检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

西咪替丁增强5-氟脲嘧啶对人胃癌细胞的生长抑制作用被引量：1: 1; 作者刘芙蓉张成宏 +1 位作者高建李丰《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1021-1023,1027,共4页; 目的观察不同浓度的西咪替丁、5-氟脲嘧啶(5-Fu)单用或联合应用对人胃癌细胞MGC-803、BGC-823生长及凋亡的影响。方法用MTT法检测西咪替丁与5-Fu联合应用对胃癌细胞MGC-803、BGC-823存活率的影响;流式细胞仪检测西咪替丁与5-Fu联合应用... 展开更多; 关键词西咪替丁 5-氟脲嘧啶联合应用胃肿瘤细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

骨肉瘤细胞中ArgBP2的表达和定位: 2; 作者沈涛李妍 +3 位作者杨礼庆梁爽巴根付勤《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期237-239,共3页; 目的:构建真核表达载体GFP-hArgBP2并检测在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法:以pcDNA3.1-hArgBP2为模板,利用PCR扩增hArgBP2基因cDNA全长,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中。进一步将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉... 展开更多; 关键词 ArgBP2 WESTERN BLOT 免疫沉淀; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质被引量：1: 3; 作者李彦姝李晓东 +2 位作者吴怡李丹妮李丰《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期8-10,14,共4页; 目的利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达。将人胎脑cDNA文库转化酵母Y187,与已转化... 展开更多; 关键词 Pak4 酵母双杂交信号转导; 在线阅读下载PDF 职称材料

hCAP基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位: 4; 作者沈涛梁峰 +4 位作者杨礼庆李妍粱爽薛峰付勤《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期141-143,共3页; 目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中。进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定,并转染到工具细... 展开更多; 关键词 hCAP WESTERN BLOT 绿色荧光蛋白质粒构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

hPAK4基因重组质粒的构建及蛋白表达: 5; 作者张红艳李彦姝 +3 位作者王春玉苏楠李丹妮李丰《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期84-86,94,共4页; 目的构建hPAK4真核表达载体,证实融合蛋白在细胞内表达,融合蛋白可以用于GST-pulldown实验。方法提取人乳腺癌细胞MCF-7mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有GST标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转... 展开更多; 关键词 PAK4基因蛋白质印迹融合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠3D3／LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位: 6; 作者代炜李彦姝 +1 位作者李妍孙长伏《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期684-687,共4页; 目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌... 展开更多; 关键词 3D3/LYRIC 腺样囊性癌 AEG-1; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名西咪替丁增强5-氟脲嘧啶对人胃癌细胞的生长抑制作用被引量：1: 1; 作者刘芙蓉张成宏高建李丰; 机构中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室中国医科大学实验技术中心; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1021-1023,1027,共4页; 文摘目的观察不同浓度的西咪替丁、5-氟脲嘧啶(5-Fu)单用或联合应用对人胃癌细胞MGC-803、BGC-823生长及凋亡的影响。方法用MTT法检测西咪替丁与5-Fu联合应用对胃癌细胞MGC-803、BGC-823存活率的影响;流式细胞仪检测西咪替丁与5-Fu联合应用对胃癌细胞凋亡率的影响。结果西咪替丁与5-Fu联合应用时,西咪替丁在无毒浓度(5～50μmol/L)即可显著增强低浓度5-Fu对胃癌细胞的生长抑制作用。同时还发现,西咪替丁能增强5-Fu诱导胃癌细胞凋亡。结论西咪替丁可提高人胃癌细胞MGC-803、BGC-823对化疗药物5-Fu的敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。; 关键词西咪替丁 5-氟脲嘧啶联合应用胃肿瘤细胞株; Keywords cimetidine 5-Fu combination stomach neoplasms; 分类号 Q279 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名骨肉瘤细胞中ArgBP2的表达和定位: 2; 作者沈涛李妍杨礼庆梁爽巴根付勤; 机构中国医科大学附属盛京医院骨科中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室明尼苏达大学实验病理系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期237-239,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(30800415 81070688); 文摘目的:构建真核表达载体GFP-hArgBP2并检测在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法:以pcDNA3.1-hArgBP2为模板,利用PCR扩增hArgBP2基因cDNA全长,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中。进一步将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉瘤细胞MG-63中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。同时利用共聚焦激光扫描显微镜观察GFP-hArgBP2在MG-63细胞中的定位,免疫沉淀的方法纯化hArgBP2蛋白。结果:hArgBP2基因cDNA全长成功构建到真核表达载体pEGFP-C1中,Western blot检测到了GFP-hArgBP2融合蛋白表达,相对分子质量(Mr)约为97 000。GFP-hArgBP2在骨肉瘤细胞MG-63中主要定位于细胞质和核周,并成功纯化hArgBP2蛋白。结论:成功地构建了GFP-hArgBP2真核表达质粒,同时鉴定了GFP-hArgBP2融合蛋白的表达,并纯化hArgBP2蛋白。GFP-hArgBP2蛋白主要定位在细胞质和核周。; 关键词 ArgBP2 WESTERN BLOT 免疫沉淀; Keywords ArgBP2 Western blot immunoprecipitation; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质被引量：1: 3; 作者李彦姝李晓东吴怡李丹妮李丰; 机构中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳医学院病原生物学教研室中国医科大学临床医学系; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期8-10,14,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30370736 30570966) 教育部博士点基金资助项目(20050159023); 文摘目的利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达。将人胎脑cDNA文库转化酵母Y187,与已转化诱饵质粒的AH109酵母进行交配实验。交配子在SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/X-α-gal平板上筛选,阳性克隆质粒酶切鉴定。结果成功构建了pGBKT7-Pak4 KD诱饵质粒,Western blot证实其在酵母菌AH109和Y187中表达,筛选了多个与Pak4相互作用的阳性转化子。结论利用酵母双杂交系统筛选出Pak4相互作用蛋白质。; 关键词 Pak4 酵母双杂交信号转导; Keywords p21-activated kinase 4 yeast two- hybrid signal tmnsduction; 分类号 Q257 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hCAP基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位: 4; 作者沈涛梁峰杨礼庆李妍粱爽薛峰付勤; 机构中国医科大学附属盛京医院骨科中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室明尼苏达大学实验病理系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期141-143,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(30800415,81070688); 文摘目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中。进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定,并转染到工具细胞COS-7中,提取细胞蛋白进行Western blot。最后利用激光共聚焦显微镜观察pEGFP-hCAP在NIH3T3成纤维细胞内的定位。结果:hCAP基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为3 879 bp,测序证实成功。Western blot检测GFP-hCAP融合蛋白表达,相对分子质量(Mr)约为169 000。pEG-FP-hCAP在NIH3T3细胞中主要定位于细胞周边。结论:成功构建了真核表达载体pEGFP-hCAP,融合蛋白在NIH3T3细胞中主要定位于细胞周边。; 关键词 hCAP WESTERN BLOT 绿色荧光蛋白质粒构建; Keywords hCAP Western blot GFP plasmid construction; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hPAK4基因重组质粒的构建及蛋白表达: 5; 作者张红艳李彦姝王春玉苏楠李丹妮李丰; 机构中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室中国医科大学第; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期84-86,94,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30771128) 辽宁省教育厅创新团队项目(2008T195) 中国博士后科学基金(20060390975); 文摘目的构建hPAK4真核表达载体,证实融合蛋白在细胞内表达,融合蛋白可以用于GST-pulldown实验。方法提取人乳腺癌细胞MCF-7mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有GST标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blot检测,同时进行GST-pulldown实验。结果hPAK4全长基因序列克隆到真核表达载体pEBG中,酶切鉴定片段为1800bp。Westernblot检测到融合蛋白GST-hPAK4的表达,分子量约为94kDa,融合蛋白能够被Glutathione Sepharose4B沉淀。结论成功构建了hPAK4全长基因真核表达载体,同时鉴定了GST-hPAK4融合蛋白的表达,并且能够被Glutathione Sepharose4B沉淀。; 关键词 PAK4基因蛋白质印迹融合蛋白; Keywords PAK4 gene Western blot fusion protein; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠3D3／LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位: 6; 作者代炜李彦姝李妍孙长伏; 机构中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期684-687,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30672331,30800415); 文摘目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC在腺样囊性癌ACC-2细胞内的定位。结果 m3D3/LYRIC全长基因序列克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小为1 740 bp。Western blot检测到融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC表达,分子量约为91 kDa。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞质内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了m3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC蛋白主要定位于细胞质内。; 关键词 3D3/LYRIC 腺样囊性癌 AEG-1; Keywords 3 D3/LYRIC adenoid cystic carcinoma AEG- 1; 分类号 R782 [医药卫生—口腔医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	西咪替丁增强5-氟脲嘧啶对人胃癌细胞的生长抑制作用	刘芙蓉张成宏高建李丰	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	骨肉瘤细胞中ArgBP2的表达和定位	沈涛李妍杨礼庆梁爽巴根付勤	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质	李彦姝李晓东吴怡李丹妮李丰	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	hCAP基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位	沈涛梁峰杨礼庆李妍粱爽薛峰付勤	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	hPAK4基因重组质粒的构建及蛋白表达	张红艳李彦姝王春玉苏楠李丹妮李丰	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	小鼠3D3／LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位	代炜李彦姝李妍孙长伏	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料