE肌营养不良 基因缺失 多重PCR 基因诊断

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nm23H1和S100A4 mRNA表达与胃癌细胞体外侵袭力的关系 被引量：3

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作者 孙秀菊 孙开来 +2 位作者 陈峻青 李福才 赵彦艳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期161-163,共3页

目的 :探讨S10 0A4、nm2 3H1基因mRNA表达与胃癌细胞体外侵袭力的关系。方法 :采用Boyden小室法测定 4种胃癌细胞系MKN1、MKN45、GT3TKB、BGC82 3的体外侵袭力 ,RT -PCR检测 4种细胞系的S10 0A4和nm2 3H1mRNA表达水平。结果 :胃癌细胞... 目的 :探讨S10 0A4、nm2 3H1基因mRNA表达与胃癌细胞体外侵袭力的关系。方法 :采用Boyden小室法测定 4种胃癌细胞系MKN1、MKN45、GT3TKB、BGC82 3的体外侵袭力 ,RT -PCR检测 4种细胞系的S10 0A4和nm2 3H1mRNA表达水平。结果 :胃癌细胞体外侵袭力高低的顺序依次为 :MKN45最高 ,BGC82 3、MKN1次之(二者无显著差异 ) ,GT3TKB最低 (P <0 .0 0 1)。nm2 3H1、S10 0A4基因mRNA各自表达与胃癌细胞体外侵袭力无明显关系。nm2 3H1/S10 0A4mRNA相关表达水平的顺序依次为 :GT3TKB最高 ,BGC82 3和MKN1次之 (二者无显著差异 ,P >0 .0 5 )、MKN45最低 (P <0 .0 0 1) ,其相关表达与胃癌细胞体外侵袭力呈反比关系。结论 :nm2 3H1/S10 0A4mRNA的相关表达在评价胃癌细胞体外侵袭力方面具有重要价值。 展开更多

关键词 S100A4基因 NM23H1基因 胃癌细胞 侵袭力 胃癌

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MicroRNA与肿瘤相关的信号转导通路 被引量：12

14

作者 吴易阳 李岭 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1419-1428,共10页

信号转导通路在细胞代谢、生长、增殖、应激、发育和凋亡等生命活动中具有极为重要的作用。干扰这些通路将可能影响细胞的正常发育,甚至导致肿瘤。MicroRNA(miRNA)是近年来在真核生物中发现的、在转录后水平负调节基因表达的一类长度约2... 信号转导通路在细胞代谢、生长、增殖、应激、发育和凋亡等生命活动中具有极为重要的作用。干扰这些通路将可能影响细胞的正常发育,甚至导致肿瘤。MicroRNA(miRNA)是近年来在真核生物中发现的、在转录后水平负调节基因表达的一类长度约22个核苷酸的非编码小RNA,其靶基因数目众多,生物学功能广泛。在多种肿瘤中发现了miRNA的异常表达,提示后者与肿瘤发生有关,可能机制为调控癌基因或肿瘤抑制基因的表达。此外亦发现miRNA的靶基因有许多作用于肿瘤相关的信号转导通路。miRNA在肿瘤发生过程中的重要调控功能预示其将成为人类癌症诊断和治疗方面的新星。 展开更多

关键词 MIRNA 肿瘤 肿瘤发生 信号转导通路

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长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因特异片段的制备与分析 被引量：3

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作者 房凯 赵彦艳 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期164-165,168,共3页

目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类... 目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段长度为 2 89bp ,该片段与其他种蝮蛇类凝血酶DNA片段有同源性。结论 :本实验克隆了长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因片段。根据不同种属蛋白质家族成员的保守性和同源性设计引物可以有效地克隆家族成员的DNA片段。 展开更多

关键词 类凝血酶 基因克隆 蛇毒 基因特异性 CDNA片段 制备

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应用二核苷酸重复多态DMD产前基因诊断研究 被引量：7

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作者 金春莲 林长坤 +3 位作者 武盈玉 姜莉 曲陆荣 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期186-188,共3页

目的：应用二核苷酸重复多态Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）基因诊断，探讨ＤＭＤ产前基因诊断方案及其可行性。方法：在应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）初步分析Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子４９和４５的（ＣＡ）ｎ多态分布... 目的：应用二核苷酸重复多态Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）基因诊断，探讨ＤＭＤ产前基因诊断方案及其可行性。方法：在应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）初步分析Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子４９和４５的（ＣＡ）ｎ多态分布的基础上，以Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因５′端（ＣＡ）ｎ多态和内含子４５，４９，５０以及３′端（ＣＡ）ｎ多态为遗传标记，单体型连锁分析的同时直接检测缺失相结合的方法。结果：Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子４９和４５的（ＣＡ）ｎ多态共检测到７个和６个等位片段，实际检出的杂合子率为８６．６％和７３％；在东北地区首次成功地完成了８个家系９例ＤＭＤ产前基因诊断。结论：该方法不分缺失型和非缺失型一步完成诊断，是临床产前基因诊断较理想的方案。 展开更多

关键词 DUCHENNE型 肌营养不良症 二核苷酸 产前诊断

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喉癌染色体6q25区域的杂合性丢失和微卫星不稳定性分析 被引量：2

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作者 康宁 徐振明 +3 位作者 李福才 高红明 富伟能 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期289-291,共3页

目的 :在 6 q2 5区域内筛查喉癌相关的基因 ,探讨胰岛素样生长因子受体Ⅱ (IGF2R)基因及脆性位点FRA6E在喉癌发生中的作用。方法 :在 6 q2 5区域选择 3个微卫星多态标记 ,其中D6S980位于IGF2R的 5’端且与FRA6E紧密连锁。应用聚合酶链... 目的 :在 6 q2 5区域内筛查喉癌相关的基因 ,探讨胰岛素样生长因子受体Ⅱ (IGF2R)基因及脆性位点FRA6E在喉癌发生中的作用。方法 :在 6 q2 5区域选择 3个微卫星多态标记 ,其中D6S980位于IGF2R的 5’端且与FRA6E紧密连锁。应用聚合酶链式反应 聚丙烯酰胺尿素凝胶电泳 DNA银染方法对 70例喉癌进行杂合性丢失(LOH)和微卫星不稳定性 (MI)分析。结果 :在这 3个痤位上 ,喉癌LOH频率以D6S980处最高 ,达 4 1.4 % ,MI频率为 2 6 .8%。总的异常频率为 6 8.2 %。LOH和MI与喉癌临床分期无关。结论 :提示IGF2R可能是喉癌相关的抑癌基因。 展开更多

关键词 喉癌 胰岛素样生长因子受体-Ⅱ基因 脆性位点FRA6E 杂合性丢失 微卫星不稳定性

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miR-362-3p在喉癌组织中的表达及其对喉癌Hep-2细胞迁移的影响 被引量：8

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作者 赵越 孙媛媛 +2 位作者 佟雪 岳鹏杰 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期236-239,共4页

目的探讨miR-362-3p在喉癌组织中的表达水平及其对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。方法收集50例喉癌组织及对应癌旁组织标本,实时PCR方法检测miR-362-3p在喉癌组织和癌旁组织中表达水平,分析miR-362-3p的表达与喉癌患者临床病理特征的关... 目的探讨miR-362-3p在喉癌组织中的表达水平及其对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。方法收集50例喉癌组织及对应癌旁组织标本,实时PCR方法检测miR-362-3p在喉癌组织和癌旁组织中表达水平,分析miR-362-3p的表达与喉癌患者临床病理特征的关系;将miR-362-3p模拟物、抑制剂以及阴性对照miRNA分别转染喉癌Hep-2细胞,实时PCR检测转染效率;划痕和Transwell实验检测miR-362-3p对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。结果 miR-362-3p在喉癌组织中表达水平显著高于癌旁组织(P <0.05),且与喉癌患者淋巴结转移及临床分期有关;上调miR-362-3p表达水平能促进喉癌Hep-2细胞的迁移能力,下调miR-362-3p表达水平能抑制喉癌Hep-2细胞的迁移能力(均P <0.05)。结论 miR-362-3p在喉癌组织中表达上调,且能够促进喉癌细胞的迁移能力,提示其发挥潜在癌基因作用。 展开更多

关键词 miR-362-3p表达 喉癌 迁移

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SH3GL2基因对喉癌细胞增殖、凋亡的影响及在化疗增敏中的作用 被引量：2

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作者 尚超 郭艳 +2 位作者 李巍 富伟能 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期328-331,共4页

目的探讨SH3GL2基因对喉癌细胞凋亡、侵袭能力的影响,及其对化疗药物顺铂(DDP)敏感性的影响。方法构建重组载体pcDNA3.1-SH3GL2,转染Hep2细胞;RT-PCR、Westernblot检测转染后SH3GL2基因的表达改变;MTT法测定细胞毒性指数,流式细胞仪检... 目的探讨SH3GL2基因对喉癌细胞凋亡、侵袭能力的影响,及其对化疗药物顺铂(DDP)敏感性的影响。方法构建重组载体pcDNA3.1-SH3GL2,转染Hep2细胞;RT-PCR、Westernblot检测转染后SH3GL2基因的表达改变;MTT法测定细胞毒性指数,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;应用DDP后检测细胞的凋亡和增殖情况。结果成功构建重组载体;转染Hep2细胞后SH3GL2基因的表达与对照组比较有明显增强,凋亡明显升高(P<0.05),增殖能力明显下降(P<0.05);与DDP处理组比较,联合处理组细胞的凋亡增加更为明显(P<0.05),对细胞增殖能力的抑制也更为显著(P<0.05)。结论 SH3GL2基因表达增高能够抑制Hep2细胞的增殖,促进细胞凋亡,并能够在一定程度上增强Hep2细胞对化疗药物DDP的敏感性。 展开更多

关键词 SH3GL2基因 喉癌 增殖 凋亡 顺铂

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miR-24-2对人骨肉瘤细胞系U-2OS体外增殖能力的影响 被引量：2

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作者 梁德勇 陈升 +1 位作者 王野 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期393-395,共3页

目的探讨miR-24-2对人骨肉瘤细胞系U-2OS体外增殖能力的影响。方法用脂质体法将miR-24-2模拟物转染入人骨肉瘤细胞系U-2OS。将U-2OS细胞分为miR-24-2模拟物转染组、miR-24-2抑制剂转染组、阴性对照组和正常对照组4组。转染后采用实时定... 目的探讨miR-24-2对人骨肉瘤细胞系U-2OS体外增殖能力的影响。方法用脂质体法将miR-24-2模拟物转染入人骨肉瘤细胞系U-2OS。将U-2OS细胞分为miR-24-2模拟物转染组、miR-24-2抑制剂转染组、阴性对照组和正常对照组4组。转染后采用实时定量RT-PCR检测各组细胞miR-24-2的表达水平,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况。结果与阴性对照组和正常对照组比较,miR-24-2模拟物转染组细胞增殖能力显著下降,而miR-24-2抑制剂转染组细胞增殖能力显著增强。结论 miR-24-2能够抑制人骨肉瘤细胞系U-2OS的体外增殖能力,可望成为骨肉瘤治疗的分子标志物。 展开更多

关键词 miR-24-2 骨肉瘤 转染 增殖

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