PTEN基因突变及mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的关系 被引量：18

1

作者 陈颖 郑华川 +4 位作者 杨雪飞 赵雨杰 侯伟健 汪桂兰 辛彦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期365-367,371,共4页

目的:研究抑癌基因PTEN突变和mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用PCR-SSCP方法检测正常卵巢(n=5)、上皮性卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)、卵巢癌(n=60)中PTEN外显子5的突变,采用RT-PCR检测这些组织中mRNA表达,比较PTE... 目的:研究抑癌基因PTEN突变和mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用PCR-SSCP方法检测正常卵巢(n=5)、上皮性卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)、卵巢癌(n=60)中PTEN外显子5的突变,采用RT-PCR检测这些组织中mRNA表达,比较PTEN基因突变和mRNA表达与卵巢癌临床病理特征的关系。结果:仅在上皮来源的卵巢癌中发现5例(7.1%)PTEN基因外显子5突变,PTEN基因mRNA在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中的表达水平低于正常卵巢和卵巢囊肿(P<0.05),PTEN基因mRNA表达与卵巢癌的临床病理分期呈负相关(P<0.05),而与组织分化程度呈正相关(P<0.05),PTEN基因mRNA表达在卵巢内膜样癌中表达最低,显著低于浆液性或粘液性卵巢囊腺癌(P<0.05)。结论:卵巢癌中存在PTEN基因外显子5突变及mRNA表达下调。PTEN基因mRNA表达下调与卵巢上皮性恶性肿瘤,特别是内膜样腺癌的发生和病理生物学行为关系密切。因此,PTEN基因有望作为反映卵巢癌病理生物学行为的客观分子指标。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 PTEN基因 突变 基因表达

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SARS冠状病毒基因组及其编码蛋白生物信息学分析 被引量：4

2

作者 赵雨杰 何群 +3 位作者 马佳明 王彤 吕昌龙 何钦成 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期193-195,共3页

目的 :理论分析严重急性呼吸道综合征 (SARS)冠状病毒基因组及其编码蛋白的分子生物学特征 ,为进一步研究SARS冠状病毒蛋白质功能提供信息资料。方法 :利用生物信息学序列对比分析软件、蛋白氨基酸序列分析软件及蛋白质结构预测软件对Ge... 目的 :理论分析严重急性呼吸道综合征 (SARS)冠状病毒基因组及其编码蛋白的分子生物学特征 ,为进一步研究SARS冠状病毒蛋白质功能提供信息资料。方法 :利用生物信息学序列对比分析软件、蛋白氨基酸序列分析软件及蛋白质结构预测软件对GenBank公布的SARS冠状病毒基因序列及其编码的蛋白氨基酸序列进行分析。结果 :SARS冠状病毒在基因结构上具有冠状病毒属的特征 ,而又与其他已知的冠状病毒编码序列存在明显的不同 ,与其他冠状病毒相比没有明显的基因重组、大片段插入或缺失的现象。来源于不同SARS冠状病毒株的基因序列变异速度较快。出现基因序列在不同区段同源性差异的现象。S蛋白氨基酸序列不存在与其他物种相同的连续性抗原决定簇序列。结论 :SARS冠状病毒与其他冠状病毒的变异程度基本相同。SARS冠状病毒可能是自然界已经存在或变异产生的新的病毒株。近期世界范围流行的SARS是同一来源的病原体引起的 ,认为S蛋白氨基酸序列是SARS冠状病毒的主要抗原。 展开更多

关键词 严重急性呼吸道综合征 冠状病毒 基因 编码蛋白

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构建新型细胞芯片的初步研究 被引量：4

3

作者 秦海明 赵雨杰 +2 位作者 侯伟建 吴广平 刘健 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期509-511,共3页

目的设计一种全新概念的细胞芯片。方法将CD3,CD4,CD8抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列,从全血中分离出的单个核细胞与之反应,形成选择性细胞群。将细胞芯片进行扫描电镜观察,台盼蓝染色,瑞氏染色,CD3Cy5+CD4-FITC+CD8RPE三色荧... 目的设计一种全新概念的细胞芯片。方法将CD3,CD4,CD8抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列,从全血中分离出的单个核细胞与之反应,形成选择性细胞群。将细胞芯片进行扫描电镜观察,台盼蓝染色,瑞氏染色,CD3Cy5+CD4-FITC+CD8RPE三色荧光染色并观察结果。结果电镜照片显示所结合淋巴细胞外形完整,细胞膜表面有呈皱折状突起,还可见散射状的细长毛状突起。台盼蓝染色显示活细胞数>95%;瑞氏染色细胞形态良好,杂交点边缘整齐,背景干净;荧光染色显示特异性良好。结论本实验能根据细胞表面不同的免疫标志进行细胞分群,可为以后制作大规模、高通量的细胞芯片做准备,并提出了全新意义的细胞芯片模型。 展开更多

关键词 细胞芯片 醛基玻片 CD抗体

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cDNA芯片在卵巢癌早诊及临床病理分期中的初步应用探讨 被引量：7

4

作者 陈颖 赵雨杰 辛彦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第23期1338-1341,共4页

目的:探讨PTEN,nm23H1,VEGF165,Tiam1,MMP-2,Timp2,HE4和S100A4基因在卵巢癌发生和侵袭中的作用。方法:采用cDNA芯片技术分别检测20例卵巢癌和5例正常卵巢组织中上述基因cDNA表达谱差异。结果:PTEN,Timp2和nm23H1cDNA在卵巢癌组织中表... 目的:探讨PTEN,nm23H1,VEGF165,Tiam1,MMP-2,Timp2,HE4和S100A4基因在卵巢癌发生和侵袭中的作用。方法:采用cDNA芯片技术分别检测20例卵巢癌和5例正常卵巢组织中上述基因cDNA表达谱差异。结果:PTEN,Timp2和nm23H1cDNA在卵巢癌组织中表达下调(CY-3/CY-5<0.5);Tiam1,VEGF165,MMP-2,HE4和S100A4cDNA在卵巢癌组织中表达上调(CY-3/CY-5>2.0);且HE4基因表达上调的最为明显(CY-3/CY-5>5.0)。表达下调和表达上调的上述基因与卵巢癌临床病理分期、组织分化程度关系密切(P<0.01)。结论:上述基因与卵巢癌发生及侵袭关系密切。cDNA基因芯片技术对于探讨卵巢癌分子机制,寻找卵巢癌分子标志物具有重要意义。 展开更多

关键词 基因 CDNA芯片 卵巢癌

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一种新的DNA芯片的封闭方法 被引量：6

5

作者 何群 赵雨杰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期361-363,共3页

提出了一种新的DNA芯片的封闭方法:1-碘丙烷封闭方法,并对1-碘丙烷和琥珀酸酐两种不同的封闭方法的封闭效果进行了比较实验,研究封闭试剂、封闭时间对氨基DNA芯片杂交结果所产生的影响。结果表明:1-碘丙烷封闭效果明显好于琥珀酸杆的封... 提出了一种新的DNA芯片的封闭方法:1-碘丙烷封闭方法,并对1-碘丙烷和琥珀酸酐两种不同的封闭方法的封闭效果进行了比较实验,研究封闭试剂、封闭时间对氨基DNA芯片杂交结果所产生的影响。结果表明:1-碘丙烷封闭效果明显好于琥珀酸杆的封闭效果,用1-碘丙烷封闭后的芯片进行杂交,芯片杂交信号强、背景噪声低,灵敏度高,整个封闭过程实验操作简单,时间短,1h即可达到所需效果。1-碘丙烷可以作为一种很好的DNA芯片封闭试剂。 展开更多

关键词 DNA芯片 封闭 1-碘丙烷 琥珀酸酐

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乙型肝炎病毒基因生物信息学分析及特异片段的制备 被引量：2

6

作者 徐晓雪 房凯 +4 位作者 钟连声 潘忠诚 李超 胥威 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期583-585,共3页

目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点... 目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型检测基因所需的模板DNA。 展开更多

关键词 重叠区扩增基因拼接法 乙型肝炎病毒 基因分型

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PCR法制备乙肝病毒基因芯片目标序列的探讨 被引量：2

7

作者 赵文瑾 何群 +1 位作者 张玉魁 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期318-319,共2页

比较对称与不对称PCR法制备的乙肝病毒基因芯片目标序列的杂交效果,并对不对称PCR法中上、下游引物浓度比例的最佳条件进行了探讨。

关键词 聚合酶链反应 乙肝基因芯片 目标序列

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乙肝病毒基因分型检测芯片的构建及初步应用 被引量：2

8

作者 赵文瑾 何群 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期395-397,共3页

目的:构建乙肝病毒(HBV)常见基因型的分型芯片,并应用分型芯片调查HBV基因型分布。方法:应用生物信息学软件针对乙肝病毒4种常见基因型的特征区域和保守区域分别设计分型探针和通用探针,在优化条件下通过重复杂交及分型测序检验芯片的... 目的:构建乙肝病毒(HBV)常见基因型的分型芯片,并应用分型芯片调查HBV基因型分布。方法:应用生物信息学软件针对乙肝病毒4种常见基因型的特征区域和保守区域分别设计分型探针和通用探针,在优化条件下通过重复杂交及分型测序检验芯片的重复性与可靠性后应用于临床,对150例不同类型的乙肝患者进行HBV基因分型。结果:分型探针和通用探针检测重现率分别为94.7%及100%,反馈的测序结果与芯片分型结果完全一致;经芯片分型发现辽宁省HBV基因型分别为C型占68.7%,B型占22.7%,B、C混合型占8.7%,未发现A、D型。结论:基因芯片技术为乙肝病毒基因分型提供了快速准确的检测方法,辽宁地区HBV基因型分布以B、C两型为主,C型占主要优势。 展开更多

关键词 基因芯片 乙肝病毒 基因分型

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应用凝集素芯片检测非小细胞肺癌细胞膜表面糖链表达 被引量：1

9

作者 李春辉 何群 +4 位作者 潘忠诚 王天骄 张玉魁 李超 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期481-483,共3页

目的应用凝集素芯片检测非小细胞肺癌细胞系A549和H460细胞膜表面糖链表达类型。方法用胶原酶Ⅱ消化非小细胞肺癌细胞系,对提取的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖链表达。结果腺癌A... 目的应用凝集素芯片检测非小细胞肺癌细胞系A549和H460细胞膜表面糖链表达类型。方法用胶原酶Ⅱ消化非小细胞肺癌细胞系,对提取的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖链表达。结果腺癌A549和大细胞肺癌H460除LTL和DBA这两个凝集素位点没有捕获到细胞外,其余各点均捕获到细胞。结论根据凝集素的亲和特异性表明,非小细胞肺癌细胞膜表面糖链类型主要有:唾液酸、乙酰葡萄糖、乙酰半乳糖、甘露糖和半乳糖糖链,为建立癌症细胞膜表面糖链表达谱和寻找肺癌分子靶向治疗的药物作用位点提供理论依据。 展开更多

关键词 凝集素芯片 特异性 非小细胞肺癌细胞 糖链表达

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寡核苷酸醛基芯片点样条件的优化 被引量：1

10

作者 何群 侯伟健 +3 位作者 潘忠诚 王天骄 马佳明 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期190-191,共2页

对点样探针的浓度、探针缓冲液的浓度及pH值对醛基玻片探针固定效果的影响进行了探讨 ,实验结果表明 :pH =9、探针浓度为 2 0 0mmol/L时 ,探针固定效果较好 ,所制备的芯片的灵敏度高。

关键词 寡核苷酸芯片 探针固定 醛基玻片

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SARS冠状病毒M蛋白的生物信息学研究 被引量：2

11

作者 刘树春 赵雨杰 张学 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期1-4,共4页

针对GenBank上发布的来自不同国家地区的 39条SARSCoV推测M蛋白 ,采用生物信息学软件分析其核酸和氨基酸序列 ,获得其分子生物学特征 ,确定突变位点 ,预测功能结构区、Motif及抗原决定簇 ,比较基因突变对这些功能结构的影响。结果表明 :... 针对GenBank上发布的来自不同国家地区的 39条SARSCoV推测M蛋白 ,采用生物信息学软件分析其核酸和氨基酸序列 ,获得其分子生物学特征 ,确定突变位点 ,预测功能结构区、Motif及抗原决定簇 ,比较基因突变对这些功能结构的影响。结果表明 :在 39个病毒株M蛋白的 6 6 6bp中 ,共有 18个病毒株在 7个位点上发生了 2 5次变异。在M蛋白序列上预测获得 3个跨膜螺旋序列和一个可能的信号肽序列。氨基酸序列的变异主要发生在其跨膜和胞外区域 ,胞内区域相对较少。预测发现 12个Motif和 7个抗原决定簇。提示突变对M蛋白的结构功能区的影响不大 ,也未造成M蛋白的Motif的数量和构成发生改变。对抗原决定簇的影响也主要体现在序列成分构成的改变上 ,在设计疫苗时 ,应考虑由其导致的抗原特性改变。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 SARS冠状病毒 膜蛋白 生物信息学

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应用凝集素芯片检测兔组织细胞膜表面糖谱 被引量：1

12

作者 何群 张艳 +4 位作者 宋春阳 潘忠诚 王天骄 张玉魁 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-4,共4页

目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面... 目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面糖链类型不同:肝细胞特异亲和的凝集素为LTL,脾细胞为SNA和WGA,3种组织细胞共有DSL、MAL、AAL、STL。结论肝细胞膜表面特有糖链为L-岩藻糖,脾细胞特有糖链为唾液酸,使用凝集素芯片检测细胞膜表面的糖链特异性为建立各种细胞膜表面糖谱提供依据。 展开更多

关键词 凝集素 糖组学 细胞膜

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泌尿生殖道主要病原体检测基因芯片的构建

13

作者 王继春 蒋志云 +3 位作者 刘瑞霞 王天骄 卢永平 赵雨杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期36-40,共5页

为构建可同时检测单一样品中多种病原体的复合基因芯片,检索相关细菌的16S～23SrRNA间区基因序列,应用生物信息学软件针对不同细菌的共同序列和特异序列,设计通用引物和特异寡核苷酸探针并制成基因芯片。利用芯片对临床泌尿生殖道分泌... 为构建可同时检测单一样品中多种病原体的复合基因芯片,检索相关细菌的16S～23SrRNA间区基因序列,应用生物信息学软件针对不同细菌的共同序列和特异序列,设计通用引物和特异寡核苷酸探针并制成基因芯片。利用芯片对临床泌尿生殖道分泌物样本进行病原菌检测。80例样本中96%芯片检测结果与门诊回复结果符合,反馈的测序结果经BLAST软件对比分析,与其芯片检测结果一致。该泌尿生殖道病原体检测基因芯片设计合理,检测结果具有较好的重复性和可靠性。 展开更多

关键词 基因芯片 非淋菌性尿道炎 病原体 检测 杂交

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细胞芯片技术在急性白血病免疫分型中的应用 被引量：1

14

作者 李冬梅 赵雨杰 +2 位作者 侯伟健 吴广平 杨华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期725-727,共3页

目的:通过构建一种新型的细胞芯片,对急性白血病患者的外周血进行免疫分型,从而快速诊断白血病的类型。方法:将单克隆抗体点在醛基玻片上,细胞悬液滴于芯片,那些有相应CD抗原的细胞只能与相应的单克隆抗体的点结合,经荧光染色、扫描,还... 目的:通过构建一种新型的细胞芯片,对急性白血病患者的外周血进行免疫分型,从而快速诊断白血病的类型。方法:将单克隆抗体点在醛基玻片上,细胞悬液滴于芯片,那些有相应CD抗原的细胞只能与相应的单克隆抗体的点结合,经荧光染色、扫描,还可进行Wright′s染色。结果:25例AML的患者在芯片上均表达髓系的抗原:CD13,CD15,CD33;M4,M5表达CD14,M3不表达HLA-DR。5例ALL患者中2例表达B-ALL:CD10,CD19;3例T-ALL表达:CD5,CD7。结论:通过对细胞芯片的扫描实现了高通量的分析,其结果也可以通过普通显微镜观察。细胞芯片是一种快速、简便、低成本的技术,会得到广泛的应用。 展开更多

关键词 细胞芯片 单克隆抗体 免疫分型 急性白血病

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应用免疫组化法验证细胞芯片的特异性 被引量：1

15

作者 胥威 赵雨杰 +4 位作者 卢永平 宋瑾 陈亚男 李春丽 徐晓雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期491-493,共3页

目的研究适用于芯片捕获细胞的最佳免疫组化方法,并用其验证细胞芯片的特异性。方法CD7、CD13、CD19抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列的芯片,从外周血中分离全白细胞,芯片上孵育后,细胞芯片捕获的细胞固定,S-P法进行免疫组化及苏... 目的研究适用于芯片捕获细胞的最佳免疫组化方法,并用其验证细胞芯片的特异性。方法CD7、CD13、CD19抗体固定于醛基玻片上,形成3×3阵列的芯片,从外周血中分离全白细胞,芯片上孵育后,细胞芯片捕获的细胞固定,S-P法进行免疫组化及苏木素复染,显微镜下观察和计数。结果乙醇∶甲醛∶水(AF液)固定胞内外抗原染色阳性率、阳性程度高,阳性细胞形态较好;芯片上免疫组化所用抗体最佳浓度为1μg/ml,最佳孵育条件为室温,1h;芯片上阳性细胞胞浆或胞膜有棕色颗粒,阴性抗体点细胞无此表现;细胞芯片的特异性结合阳性率在96.7%以上,非特异性结合阳性率在0.8%以下。结论本实验方法能将细胞芯片捕获细胞的胞内及胞浆抗原直观稳定表达出来,设计出了细胞芯片上免疫组化方法,同时验证了细胞芯片的特异性。 展开更多

关键词 细胞芯片 免疫组化 CD抗体

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临床常见致病菌快速诊断用芯片的初步构建

16

作者 康素明 潘忠诚 +3 位作者 张玉魁 何群 马佳明 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期299-300,303,共3页

目的:构建针对21种常见致病菌的快速诊断用芯片。方法:针对细菌的高度保守区域设计特异探针,优化条件下与细菌的PCR扩增产物进行杂交。结果:得到特异的杂交结果。结论:芯片方法可用于快速鉴别不同种类的细菌,该方法简便可行,优于传统诊... 目的:构建针对21种常见致病菌的快速诊断用芯片。方法:针对细菌的高度保守区域设计特异探针,优化条件下与细菌的PCR扩增产物进行杂交。结果:得到特异的杂交结果。结论:芯片方法可用于快速鉴别不同种类的细菌,该方法简便可行,优于传统诊断方法。 展开更多

关键词 常见致病菌 诊断芯片

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16种常见致病菌16S rRNA区域进化树的建立 被引量：6

17

作者 康素明 潘忠诚 +3 位作者 张玉魁 何群 马佳明 赵雨杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期208-209,222,共3页

目的:通过建立16种常见致病菌的进化树,了解细菌之间的进化关系,为设计其诊断用芯片的特异探针提供理论基础。方法:常规方法提取细菌DNA,PCR对称扩增后进行DNA测序,利用BLAST和ClustalW程序分析测序结果并建立进化树。结果:20种细菌中,1... 目的:通过建立16种常见致病菌的进化树,了解细菌之间的进化关系,为设计其诊断用芯片的特异探针提供理论基础。方法:常规方法提取细菌DNA,PCR对称扩增后进行DNA测序,利用BLAST和ClustalW程序分析测序结果并建立进化树。结果:20种细菌中,16种成功扩增出PCR产物,得到了理想的测序结果,同时建立了这16种细菌的进化树。结论:根据进化树所示,可以设计不同细菌的特异诊断用探针,利用芯片快速鉴定细菌。 展开更多

关键词 细菌 进化树 诊断芯片

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一种快速DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染干胶技术 被引量：10

18

作者 张玉魁 潘忠诚 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期308-309,共2页

介绍快速、高效、高分辨率的DNA聚丙烯酰胺电泳、银染及干胶技术 ,采用本文介绍的配比灌制胶 ,浓缩效果和分离效果十分理想 ,无横向扩散 ;染色温度提高 ,缩短了银染的时间 ;

关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 DNA分离 纯化

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肺孢子虫(菌)p55抗原嵌合基因的克隆及表达产物分析 被引量：1

19

作者 王雪莲 栾和芝 +2 位作者 刘彤 赵雨杰 安春丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期774-777,786,共5页

目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则... 目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则及大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,将氨基酸序列转化为核苷酸序列,将人工合成的嵌合基因(CAG)片段连接到质粒pGEX-6p-1(含GST标签)上,构建原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,酶切、测序鉴定。pGEX-6p-1/CAG转化大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白CAG-GST。表达产物用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western-blotting分析鉴定。结果双酶切及测序结果显示重组质粒pGEX-6p-1/CAG构建成功。SDS-PAGE显示重组融合蛋白相对分子量约为69 000。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白为CAG-GST。结论成功构建表达p55蛋白嵌合基因的原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,建立表达重组蛋白的原核表达系统。 展开更多

关键词 肺孢子菌 p55蛋白 嵌合基因 重组融合蛋白

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辽宁地区Huntington舞蹈病两家系IT15基因的分子分析 被引量：1

20

作者 赵育海 丛琳 +3 位作者 潘钰 宋芷珩 赵雨杰 张朝东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期355-357,共3页

目的 :从分子水平探讨辽宁地区Huntington舞蹈病 (HD)的发病机制 ,为该病的基因诊断和遗传咨询提供科学依据。方法 :应用PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对辽宁地区两个HD家系的 3名患者、4名高风险成员及 2名正常配偶IT15基因的CAG重... 目的 :从分子水平探讨辽宁地区Huntington舞蹈病 (HD)的发病机制 ,为该病的基因诊断和遗传咨询提供科学依据。方法 :应用PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对辽宁地区两个HD家系的 3名患者、4名高风险成员及 2名正常配偶IT15基因的CAG重复数进行了检测。结果 :所有的HD患者都各携带有一个CAG重复序列发生扩展的IT15基因 ,其重复数为 4 9～ 6 2 ,而正常人的重复数为 17～ 35 ,两者不重叠。结论 展开更多

关键词 HUNTINGTON舞蹈病 基因 CAG重复 多聚酶链反应

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