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晶状体自发肿瘤转基因鼠脑横截面标本制备及鉴定
被引量：
4
1
作者
王建平
张梅英
+2 位作者
勾文峰
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期673-675,共3页
目的确定JCV T抗原诱发晶状体肿瘤转基因鼠脑中肿瘤来源及路径。方法 18月龄转基因鼠麻醉后4%多聚甲醛灌流固定,EDTA脱钙颅骨软化后脑经横截制备石蜡标本并进行HE染色。免疫组化和免疫荧光确定脑组织T抗原表达。结果经过脱钙处理后颅骨...
目的确定JCV T抗原诱发晶状体肿瘤转基因鼠脑中肿瘤来源及路径。方法 18月龄转基因鼠麻醉后4%多聚甲醛灌流固定,EDTA脱钙颅骨软化后脑经横截制备石蜡标本并进行HE染色。免疫组化和免疫荧光确定脑组织T抗原表达。结果经过脱钙处理后颅骨组织非常软,横截后发现白色肿瘤组织蔓延至脑组织中,HE染色确定眼部和脑部白色组织均为晶状体肿瘤细胞,免疫组化和免疫荧光结果显示细胞核中存在T抗原强阳性表达。结论 JCV T抗原诱发晶状体肿瘤是经过视神经孔进入脑组织,鼠头横截面组织标本制备对研究头部肿瘤的毗邻关系和肿瘤组织在脑组织中侵袭部位极具应用价值。
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关键词
转基因鼠
晶状体自发肿瘤
头横截面
免疫组化
T抗原
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职称材料
5味中药对体外培养原代人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响
被引量：
2
2
作者
于爽
武昕
+1 位作者
姜英
赵向宇
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期865-869,共5页
目的利用原代培养的人外阴正常皮肤成纤维细胞,观察中药对人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法胰蛋白酶消化、分离及培养人外阴皮肤成纤维细胞;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染...
目的利用原代培养的人外阴正常皮肤成纤维细胞,观察中药对人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法胰蛋白酶消化、分离及培养人外阴皮肤成纤维细胞;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;测定细胞生长曲线;MTT法测定莪术、黄芪、丹参、川穹及当归5种中药作用后细胞增殖能力。结果生长曲线测定结果显示:传6代内以及传6代内复苏人外阴皮肤成纤维细胞增殖能力均很强。MTT检测结果显示:5种药物在特定浓度范围内均能抑制人外阴皮肤成纤维细胞的增殖。分别作用于人外阴皮肤成纤维细胞72 h后,莪术5、10、100 mg/L浓度组,黄芪500、1 000 mg/L浓度组,丹参1 000 mg/L浓度组,川穹500、1 000 mg/L浓度组,当归100、500、1 000 mg/L浓度组均显示抑制增殖作用,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其中莪术和川穹的抑制强度呈剂量依赖性。结论成功建立了体外人外阴皮肤成纤维细胞原代培养及鉴定方法;特定浓度范围内的莪术、黄芪、丹参、川穹和当归能够抑制人外阴皮肤成纤维细胞的体外增殖。
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关键词
成纤维细胞
细胞增殖
中药
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职称材料
地高辛标记核酸病理形态学检测方法的建立及应用
3
作者
杨雪
勾文峰
+3 位作者
丁蕾
肖丽君
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期977-980,共4页
目的建立地高辛标记原位杂交(ISH)和原位PCR(ISP)方法,探讨其在病理形态学检测中的应用。方法以细胞cDNA或质粒DNA为模板制备地高辛探针,ISH检测肺癌、胃癌或结直肠癌切片上JCV T抗原DNA、beclin 1和SERCA3 mRNA表达水平。在肺癌和胃癌...
目的建立地高辛标记原位杂交(ISH)和原位PCR(ISP)方法,探讨其在病理形态学检测中的应用。方法以细胞cDNA或质粒DNA为模板制备地高辛探针,ISH检测肺癌、胃癌或结直肠癌切片上JCV T抗原DNA、beclin 1和SERCA3 mRNA表达水平。在肺癌和胃癌切片上扩增地高辛标记的JCV T抗原DNA。杂交或标记后,进行抗地高辛碱性磷酸酶反应并行NBT/BCIP或Fuchsin显色。结果 PCR扩增获得高纯度地高辛标记DNA探针,甲酰胺杂交液杂交显示JCV T抗原存在于JCI细胞的细胞核中,beclin 1和SERCA3 mRNA阳性信号见于结肠癌和癌旁黏膜上皮细胞质中。ISP扩增了地高辛标记的JCV T抗原DNA,显色后发现JCV T抗原主要定位在JCI细胞、肺泡上皮细胞和肺癌细胞核、胃癌及癌旁黏膜细胞核中。NBT/BCIP显色比Fuchsin显色更为敏感,甲基绿复染使得上述2种显色更加清晰。结论地高辛标记的ISH和ISP操作简便,敏感度高,NBT/BCIP显色和甲基绿复染图像美观。
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关键词
原位杂交
原位PCR
核酸
病理形态学检测
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职称材料
题名
晶状体自发肿瘤转基因鼠脑横截面标本制备及鉴定
被引量：
4
1
作者
王建平
张梅英
勾文峰
高野康雄
郑华川
机构
中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室
中国医科大学
实验动物中心
日本神奈川县立癌中心临床
研究
所
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期673-675,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(81172371)
教育部归国人员科研启动基金(2009-03)
+2 种基金
人事部留学人员科技活动择优资助项目(2008-01)
沈阳人才资源开发基金
沈阳市科技攻关项目
文摘
目的确定JCV T抗原诱发晶状体肿瘤转基因鼠脑中肿瘤来源及路径。方法 18月龄转基因鼠麻醉后4%多聚甲醛灌流固定,EDTA脱钙颅骨软化后脑经横截制备石蜡标本并进行HE染色。免疫组化和免疫荧光确定脑组织T抗原表达。结果经过脱钙处理后颅骨组织非常软,横截后发现白色肿瘤组织蔓延至脑组织中,HE染色确定眼部和脑部白色组织均为晶状体肿瘤细胞,免疫组化和免疫荧光结果显示细胞核中存在T抗原强阳性表达。结论 JCV T抗原诱发晶状体肿瘤是经过视神经孔进入脑组织,鼠头横截面组织标本制备对研究头部肿瘤的毗邻关系和肿瘤组织在脑组织中侵袭部位极具应用价值。
关键词
转基因鼠
晶状体自发肿瘤
头横截面
免疫组化
T抗原
Keywords
transgenie mouse
spontaneous lens tumor
longitudinal section of the head
immunohistochemistry
T antigen
分类号
R739.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
5味中药对体外培养原代人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响
被引量：
2
2
作者
于爽
武昕
姜英
赵向宇
机构
中国医科大学
附属第一医院中心实验室
中国医科大学
附属第一医院妇科
中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期865-869,共5页
基金
国家自然科学基金(30973190)
文摘
目的利用原代培养的人外阴正常皮肤成纤维细胞,观察中药对人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法胰蛋白酶消化、分离及培养人外阴皮肤成纤维细胞;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;测定细胞生长曲线;MTT法测定莪术、黄芪、丹参、川穹及当归5种中药作用后细胞增殖能力。结果生长曲线测定结果显示:传6代内以及传6代内复苏人外阴皮肤成纤维细胞增殖能力均很强。MTT检测结果显示:5种药物在特定浓度范围内均能抑制人外阴皮肤成纤维细胞的增殖。分别作用于人外阴皮肤成纤维细胞72 h后,莪术5、10、100 mg/L浓度组,黄芪500、1 000 mg/L浓度组,丹参1 000 mg/L浓度组,川穹500、1 000 mg/L浓度组,当归100、500、1 000 mg/L浓度组均显示抑制增殖作用,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其中莪术和川穹的抑制强度呈剂量依赖性。结论成功建立了体外人外阴皮肤成纤维细胞原代培养及鉴定方法;特定浓度范围内的莪术、黄芪、丹参、川穹和当归能够抑制人外阴皮肤成纤维细胞的体外增殖。
关键词
成纤维细胞
细胞增殖
中药
Keywords
fibroblast
cell proliferation
traditional Chinese medicine
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
地高辛标记核酸病理形态学检测方法的建立及应用
3
作者
杨雪
勾文峰
丁蕾
肖丽君
高野康雄
郑华川
机构
中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室
解放军
承德
医学院
基础
部免疫教研室
日本神奈川县立癌中心临床
研究
所
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期977-980,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81172371)
教育部归国人员科研启动基金资助项目(2009-03)
+1 种基金
沈阳市科技攻关项目(F11-264-1-10
F12-277-1-01)
文摘
目的建立地高辛标记原位杂交(ISH)和原位PCR(ISP)方法,探讨其在病理形态学检测中的应用。方法以细胞cDNA或质粒DNA为模板制备地高辛探针,ISH检测肺癌、胃癌或结直肠癌切片上JCV T抗原DNA、beclin 1和SERCA3 mRNA表达水平。在肺癌和胃癌切片上扩增地高辛标记的JCV T抗原DNA。杂交或标记后,进行抗地高辛碱性磷酸酶反应并行NBT/BCIP或Fuchsin显色。结果 PCR扩增获得高纯度地高辛标记DNA探针,甲酰胺杂交液杂交显示JCV T抗原存在于JCI细胞的细胞核中,beclin 1和SERCA3 mRNA阳性信号见于结肠癌和癌旁黏膜上皮细胞质中。ISP扩增了地高辛标记的JCV T抗原DNA,显色后发现JCV T抗原主要定位在JCI细胞、肺泡上皮细胞和肺癌细胞核、胃癌及癌旁黏膜细胞核中。NBT/BCIP显色比Fuchsin显色更为敏感,甲基绿复染使得上述2种显色更加清晰。结论地高辛标记的ISH和ISP操作简便,敏感度高,NBT/BCIP显色和甲基绿复染图像美观。
关键词
原位杂交
原位PCR
核酸
病理形态学检测
Keywords
in situ hybridization
in situ PCR
nucleic acid
pathomorphological examination
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
晶状体自发肿瘤转基因鼠脑横截面标本制备及鉴定
王建平
张梅英
勾文峰
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
5味中药对体外培养原代人外阴皮肤成纤维细胞增殖的影响
于爽
武昕
姜英
赵向宇
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
地高辛标记核酸病理形态学检测方法的建立及应用
杨雪
勾文峰
丁蕾
肖丽君
高野康雄
郑华川
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
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