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m_1AChR-G_(11)融合蛋白的表达和功能的检测 被引量：3
1
作者 郭政东 王海波 +4 位作者 李智 刘洪瑞 于秀华 郭政礼 赵立斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1294-1298,共5页
目的　表达m1AChR G11融合蛋白 ,检测不同配体对m1AChR与G11间相互作用的影响。方法　两步PCR建立m1AChR G11重组cDNAs ,并在Baculovirus InfectedInsectcells(Sf9)细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m1AChR G11融合蛋... 目的　表达m1AChR G11融合蛋白 ,检测不同配体对m1AChR与G11间相互作用的影响。方法　两步PCR建立m1AChR G11重组cDNAs ,并在Baculovirus InfectedInsectcells(Sf9)细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m1AChR G11融合蛋白功能。结果　m1AChR G11融合蛋白的表达水平为 4 5 39± 2 2 6pmol·mg-1protein。不同配体的存在使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化。乙酰胆碱 ,卡巴胆碱 ,AF 10 2B ,Isopropamide ,R (+) hyoscyamine和阿托品存在以及无配体存在时 ,GDP的IC50 值分别是 131 82、6 1 6 6、2 8 18、3 2 4、6 0 2、5 2 5和 16 6 μmol·L-1。结论　Sf9细胞系统表达的m1AChR G11融合蛋白具备m受体配体结合的特性和组分间偶联功能。m1AChR G11融合蛋白对GDP的亲和性决定于m受体配体的性质 。 展开更多
关键词 融合蛋白 毒簟碱乙酰胆碱受体 G蛋白 放射配体 激动剂 拮抗剂
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