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大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养及其生物学行为初步探讨 被引量:14
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作者 王义宝 刘云会 +2 位作者 刘丽波 王萍 马永会 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期224-228,共5页
本文旨在探讨建立稳定的大鼠原代脑微血管内皮细胞的培养方法,并对其血脑屏障特性进行初步研究。通过匀浆、葡聚糖高速梯度离心提取大鼠脑皮层微血管段,用胶原酶消化后,在37℃,5%CO2孵箱中进行原代及传代细胞培养,以跨内皮阻抗值分析其... 本文旨在探讨建立稳定的大鼠原代脑微血管内皮细胞的培养方法,并对其血脑屏障特性进行初步研究。通过匀浆、葡聚糖高速梯度离心提取大鼠脑皮层微血管段,用胶原酶消化后,在37℃,5%CO2孵箱中进行原代及传代细胞培养,以跨内皮阻抗值分析其血脑屏障特性随传代次数的改变。结果证明:原代培养后7~10d沿微血管段生成单层"铺路石"样细胞,经VIII因子证实95%以上的培养细胞是血管内皮细胞,通过传代可以进一步纯化,得到稳定的脑微血管内皮细胞系,原代培养的脑微血管内皮细胞表现出很强的屏障特性,与内皮细胞株之间有显著差异,随着传代次数的增加脑微血管内皮细胞的跨内皮阻抗减弱。以上结果表明,采用匀浆、梯度离心、胶原酶消化是获取大鼠脑微血管内皮细胞稳定的方法,原代培养的脑微血管内皮细胞是研究血脑屏障的最佳技术手段。 展开更多
关键词 脑血管内皮细胞 原代培养 跨内皮阻抗
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miR-29s家族对人脑胶质瘤干细胞生物学行为的影响 被引量:3
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作者 奚卓 薛一雪 +1 位作者 马珺 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期201-204,209,共5页
目的研究miR-29s家族在胶质瘤干细胞(GSCs)中的表达水平,以及对GSCs生物学行为的影响是否存在差异。方法 8例胶质瘤患者术中取肿瘤标本,制备成GSCs。应用实时PCR方法检测miR-29a、miR-29b和miR-29c的内源性表达。CCK-8方法检测GSCs增殖,... 目的研究miR-29s家族在胶质瘤干细胞(GSCs)中的表达水平,以及对GSCs生物学行为的影响是否存在差异。方法 8例胶质瘤患者术中取肿瘤标本,制备成GSCs。应用实时PCR方法检测miR-29a、miR-29b和miR-29c的内源性表达。CCK-8方法检测GSCs增殖,Transwell小室方法检测GSCs的迁移侵袭,流式细胞仪检测GSCs的凋亡。结果 miR-29a、miR-29b和miR-29c在GSCs中低表达,外源性提高表达量后,可以抑制GSCs的增殖、迁移和侵袭能力,促进GSCs的凋亡。结论 miR-29s家族在GSCs中起抑癌基因的作用,家族成员中以miR-29a的抑癌能力最强且起到主导作用。 展开更多
关键词 胶质瘤干细胞 miR-29a miR-29b miR-29c 生物学行为
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miR-194对人脑胶质瘤U87细胞恶性生物学行为的影响 被引量:13
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作者 滕浩 薛一雪 +1 位作者 王萍 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期673-677,共5页
目的研究miR-194在人脑胶质瘤组织及人U87细胞中表达,以及其对U87细胞增殖、迁移、侵袭能力和凋亡率的影响。方法应用实时荧光定量PCR方法分别检测23例人脑胶质瘤组织及5例对照脑组织(脑出血及外伤脑组织)中miR-194的表达水平;将miR-19... 目的研究miR-194在人脑胶质瘤组织及人U87细胞中表达,以及其对U87细胞增殖、迁移、侵袭能力和凋亡率的影响。方法应用实时荧光定量PCR方法分别检测23例人脑胶质瘤组织及5例对照脑组织(脑出血及外伤脑组织)中miR-194的表达水平;将miR-194激动剂、拮抗剂及其各自的空白对照分别转染至U87细胞中,应用CCK-8方法检测转染miR-194后U87细胞增殖能力;Transwell实验检测U87细胞迁移、侵袭能力。流式细胞技术检测转染miR-194后细胞凋亡率。结果与对照组比较,人脑胶质瘤组织中miR-194表达量显著下调(P<0.05);过表达miR-194后能够明显抑制U87细胞增殖、迁移及侵袭能力,并显著促进U87细胞凋亡。结论 miR-194在胶质瘤组织中表达下调,过表达miR-194能够显著抑制U87细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-194 恶性生物学行为
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神经导航辅助下经单鼻孔-蝶窦入路切除复发垂体腺瘤的疗效分析 被引量:3
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作者 蔡恒 刘云会 +1 位作者 薛一雪 冯天达 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1036-1038,共3页
回顾性分析中国医科大学附属盛京医院神经外科2013年9月至2016年8月收治的17例复发垂体腺瘤病例,所有病例均在神经导航辅助下经单鼻孔-蝶窦入路切除肿瘤。复发垂体腺瘤再次经蝶入路定位困难,解剖结构混乱,应用神经导航技术可有效辅助术... 回顾性分析中国医科大学附属盛京医院神经外科2013年9月至2016年8月收治的17例复发垂体腺瘤病例,所有病例均在神经导航辅助下经单鼻孔-蝶窦入路切除肿瘤。复发垂体腺瘤再次经蝶入路定位困难,解剖结构混乱,应用神经导航技术可有效辅助术者精确定位肿瘤位置,提高肿瘤全切率和手术安全性。 展开更多
关键词 神经导航 垂体腺瘤 单鼻孔-蝶窦入路 手术治疗
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神经生长因子与降钙素基因相关肽减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠海马tau蛋白磷酸化
5
作者 张正洪 彭新民 +1 位作者 席刚明 方秀斌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期463-467,共5页
为探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响,用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、Western Blotting和图像分析方法检测大鼠海马tau... 为探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响,用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、Western Blotting和图像分析方法检测大鼠海马tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化程度和总tau蛋白表达,以及NGF与CGRP对tau蛋白过度磷酸化的影响。结果显示:缺血再灌注组同侧海马tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平和总tau蛋白明显升高(P<0.05);NGF组及CGRP组大鼠海马tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平明显低于缺血再灌注组,总tau也下降(P<0.05);NGF与CGRP合用组海马tau蛋白磷酸化水平进一步降低,分别低于NGF组和CGRP组(P<0.05)。以上结果表明NGF及CGRP明显减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠海马tau蛋白磷酸化程度,二者合用作用更强,降低缺血神经元tau蛋白磷酸化水平可能对缺血神经元起保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 TAU蛋白 磷酸化 神经生长因子 降钙素基因相关肽 大鼠
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大鼠局灶性脑缺血再灌注早期血脑屏障通透性变化的研究 被引量:22
6
作者 王振华 刘云会 +2 位作者 马腾 喻博 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1073-1076,共4页
目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注早期血脑屏障通透性及紧密连接蛋白claudin-5、occludin和蛋白激酶Cδ(PKCδ)表达的变化。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,伊文思蓝法检测血脑屏障的通透性变化,免疫组化和Western blot... 目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注早期血脑屏障通透性及紧密连接蛋白claudin-5、occludin和蛋白激酶Cδ(PKCδ)表达的变化。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,伊文思蓝法检测血脑屏障的通透性变化,免疫组化和Western blot方法检测脑缺血组织claudin-5和occludin的表达,Western blot方法检测脑缺血组织PKCδ蛋白的表达。结果伊文思蓝法结果表明,与假手术组比较,血脑屏障通透性在缺血1 h、缺血2 h、再灌注0.5 h、1 h、2 h时显著升高(P<0.01)。免疫组化和Western blot结果显示,与假手术组比较,脑缺血组织血管内皮细胞claudin-5和occludin的表达亦在缺血1 h、缺血2 h、再灌注0.5 h、1 h、2 h时显著下降(P<0.01);而PKCδ蛋白在缺血1 h、缺血2 h、再灌注0.5 h、1 h、2 h时表达显著上调(P<0.01)。结论大鼠局灶性脑缺血再灌注早期血脑屏障通透性的增加可能与claudin-5、occludin表达下降和PKCδ蛋白激活有关。 展开更多
关键词 血脑屏障 缺血再灌注 CLAUDIN-5 OCCLUDIN 蛋白激酶Cδ
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CGRP和NGF对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:31
7
作者 金大成 王铁民 方秀斌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期296-300,共5页
为了探讨外源性降钙素基因相关肽 ( CGRP)和神经生长因子 ( NGF)对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质 Caspase-3蛋白表达的影响 ,在全脑缺血后再灌注模型上 ,应用免疫组织化学结合显微图象分析方法检测了 Caspase-3蛋白表达。结果发现 ... 为了探讨外源性降钙素基因相关肽 ( CGRP)和神经生长因子 ( NGF)对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质 Caspase-3蛋白表达的影响 ,在全脑缺血后再灌注模型上 ,应用免疫组织化学结合显微图象分析方法检测了 Caspase-3蛋白表达。结果发现 ,假手术组大鼠纹皮质未见 Caspase-3表达 ;缺血组较假手术组 Caspase-3表达显著增加 ( P<0 .0 1) ;CGRP组和 NGF组 Cas-pase-3表达均弱于缺血组 ( P<0 .0 5 ) ;CGRP和 NGF合用组 Caspase-3表达明显弱于缺血组 ( P<0 .0 1) ,分别弱于 CGRP组 ( P<0 .0 5 )和 NGF组 ( P<0 .0 5 )。缺血组缺血后再灌注 3 h Caspase-3开始表达 ,1d达高峰 ,3 d时减弱 ,CGRP和 NGF合用组 Cas-pase-3表达随着缺血后再灌注时间的延长而逐渐减弱。以上结果提示 :CGRP和 NGF分别抑制全脑缺血后大鼠纹皮质 Caspase-3蛋白表达 ,联合应用则能显著抑制全脑缺血后大鼠纹皮质 Caspase-3蛋白表达 。 展开更多
关键词 神经生长因子 纹皮质 大鼠 降钙素基因相关肽 NGF CGRP 全脑缺血 蛋白 表达
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紫草素对脑胶质瘤干细胞干性维持的相关研究 被引量:12
8
作者 刘静 笪祖科 +4 位作者 李振 薛一雪 刘丽波 王萍 刘云会 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期49-54,共6页
目的研究紫草素对脑胶质瘤干细胞(GSCs)干性维持的影响及相关分子机制。方法应用免疫荧光方法对分离提取的细胞球进行干细胞表面标志性分子CD133和nestin的检测;紫草素(2μmol·L-1)处理GSCs 12、24和48 h后,光镜下观察紫草素对GSC... 目的研究紫草素对脑胶质瘤干细胞(GSCs)干性维持的影响及相关分子机制。方法应用免疫荧光方法对分离提取的细胞球进行干细胞表面标志性分子CD133和nestin的检测;紫草素(2μmol·L-1)处理GSCs 12、24和48 h后,光镜下观察紫草素对GSCs悬浮细胞球形态的影响;采用亚球形成实验评估紫草素对GSCs自我更新能力的影响;应用Western blot方法检测紫草素作用下GSCs干细胞标志分子CD133的表达变化,同时检测紫草素作用下,GSCs中PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt的表达变化;联合应用胰岛素样生长因子-1(IGF-1)后检测紫草素作用下,GSCs干性维持的改变。结果分离提取的细胞球表面CD133和nestin呈阳性表达;紫草素能够明显抑制GSCs悬浮细胞球的形态和二代细胞球的形成,同时能够降低CD133的表达;与对照组相比,紫草素作用下,GSCs中PI3K和Akt的表达无变化,pPI3K和p-Akt的表达呈现药物时间依赖性明显下降;此外,IGF-1能够明显改善紫草素对GSCs干性维持的抑制作用。结论紫草素能够明显抑制GSCs的干性维持,其机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 紫草素 胶质瘤干细胞 干性维持 PI3K/AKT信号通路 胰岛素样生长因子-1 自我更新能力
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缺血再灌注损伤大鼠脑组织MMP-2、MMP-9动态变化与脑水肿改变 被引量:15
9
作者 焦海霞 王萍 +1 位作者 马腾 薛一雪 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1193-1197,共5页
目的探讨发生脑缺血再灌注损伤时MMP-2、MMP-9表达和活性的变化规律及应用强力霉素后脑水肿的变化。方法大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,根据再灌注时间不同分为再灌注3、6、12、24、72、120h组及假手术组。应用干湿重法... 目的探讨发生脑缺血再灌注损伤时MMP-2、MMP-9表达和活性的变化规律及应用强力霉素后脑水肿的变化。方法大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,根据再灌注时间不同分为再灌注3、6、12、24、72、120h组及假手术组。应用干湿重法测定强力霉素干预后缺血侧脑半球含水量的变化,应用蛋白质印迹法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9蛋白表达变化,应用明胶酶谱法检测缺血侧脑组织MMP-2和MMP-9活性变化。结果 MMP-2在脑缺血再灌注3h和120h表达和活性升高(P<0.01);MMP-9在脑缺血再灌注6h表达和活性开始升高(P<0.01),到再灌注24h达到峰值,再灌注120h降至正常水平(P>0.05);脑缺血再灌注大鼠各时间点缺血侧脑半球含水量与假手术组相比皆升高,并且随着再灌注时间延长持续升高;应用强力霉素大鼠缺血侧脑半球含水量与同时间点生理盐水组相比降低(P<0.05或P<0.01)。结论 MMP-2和MMP-9降解细胞外基质引发血管源性脑水肿,MMP-2和MMP-9的表达及其活性在脑缺血再灌注120h内的交替变化可能会影响脑水肿的发展。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 基质金属蛋白酶 脑水肿 强力霉素
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母体慢性铝暴露对子代鼠海马细胞内Ca^(2+)浓度及记忆行为的影响 被引量:13
10
作者 刘慧慧 孙洁 +5 位作者 邢伟 蔡葵 蔡原 赵卓 唐秋实 时利德 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期912-916,共5页
目的探讨母体于孕前、孕期和哺乳期不同浓度的铝暴露对子代大鼠实施LTP诱导后海马细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和记忆行为的影响。方法从孕前30d始至子代断乳止,对照组(control)与低剂量(用0.2%-Al表示)和高剂量(用0.4%-Al表示)暴露组的... 目的探讨母体于孕前、孕期和哺乳期不同浓度的铝暴露对子代大鼠实施LTP诱导后海马细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和记忆行为的影响。方法从孕前30d始至子代断乳止,对照组(control)与低剂量(用0.2%-Al表示)和高剂量(用0.4%-Al表示)暴露组的母代大鼠分别饮用蒸馏水和浓度为0.015mol·L-1(2g·L-1)、0.03mol·L-1(4g·L-1)的三氯化铝(AlCl3)水溶液;采用原子吸收石墨炉法测定子代鼠的脑铝及血铝含量;以Fura-2/AM为荧光指示剂,测定实施LTP诱导后海马神经元的[Ca2+]i;采用跳台法(即步下试验)测试子代鼠的记忆能力。结果①两暴露组大鼠的血铝和脑铝平均含量明显高于对照组(P<0.05及P<0.01);②与对照组相比,两暴露组海马神经元的[Ca2+]i降低,但0.2%-Al组的差异无显著性(P>0.05),而0.4%-Al组差异有显著性(P<0.01),且0.2%-Al组与0.4%-Al组间的差异亦有显著性(P<0.05);③与对照组相比,两暴露组大鼠步下试验行为测试中跳下平台的潜伏期明显缩短(P<0.01),5min内错误次数明显增加(P<0.01),且两暴露组间的差异亦具有显著性意义(P<0.01)。结论母体不同浓度的慢性铝暴露可损害子代大鼠的记忆能力,其可能的损害机制之一是母体的铝暴露导致海马神经元[Ca2+]i的降低。 展开更多
关键词 铝暴露 细胞内钙 步下试验 学习记忆 母体期
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七叶皂苷钠抗大鼠脑出血后脑水肿作用及其机制 被引量:27
11
作者 谢晓利 刘云会 薛一雪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期173-177,共5页
目的探讨七叶皂苷钠(10mg.kg-1.d-1)抗大鼠脑出血后脑水肿的作用及其机制。方法采用♂Wistar大鼠右侧基底核注入50μl自体全血的方法建立模型,并在模型建立后6,24,48或72h处死大鼠。应用干湿重法、酶学方法、免疫组化法和Western blot法... 目的探讨七叶皂苷钠(10mg.kg-1.d-1)抗大鼠脑出血后脑水肿的作用及其机制。方法采用♂Wistar大鼠右侧基底核注入50μl自体全血的方法建立模型,并在模型建立后6,24,48或72h处死大鼠。应用干湿重法、酶学方法、免疫组化法和Western blot法,测定各组大鼠脑组织含水量,Na+,K+含量,神经胶质原纤维蛋白(GFAP)阳性细胞和紧密连接相关蛋白occludin表达的变化。结果与假手术组比,模型组出血同侧脑组织含水量,Na+含量和GFAP阳性细胞均明显增加(P<0.05),K+含量和occludin的表达明显减少(P<0.05);与模型组比,治疗组出血同侧脑组织含水量,Na+含量和GFAP阳性细胞明显减少(P<0.05),K+含量和occludin的表达则明显增加(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可减轻和(或)延缓脑出血后脑水肿的发生,进而改善脑出血的预后。 展开更多
关键词 脑出血 脑水肿 OCCLUDIN 七叶皂苷钠
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出生前后铝暴露对大鼠学习记忆及海马NO、nNOS的影响 被引量:11
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作者 南娟 刘慧慧 +6 位作者 杜艳霞 邢伟 蔡葵 蔡原 刘鹏 刘玉丽 时利德 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1152-1155,共4页
目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露后年轻大鼠海马NO含量和nNOS表达的变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从孕期开始分别自由饮用蒸馏水15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用原子吸收石墨炉... 目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露后年轻大鼠海马NO含量和nNOS表达的变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从孕期开始分别自由饮用蒸馏水15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用原子吸收石墨炉法测定血铝和脑铝含量;跳台法测试学习记忆能力;硝酸还原酶法检测NO含量;免疫组化方法观察nNOS阳性细胞表达。结果与对照组相比,两铝暴露组大鼠血铝和脑铝含量明显升高,学习记忆能力明显下降,海马NO含量明显降低且nNOS阳性神经元表达明显减少。结论出生前后慢性铝暴露损害了大鼠的学习记忆行为,可能与海马NO含量减少及nNOS神经元表达降低有关。 展开更多
关键词 铝暴露 NO NNOS 学习记忆 出生前后
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CGRP和NGF对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马p53蛋白表达的影响 被引量:7
13
作者 郑广顺 高亮 +1 位作者 杨涌杰 方秀斌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期124-128,共5页
为了探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马p53蛋白表达的影响,用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,应用免疫组化和显微图像分析方法检测脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区p53蛋白的表达。结果... 为了探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马p53蛋白表达的影响,用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,应用免疫组化和显微图像分析方法检测脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区p53蛋白的表达。结果如下:假手术组海马CA1区未见p53阳性细胞,而脑缺血再灌注组阳性细胞明显增多。分别注射CGRP或NGF后海马CA1区p53阳性细胞平均灰度值均明显高于缺血再灌注组(P<0.05),二者联合应用时平均灰度值较单独应用高(P<0.05)。以上结果提示:CGRP和NGF下调缺血神经元p53蛋白的表达,二者合用作用更强,可能对缺血神经元的恢复有促进作用。 展开更多
关键词 局灶性脑缺血 大鼠 海马 P53蛋白 神经生长因子 降钙素基因相关肽 CGRP GF 基因表达
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NGF在哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中的表达 被引量:6
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作者 李东培 才丽平 +1 位作者 赵金茹 方秀斌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期333-336,T068,共5页
为了通过对神经生长因子和支气管肺泡灌洗液细胞在哮喘发病中的作用的研究进而探讨哮喘的神经免疫调节机制 ,本研究应用免疫组织化学方法研究了哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中神经生长因子的表达变化。结果发现 ,哮喘豚鼠神经生长因子... 为了通过对神经生长因子和支气管肺泡灌洗液细胞在哮喘发病中的作用的研究进而探讨哮喘的神经免疫调节机制 ,本研究应用免疫组织化学方法研究了哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中神经生长因子的表达变化。结果发现 ,哮喘豚鼠神经生长因子阳性嗜酸细胞和淋巴细胞百分率明显增加 ( P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;肺泡巨噬细胞绝对数量增加 ,神经生长因子表达也明显上调 ( P<0 .0 1) ,且呈 NGF阳性反应的小型肺泡巨噬细胞数量大大多于大型肺泡巨噬细胞。提示 。 展开更多
关键词 NGF 哮喘 豚鼠 支气管肺泡灌洗液 表达 嗜酸细胞 淋巴细胞 肺泡巨噬细胞
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白介素-1β在缓激肽开放血脑屏障过程中的作用及其机制 被引量:7
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作者 秦丽娟 薛一雪 +5 位作者 谷艳婷 张志勇 张田 孙娜 王东春 宋鸿艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期58-61,共4页
目的探讨白介素-1β(IL-1β)在缓激肽(BK)开放血脑屏障(BBB)过程中的作用及其机制。方法缓激肽处理C6细胞后,动态观察培养液中IL-1β含量(放射免疫法)、C6细胞内热休克因子1(HSF1)蛋白的表达(Western blot法)及IL-1β的mRNA水平(RT-PCR... 目的探讨白介素-1β(IL-1β)在缓激肽(BK)开放血脑屏障(BBB)过程中的作用及其机制。方法缓激肽处理C6细胞后,动态观察培养液中IL-1β含量(放射免疫法)、C6细胞内热休克因子1(HSF1)蛋白的表达(Western blot法)及IL-1β的mRNA水平(RT-PCR法)。利用伊文思蓝检测C6恶性胶质瘤大鼠经颈内动脉给予IL-1β及缓激肽后血脑屏障的通透性。结果缓激肽作用于C6细胞后,培养液中IL-1β的含量明显增加,于120 min含量最多,其后开始减少。C6细胞内HSF1的表达及IL-1β的mRNA水平也在给予缓激肽后明显增加,并分别于干预后的30 min和60 min达高峰后逐渐减少。缓激肽与IL-1β单独作用于C6动物后均可引起胶质瘤大鼠的血脑屏障通透性增加,且IL-1β对肿瘤模型动物血脑屏障通透性的影响与C6细胞培养液中IL-1β的含量相一致。结论 IL-1β可能介导了缓激肽开放血脑屏障的作用,此作用可能是由于缓激肽诱导C6细胞内HSF1的表达增加,增加的HSF1促进神经胶质瘤细胞释放IL-1β所致。 展开更多
关键词 白介素-1Β 热休克因子1 缓激肽 血脑屏障 血肿瘤屏障 胶质瘤
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低频超声体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究 被引量:7
16
作者 张震 杨松涛 +2 位作者 樊立林 刘云会 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-88,95,共3页
目的应用低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞,探讨低频超声对肿瘤细胞的影响。方法应用不同强度(10%~100%)的低频超声(1MHz,20s)作用于体外培养的C6细胞,采用MTT法检测光密度(OD)值,计算超声辐照后C6细胞的生长率,应用TUNEL法观察C6... 目的应用低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞,探讨低频超声对肿瘤细胞的影响。方法应用不同强度(10%~100%)的低频超声(1MHz,20s)作用于体外培养的C6细胞,采用MTT法检测光密度(OD)值,计算超声辐照后C6细胞的生长率,应用TUNEL法观察C6细胞的凋亡形态及计算细胞凋亡率。结果低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞后,在超声强度<50%范围内,随超声强度增加C6细胞的生长率显著下降,细胞形态出现核浓缩和核碎裂等凋亡改变,细胞凋亡率随超声辐照强度增加而增加;当超声强度>50%时,C6细胞的生长率和凋亡率不随超声强度增加而改变。C6胶质瘤细胞凋亡率与生长率显著负相关。结论低频超声辐照能够在体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 低频超声 诱导 C6细胞 凋亡
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阿尔茨海默病患者血尿酸水平的检测及意义 被引量:13
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作者 商秀丽 张凤英 +3 位作者 孟令慧 张蔚 林梅青 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期333-334,共2页
目的探讨血尿酸水平与阿尔茨海默病(AD)的关系。方法检测30例AD患者和30例健康对照者的血尿酸水平。结果AD组血尿酸水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。健康对照组男性的血尿酸水平明显高于女性(P<0.05),AD组男性的血... 目的探讨血尿酸水平与阿尔茨海默病(AD)的关系。方法检测30例AD患者和30例健康对照者的血尿酸水平。结果AD组血尿酸水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。健康对照组男性的血尿酸水平明显高于女性(P<0.05),AD组男性的血尿酸水平与女性比较无统计学意义(P>0.05)。结论血尿酸水平降低可能与AD的发病机制有关。 展开更多
关键词 血尿酸 阿尔茨海默病
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CGRP对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CREB和p-CREB的上调作用 被引量:6
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作者 张正洪 肖红菊 +2 位作者 席刚明 曲鹏 方秀斌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期28-31,共4页
目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CREB和磷酸化CREB(p-CREB)表达的影响。方法:用线栓法阻塞大鼠右大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检... 目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质CREB和磷酸化CREB(p-CREB)表达的影响。方法:用线栓法阻塞大鼠右大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检测大鼠手术侧顶叶皮质CREB和p-CREB表达。结果:缺血再灌注组大鼠顶叶皮质CREB表达少于假手术组,CGRP组大鼠顶叶皮质CREB表达多于缺血再灌注组(P<0.05)。假手术组右侧顶叶皮质p-CREB表达很少,缺血再灌注组顶叶皮质p-CREB表达多于假手术组,CGRP组p-CREB表达多于缺血再灌注组(P<0.05)。结论:CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠右侧顶叶皮质CREB和p-CREB的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能是通过上调神经元内CREB和p-CREB来实现的。 展开更多
关键词 脑缺血 降钙素基因相关肽 c—AMP反应元件结合蛋白 大鼠 顶叶
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NGF对哮喘豚鼠下呼吸道及内脏感觉传入部位IL-1β表达的影响 被引量:4
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作者 刘晓湘 曹德寿 +1 位作者 齐金萍 方秀斌 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期597-602,共6页
为探讨神经生长因子(NGF)在哮喘发病中的作用及其神经免疫调节机制,本研究应用免疫组织化学方法检测各组豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位白介素-1β(IL-1β)免疫反应的变化.用Western blot方法分别检测各组豚鼠肺、C7~T5段脊神经节和... 为探讨神经生长因子(NGF)在哮喘发病中的作用及其神经免疫调节机制,本研究应用免疫组织化学方法检测各组豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位白介素-1β(IL-1β)免疫反应的变化.用Western blot方法分别检测各组豚鼠肺、C7~T5段脊神经节和相应节段脊髓背角NGF和IL-1β的表达.用Luzex-F实时图像分析系统和凝胶成像分析系统分别对结果进行图像分析.免疫组织化学结果显示(染色反应强度用灰度值表示):生理盐水组与单纯致敏组豚鼠IL-1β阳性免疫反应产物的平均灰度值没有显著差异(P>0.05);与这两个对照组相比,哮喘豚鼠气道上皮、肺内炎性细胞、血管平滑肌内的神经末梢、C7~T5段脊神经节及相应节段脊髓背角内IL-1β阳性反应产物的平均灰度值均明显降低(P<0.01);在哮喘+NGF抗体组(鼻腔吸入NGF抗体),上述部位内IL-1β阳性反应产物的平均灰度值均明显高于哮喘组(P<0.01).Western blot结果显示:与生理盐水组和单纯致敏组比较,哮喘组豚鼠肺、C7~T5段脊神经节及相应节段脊髓样品中IL-1β或NGF目标带的IDV(integrated density value)与内参照IDV的比值均明显升高(P<0.01),而哮喘+NGF抗体组上述部位样品中IL-1β或NGF目标带的IDV与内参照IDV的比值均明显低于哮喘组(P<0.01),表明NGF可上调IL-1β的表达.这些结果提示NGF诱发IL-1β的表达可能是NGF参与哮喘发病的机制之一,NGF抗体抑制哮喘时下呼吸道和内脏感觉传入部位IL-1β的表达可能是治疗哮喘的新途径. 展开更多
关键词 白介素-1Β 神经生长因子 下呼吸道 脊神经节 脊髓背角 哮喘 豚鼠
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缓激肽开放血瘤屏障过程中诱发快速耐受性的机制探讨 被引量:7
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作者 秦丽娟 谷艳婷 薛一雪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1466-1470,共5页
目的探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响。方法首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型。模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10μg.kg-1.min-1,... 目的探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响。方法首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型。模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10μg.kg-1.min-1,动态观察肿瘤组织内热休克因子1(heatshockfactor1,HSF1)蛋白单体和三聚体的活性及热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)的表达(Westernblot法)。免疫组织化学技术检测血瘤屏障上紧密连接蛋白occludin的变化。利用伊文思蓝连续监测缓激肽处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血瘤屏障的通透性,同时电镜观察血瘤屏障的病理学改变。结果缓激肽作用于C6大鼠后,紧密连接增宽,血瘤屏障通透性增加,伊文思蓝渗出量分别较对照组增加了5.19μg.g-1(0min),5.06μg.g-1(5min),11.35μg.g-1(10min,P<0.05),21.54μg.g-1(15min,P<0.01),12.81μg.g-1(30min,P<0.05),7.28μg.g-1(60min)。肿瘤组织内HSF1蛋白三聚体活性和HSP70蛋白的表达逐渐增加,且分别于处理后的5min和30min时达高峰(P<0.01,与对照组相比),最大值为对照组的2~3倍。免疫组化检测结果发现,处理后的C6动物,其血瘤屏障的紧密连接蛋白occludin表达减少,15min后逐渐增加。结论缓激肽作用于血瘤屏障后,激活了HSF1并促进了hsp70蛋白的表达。增加的hsp70可能通过发挥分子伴侣作用来修复紧密连接蛋白,进而诱发快速耐受性。 展开更多
关键词 缓激肽 血瘤屏障 热休克蛋白70 热休克因子1
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