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GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
顾卉
佟宇鑫
+3 位作者
刘彤
李慧
李丹妮
袁正伟
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期961-963,978,共4页
目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质...
目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础。
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关键词
LMO1
截短突变体
质粒
原核表达
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题名
GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
顾卉
佟宇鑫
刘彤
李慧
李丹妮
袁正伟
机构
中国医科大学
附属盛京医院
实验
研究中心
中国医科大学基础医学院细胞生物教研室 细胞生物学教育部、卫生部重点实验室
中国医科大学
第
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期961-963,978,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30872705,30801242)
文摘
目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础。
关键词
LMO1
截短突变体
质粒
原核表达
Keywords
LMO1
deletion mutants
plasmid
prokaryotic expression
分类号
Q257 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达
顾卉
佟宇鑫
刘彤
李慧
李丹妮
袁正伟
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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