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应用m_5AChR-G_(11α)融合蛋白鉴别M_5受体亚型的特异性药物
被引量：
2
1
作者
刘洪瑞
郭政东
+2 位作者
韩雪松
王海波
李智
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期917-921,共5页
目的采用Sf9细胞系统表达m5AChRG11α融合蛋白,通过检测GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力大小来鉴别m5AChR的特异性激动剂和拮抗剂。方法用两步PCR反应重组m5AChRG11α融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达m5ACh...
目的采用Sf9细胞系统表达m5AChRG11α融合蛋白,通过检测GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力大小来鉴别m5AChR的特异性激动剂和拮抗剂。方法用两步PCR反应重组m5AChRG11α融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达m5AChR受体蛋白和m5AChRG11α融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力。结果m5AChRG11α融合蛋白表达水平是(47.6±3.2)nmol·g-1膜蛋白。不同配体的存在使融合蛋白中G11α与GDP的亲和力发生变化。ACh、YM796、Oxotremorine、Methixene、Dextimide及atropine存在以及无配体存在时,GDP的IC50值分别是128.0,72.1,68.5,16.2,14.9,9.7和20.8μmol·L-1。结论Sf9细胞系统表达的m5AChRG11α融合蛋白具备M受体配体结合的特性和组分间偶联功能。m5AChRG11α融合蛋白对GDP的亲和性决定于M受体配体的性质。对于m5AChRG11α融合蛋白,ACh是m5AChR完全激动剂,YM796和Oxotremorine是部分激动剂;atropine,Methixene和Dextimide是拮抗剂。
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关键词
毒蕈碱乙酰胆碱受体
G蛋白
融合蛋白
激动剂
拮抗剂
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职称材料
滨蒿内酯对哮喘豚鼠气管平滑肌细胞RyR2 mRNA表达影响
被引量：
5
2
作者
柳春
王艳杰
+2 位作者
藤赞
于秀华
李智
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期56-59,共4页
研究哮喘豚鼠气管平滑肌细胞Ryanodine受体亚型的变化及滨蒿内酯对其的影响。将动物分为3组:正常组、哮喘组和滨蒿内酯组,采用卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘模型,滨蒿内酯组雾化吸入滨蒿内酯。应用RT-PCR鉴定豚鼠气管平滑肌细胞(TSMC)中RyR亚...
研究哮喘豚鼠气管平滑肌细胞Ryanodine受体亚型的变化及滨蒿内酯对其的影响。将动物分为3组:正常组、哮喘组和滨蒿内酯组,采用卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘模型,滨蒿内酯组雾化吸入滨蒿内酯。应用RT-PCR鉴定豚鼠气管平滑肌细胞(TSMC)中RyR亚型分布并观察各组豚鼠气管平滑肌细胞RyR2 mRNA表达的变化。豚鼠TSMC表达RyR2和RyR3两个亚型;哮喘时豚鼠TSMC中RyR2 mRNA表达量(以RyR2区带与-βactin区带的密度百分比表示)为47.15%±15.30%,明显低于对照组(77.12%±6.16%)(P<0.01);滨蒿内酯组豚鼠TSMC中RyR2 mRNA量为63.77%±9.09%,较哮喘组增强(P<0.05)。豚鼠TSMC表达RyR2和RyR3两个亚型;哮喘时TSMC RyR2 mRNA表达下调;滨蒿内酯可使哮喘豚鼠TSMC RyR2表达水平得以恢复。
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关键词
滨篙内酯
哮喘
动物模型
内钙释放
RYR
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职称材料
题名
应用m_5AChR-G_(11α)融合蛋白鉴别M_5受体亚型的特异性药物
被引量：
2
1
作者
刘洪瑞
郭政东
韩雪松
王海波
李智
机构
中国医科大学基础医学院天然药物研究室
中国医科大学
基础
医学院
药理学教研室
中国医科大学
基础
医学院
病理生理学教研室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期917-921,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No30171077)
文摘
目的采用Sf9细胞系统表达m5AChRG11α融合蛋白,通过检测GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力大小来鉴别m5AChR的特异性激动剂和拮抗剂。方法用两步PCR反应重组m5AChRG11α融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达m5AChR受体蛋白和m5AChRG11α融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力。结果m5AChRG11α融合蛋白表达水平是(47.6±3.2)nmol·g-1膜蛋白。不同配体的存在使融合蛋白中G11α与GDP的亲和力发生变化。ACh、YM796、Oxotremorine、Methixene、Dextimide及atropine存在以及无配体存在时,GDP的IC50值分别是128.0,72.1,68.5,16.2,14.9,9.7和20.8μmol·L-1。结论Sf9细胞系统表达的m5AChRG11α融合蛋白具备M受体配体结合的特性和组分间偶联功能。m5AChRG11α融合蛋白对GDP的亲和性决定于M受体配体的性质。对于m5AChRG11α融合蛋白,ACh是m5AChR完全激动剂,YM796和Oxotremorine是部分激动剂;atropine,Methixene和Dextimide是拮抗剂。
关键词
毒蕈碱乙酰胆碱受体
G蛋白
融合蛋白
激动剂
拮抗剂
Keywords
musearinie aeetyleholine receptor
G protein
fusion protein
agonist
antagonist
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R341.3 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
滨蒿内酯对哮喘豚鼠气管平滑肌细胞RyR2 mRNA表达影响
被引量：
5
2
作者
柳春
王艳杰
藤赞
于秀华
李智
机构
辽宁中
医学院
基础
医学院
生物化学教研室
中国医科大学基础医学院天然药物研究室
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期56-59,共4页
文摘
研究哮喘豚鼠气管平滑肌细胞Ryanodine受体亚型的变化及滨蒿内酯对其的影响。将动物分为3组:正常组、哮喘组和滨蒿内酯组,采用卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘模型,滨蒿内酯组雾化吸入滨蒿内酯。应用RT-PCR鉴定豚鼠气管平滑肌细胞(TSMC)中RyR亚型分布并观察各组豚鼠气管平滑肌细胞RyR2 mRNA表达的变化。豚鼠TSMC表达RyR2和RyR3两个亚型;哮喘时豚鼠TSMC中RyR2 mRNA表达量(以RyR2区带与-βactin区带的密度百分比表示)为47.15%±15.30%,明显低于对照组(77.12%±6.16%)(P<0.01);滨蒿内酯组豚鼠TSMC中RyR2 mRNA量为63.77%±9.09%,较哮喘组增强(P<0.05)。豚鼠TSMC表达RyR2和RyR3两个亚型;哮喘时TSMC RyR2 mRNA表达下调;滨蒿内酯可使哮喘豚鼠TSMC RyR2表达水平得以恢复。
关键词
滨篙内酯
哮喘
动物模型
内钙释放
RYR
Keywords
scoparone
asthma
animal model
intracellular calcium release
RyR
分类号
R562.2 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用m_5AChR-G_(11α)融合蛋白鉴别M_5受体亚型的特异性药物
刘洪瑞
郭政东
韩雪松
王海波
李智
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
滨蒿内酯对哮喘豚鼠气管平滑肌细胞RyR2 mRNA表达影响
柳春
王艳杰
藤赞
于秀华
李智
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2006
5
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职称材料
已选择
0
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