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心肌缺血再灌注损伤肌浆网钙泵活性变化电镜酶细胞化学研究 被引量:6
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作者 谷天祥 师恩袆 +4 位作者 石玉秀 姜桂娥 张玉霞 王天骄 李厚文 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期344-346,共3页
目的 :研究心肌缺血再灌注损伤肌浆网、肌膜钙泵 (Ca2 + ATPase)功能变化。方法 :采用大鼠离体心脏模型应用电镜酶细胞化学及生化技术 ,研究缺血再灌注心肌肌浆网、细胞膜原位钙泵分布及活性变化。结果 :心肌细胞钙泵以高电子密度颗粒... 目的 :研究心肌缺血再灌注损伤肌浆网、肌膜钙泵 (Ca2 + ATPase)功能变化。方法 :采用大鼠离体心脏模型应用电镜酶细胞化学及生化技术 ,研究缺血再灌注心肌肌浆网、细胞膜原位钙泵分布及活性变化。结果 :心肌细胞钙泵以高电子密度颗粒主要分布于肌浆网、肌膜等膜结构 ,缺血 30min钙泵反应产物显著减少 ,再灌注 30min及 6 0min酶进一步减少或缺失。生化钙泵活性测定显示心肌缺血 30min时为 (0 .0 48± 0 .0 10 ) μmol/mg·h-1,再灌注 6 0min为 (0 .0 6 9± 0 .0 18) μmol/mg·h-1,酶活性较对照组显著降低 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :本研究揭示钙泵活性降低发生在心肌缺血期 ,钙泵功能抑制是心肌缺血再灌注损伤的重要环节 ,是亚细胞Ca2 + 展开更多
关键词 心肌缺血 钙泵 电镜酶细胞化学 再灌注损伤
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急、慢性铅中毒对海马CA1区长时程增强和活化的细胞外信号调节激酶2影响 被引量:14
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作者 杨菁 孙黎光 +4 位作者 蔡葵 宗志宏 邢伟 刘素媛 刘宁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期66-70,共5页
目的 探讨急、慢性铅中毒对大鼠海马活化的细胞外信号调节激酶 2 (ERK2 )含量的影响及其与海马CA1区长时程增强 (LTP)的关系。方法 大鼠怀孕后分别饮用蒸馏水或 0 .2 %醋酸铅溶液 ,断乳后鼠仔则直接饮用 ,于 30d后测定LTP ,并取海马... 目的 探讨急、慢性铅中毒对大鼠海马活化的细胞外信号调节激酶 2 (ERK2 )含量的影响及其与海马CA1区长时程增强 (LTP)的关系。方法 大鼠怀孕后分别饮用蒸馏水或 0 .2 %醋酸铅溶液 ,断乳后鼠仔则直接饮用 ,于 30d后测定LTP ,并取海马作为慢性铅中毒标本测定ERK2含量。正常 30d大鼠海马片稳定培养 2h后 ,分别用含或不含 2 0 μmol·L-1 醋酸铅的人工脑脊液孵育 ,不同时间点收集 ,作为急性铅中毒标本测定ERK2含量。用Western印迹法测定标本活化的ERK2含量。结果 高频刺激后对照组和慢性铅中毒组峰电位分别为刺激前的1 85 %和 88% ;慢性铅中毒组活化的ERK2则比对照组降低了 46 %。海马片培养中 ,对照组活化的ERK2含量基本保持不变 ,铅中毒组在 30和 60min时分别下降了 68%和 33% ,1 2 0min后恢复到正常水平。 展开更多
关键词 铅中毒 急性 慢性 海马CA1区 蛋白激酶类 长时程增强 活化 细胞外信号调节激酶2
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Genistein对aFGF诱导的AGZY-83A细胞增殖的抑制作用 被引量:13
3
作者 孙黎光 马际 +1 位作者 侯伟健 邢伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期10-11,14,共3页
目的 :探讨酪氨酸蛋白激酶 (TPK)抑制剂 Genistein对酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)诱导的肺腺癌细胞株 AGZY- 83A细胞增殖的抑制作用。方法 :以不同浓度的 a FGF刺激 AGZY- 83A细胞 ,再对由 a FGF引起增殖的细胞施加不同浓度的 Genist... 目的 :探讨酪氨酸蛋白激酶 (TPK)抑制剂 Genistein对酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)诱导的肺腺癌细胞株 AGZY- 83A细胞增殖的抑制作用。方法 :以不同浓度的 a FGF刺激 AGZY- 83A细胞 ,再对由 a FGF引起增殖的细胞施加不同浓度的 Genistein,用细胞计数器计数细胞 ,观察 Genistein对细胞增殖的抑制作用。结果 :a FGF可使该细胞株增殖比明显增加 ,而 Genistein可引起细胞增殖比明显下降 ,其程度均随浓度增高而增强。结论 :该细胞株中 a FGF受体有 TPK活性 ,Genistein对 a 展开更多
关键词 TPK 抑制剂 GENISTEIN 细胞增殖 AFGF 肿瘤
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PKC对小鼠受精卵发育的调控作用 被引量:8
4
作者 刘莹 张杰 +2 位作者 武迪迪 宗志红 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期368-371,共4页
为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 ... 为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 展开更多
关键词 受精卵 早期发育 MPF PK TPA 调控作用
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蛋白激酶B在小鼠1-细胞期受精卵中活性及表达变化 被引量:6
5
作者 陈菲 于爱鸣 +5 位作者 冯晨 付伟 赵咏梅 袁莹 武迪迪 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期542-545,共4页
The role of protein kinase B (PKB) in the regulation of early development of fertilized eggs in mouse and its biological function on the development of mouse 1\|cell stage fertilized eggs were studied.The kinase activ... The role of protein kinase B (PKB) in the regulation of early development of fertilized eggs in mouse and its biological function on the development of mouse 1\|cell stage fertilized eggs were studied.The kinase activity of PKB was detected,and mRNA and protein level of PKB both in MⅡ oocytes and 1\|cell stage fertilized eggs were semi\|quantitatively assayed by Western blotting and RT\|PCR.10 μmol/L LY294002,the inhibitor of PKB,was microinjected into 1\|cell stage fertilized eggs of mouse to observe its effect on the development of mouse 1\|cell stage fertilized eggs.The results showed that the activity of PKB increased obviously after the fertilization,the mRNA and protein level of PKB also increased obviously in 1\|cell stage fertilized eggs,while in MⅡ oocytes the mRNA level was not detected.The protein level was lower than that in the 1\|cell stage fertilized eggs.After microinjecting LY294002 the development from 1\|cell stage to 2\|cell stage was inhibited obviously.All the results demonstrate that PKB exists in the fertilized eggs,and the activity,expression and transcription level increase after fertilization.PKB may play a positive role during the early development of fertilized eggs in mouse from 1\|cell to 2\|cell stage,but the mechanism is still unknown.These experiments are helpful for the further study of PKB on the regulation of early development of fertilized eggs. 展开更多
关键词 蛋白激酶B 小鼠细胞 受精卵 活性 表达
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Bim蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:8
6
作者 赵艳 王睿 +3 位作者 宋敏 温媛媛 姚晓慧 李栢林 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期267-269,273,共4页
目的研究Bim蛋白在乳腺正常组织、乳腺普通导管增生组织、乳腺导管轻中度不典型增生组织、重度不典型增生及导管原位癌组织、乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测101例乳腺石蜡包埋组织中Bim蛋白的表达... 目的研究Bim蛋白在乳腺正常组织、乳腺普通导管增生组织、乳腺导管轻中度不典型增生组织、重度不典型增生及导管原位癌组织、乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测101例乳腺石蜡包埋组织中Bim蛋白的表达。结果在乳腺普通导管增生、轻中度不典型增生、重度不典型增生及导管原位癌和浸润性导管癌中,Bim蛋白表达阳性率呈递减趋势。Bim蛋白在乳腺普通导管增生与重度不典型增生及原位癌组间、重度不典型增生及原位癌和浸润性导管癌组间阳性表达率差异均具有统计学意义(P均<0.05)。乳腺浸润性导管癌中Bim蛋白的表达与患者的临床分期、腋窝淋巴结转移无明显关系,但与组织学分级有关(P<0.05)。结论Bim蛋白表达水平的改变可能与乳腺癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 BIM蛋白 不典型增生
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PKC-α和PKC-δ在不同发育阶段小鼠睾丸中的差异性表达 被引量:5
7
作者 冯晨 付伟 +3 位作者 赵咏梅 陈菲 宗志宏 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期780-782,共3页
Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse tes... Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse testis were identified by Western blotting and RT\|PCR. The expression of both PKC isoenzymes in the developing mouse testis was also examined. In testes of mouse at various developmental stages, both the protein and the mRNA of PKC\|α were uniformity; but the PKC\|δ expression occurred in the testes of 3\|week old, perhaps even relatively late in spermatid development. The results suggest that each isoenzyme may have different roles in processing and modulating physiological cellular responses of spermatogenesis. 展开更多
关键词 PKC-Α PKC-δ 发育阶段 小鼠睾丸 差异性表达
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人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达 被引量:8
8
作者 罗阳 张学 +3 位作者 刘莹 姜莉 刘兴元 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期191-196,共6页
为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了... 为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 . 展开更多
关键词 人牛精浆蛋白相关新基因 CDNA克隆 定位 表达
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N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素大鼠肺脏氧化-还原状态的影响 被引量:8
9
作者 赵亚滨 张玉霞 +2 位作者 王常慧 侯显明 于润江 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期422-425,共4页
目的 :探讨肺脏氧化 -还原状态与肺脏炎症、肺纤维化的关系及N 乙酰半胱氨酸对肺纤维化的影响。方法 :健康雌性Wistar大白鼠经支气管灌注博莱霉素 (BLM )造成肺间质纤维化。部分灌注BLM后每日腹腔注射N 乙酰半胱氨酸 (NAC) 4 0mg/kg。... 目的 :探讨肺脏氧化 -还原状态与肺脏炎症、肺纤维化的关系及N 乙酰半胱氨酸对肺纤维化的影响。方法 :健康雌性Wistar大白鼠经支气管灌注博莱霉素 (BLM )造成肺间质纤维化。部分灌注BLM后每日腹腔注射N 乙酰半胱氨酸 (NAC) 4 0mg/kg。计数支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞总分数 ,检测血清和BALF中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛 (MDA)的含量。肺组织制成石蜡切片行HE染色进行病理和炎症积分分析。左肺匀浆后测羟脯氨酸 (HYP)含量。结果 :BLM组急性炎症期BALF细胞总数显著增高 ,中性粒细胞 (PMN)、淋巴细胞百分比显著增高 ,肺组织炎症积分增加 ,14d时HYP含量较对照组显著增加 (P <0 .0 5 ) ;NAC能够降低急性期BALF中细胞总数、PMN和淋巴细胞百分比 ,但在纤维化期细胞总数有所增加。NAC组肺组织炎症积分下降 ,但HYP含量较BLM组略增加 ;各组血清GSH和MDA水平无显著差异 ;BLM组BALFGSH水平第 17天显著降低 ,NAC能够显著提高BALFGSH水平。结论 :BALFGSH ,MDA水平较血清GSH ,MDA水平能更好的反映肺脏损伤情况和对治疗的反应 ;NAC(40mg/kg)能够减少肺组织炎症细胞的浸润和BALF中中性粒细胞百分比 ,表明小剂量NAC具有一定的抗炎作用 ,但其对肺纤维化大鼠胶原沉积无保护作用。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 博莱霉素 大鼠 肺脏 氧化-还原状态 肺纤维化
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姜黄素类化合物的抗肿瘤活性 被引量:14
10
作者 王玉玲 吴振 张喜轩 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期380-381,共2页
目的:研究姜黄素类化合物诱导HeLa细胞凋亡及其构效关系。方法:MTT法、Hoechst染色法、DNA凝胶电泳法。结果:姜黄素类化合物可抑制HeLa细胞的生长,诱导HeLa细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA带状泳道。结论:姜黄素类化合物可明显地... 目的:研究姜黄素类化合物诱导HeLa细胞凋亡及其构效关系。方法:MTT法、Hoechst染色法、DNA凝胶电泳法。结果:姜黄素类化合物可抑制HeLa细胞的生长,诱导HeLa细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA带状泳道。结论:姜黄素类化合物可明显地诱导HeLa细胞凋亡,且与其结构有密切关系。 展开更多
关键词 抗癌药 姜黄素 活性
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静脉注射硝酸甘油诱导大鼠脑膜核因子-κB表达增强 被引量:11
11
作者 何秋 王怀良 +3 位作者 章新华 陈磊 宗志宏 姜彦多 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期189-193,共5页
目的 观察偏头痛大鼠模型不同时相脑膜核因子 κB(NF κB)的表达特征。方法 采用静脉注射硝酸甘油 (GTN)法建立大鼠偏头痛模型 ,应用免疫组织化学法观察对照组、GTNiv后 0 .5 ,1.0 ,1.5 ,2 .0 ,4 .0h组脑膜NF κB阳性染色细胞的分布 ... 目的 观察偏头痛大鼠模型不同时相脑膜核因子 κB(NF κB)的表达特征。方法 采用静脉注射硝酸甘油 (GTN)法建立大鼠偏头痛模型 ,应用免疫组织化学法观察对照组、GTNiv后 0 .5 ,1.0 ,1.5 ,2 .0 ,4 .0h组脑膜NF κB阳性染色细胞的分布 ,采用Western印迹法观察相应时间点脑膜核NF κB的蛋白表达量。结果 GTNiv后 0 .5h即出现大鼠脑膜NF κB核阳性反应和核NF κB蛋白表达量增高 ,1.5h核NF κB蛋白表达量达高峰 ,然后逐渐回落 ,至 4h接近正常水平。结论 GTNiv后早期脑膜呈时限性核NF κB蛋白表达增强 ,提示NF κB蛋白表达增强可能与偏头痛有关。 展开更多
关键词 硝酸甘油 核因子-КB 偏头痛
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原子吸收光谱法检测子宫肌瘤、不孕症患者血清中微量元素Cu,Zn,Mg,Cr含量 被引量:4
12
作者 何群 马汝海 唐轶 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期685-686,共2页
应用原子吸收光谱法检测了子宫肌瘤、女性不孕症患者血清中微量元素Cu ,Zn ,Mg ,Cr的含量 ,发现子宫肌瘤患者血清内Cu ,Cr含量明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,Zn含量明显低于正常对照组 (P <0 0 1)。不孕症患者血清内微量元素Z... 应用原子吸收光谱法检测了子宫肌瘤、女性不孕症患者血清中微量元素Cu ,Zn ,Mg ,Cr的含量 ,发现子宫肌瘤患者血清内Cu ,Cr含量明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,Zn含量明显低于正常对照组 (P <0 0 1)。不孕症患者血清内微量元素Zn ,Cr含量明显低于正常对照组 (P <0 0 1)。结果表明 :微量元素Cu ,Zn ,Cr代谢与子宫肌瘤有关 ,微量元素Zn 。 展开更多
关键词 Cu Zn Mg Cr 原子吸收光谱法 子宫肌瘤 女性不孕症 微量元素 临床检测
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survivin、PTEN在胃癌组织中的表达以及相关性 被引量:10
13
作者 王强 赵滢 +1 位作者 张天彪 寇有为 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期270-273,共4页
目的检测在胃癌组织中生存素(survivin)、PTEN基因及其蛋白活性的表达,探讨二者相互作用机制。方法采用RTPCR和Western blot技术对临床60例胃癌新鲜标本及其周围正常黏膜组织中survivin、PTEN基因和蛋白的表达进行检测,癌旁组织作为正... 目的检测在胃癌组织中生存素(survivin)、PTEN基因及其蛋白活性的表达,探讨二者相互作用机制。方法采用RTPCR和Western blot技术对临床60例胃癌新鲜标本及其周围正常黏膜组织中survivin、PTEN基因和蛋白的表达进行检测,癌旁组织作为正常对照组。结果正常胃黏膜组织中survivin无表达,胃癌组织中survivin随分化程度降低表达增强。正常胃黏膜组织中PTEN表达高于胃癌组织中的表达量,并随分化程度降低而减弱。均有统计学意义(P<0.05)。survivin、PTEN的表达与性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论在胃癌组织中PTEN低表达而survivin高表达,二者呈显著负相关。提示PTEN的失活和survivin的高表达是胃癌进展的重要环节。二者在胃癌的发生发展过程中起着协同作用。 展开更多
关键词 胃癌 PTEN 生存素
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原子吸收光谱法检测肝癌、肝硬化、肝脓肿患者血清中Cu、Zn、Cr、Mn、Mg微量元素含量 被引量:11
14
作者 何群 马汝海 +2 位作者 李延宾 张凯 李守芬 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期540-541,共2页
应用原子吸收光谱法检测了肝癌、肝硬化、肝脓肿患者血清微量元素的含量 ,发现肝癌和肝硬化患者血清内Cu含量明显高于正常对照组和肝脓肿组 (P <0 0 0 1 ) ,Cr、Mn含量明显低于正常对照组 (p <0 0 0 1 )和肝脓肿组 ,肝脓肿患者... 应用原子吸收光谱法检测了肝癌、肝硬化、肝脓肿患者血清微量元素的含量 ,发现肝癌和肝硬化患者血清内Cu含量明显高于正常对照组和肝脓肿组 (P <0 0 0 1 ) ,Cr、Mn含量明显低于正常对照组 (p <0 0 0 1 )和肝脓肿组 ,肝脓肿患者血清内微量元素含量与正常对照组无显著性差异 (p <0 0 5 )。结果表明 :肝癌、肝硬化患者Cu、Mn、Cr存在代谢异常。 展开更多
关键词 微量元素 肝癌肝硬化 肝脓肿 血清 检测 光谱法
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铅对大鼠海马神经元胞质PKC活性的影响 被引量:5
15
作者 孙黎光 朱延松 +2 位作者 侯伟健 邢伟 刘素媛 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期326-328,共3页
目的 :观察不同低浓度醋酸铅不同染铅时间对大鼠海马神经元原代培养细胞胞质蛋白激酶C(PKC)活性及神经元细胞生长的影响。方法 :出生 4~ 8dWistar大鼠海马神经元原代细胞培养 ,显微照相 ,并不同时间不同浓度染铅 ,应用改良的Takai法测... 目的 :观察不同低浓度醋酸铅不同染铅时间对大鼠海马神经元原代培养细胞胞质蛋白激酶C(PKC)活性及神经元细胞生长的影响。方法 :出生 4~ 8dWistar大鼠海马神经元原代细胞培养 ,显微照相 ,并不同时间不同浓度染铅 ,应用改良的Takai法测定PKC活性的变化。结果 :0 .1~ 1.0 μmol/L染铅 ,PKC活性依浓度依赖方式被激活 ,染铅浓度 >1.0 μmol/L ,PKC活性下降 ;染铅 15min后PKC活性升高并保持。低浓度醋酸铅并可抑制原代神经元细胞生长 ,呈浓度依赖方式。结论 :低浓度醋酸铅可持续激活大鼠海马神经元原代培养细胞胞质PKC ,抑制原代神经元细胞生长。 展开更多
关键词 海马神经元 蛋白激酶C
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从石蜡包埋肺癌组织提取RNA检测PML基因转录的研究 被引量:6
16
作者 赵志龙 宗志红 +2 位作者 李建新 刘宏旭 赵惠儒 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第4期563-566,共4页
背景与目的甲醛固定石蜡包埋组织(FPE)包含大量临床病理信息,同时还含有大量的基因和蛋白物质可用来研究临床意义。本研究的目的是探讨从FPE中提取RNA的可能性,检测急性早幼粒细胞白血病基因(PML)在肺癌FPE中的转录表达。方法选取前期... 背景与目的甲醛固定石蜡包埋组织(FPE)包含大量临床病理信息,同时还含有大量的基因和蛋白物质可用来研究临床意义。本研究的目的是探讨从FPE中提取RNA的可能性,检测急性早幼粒细胞白血病基因(PML)在肺癌FPE中的转录表达。方法选取前期经免疫组织化学染色证实无PML蛋白表达的40例肺癌FPE,存档时间在60-85个月,5例新鲜冰冻肺腺癌组织作为对照;利用Trizol一步法提取RNA,经OD值检测验证RNA质量;RT-PCR检测PML的基因转录表达。结果自肺癌FPE和新鲜冰冻组织提取的RNA的OD比值在1.7-2.1。RT-PCR显示,40例FPE以及5例新鲜冰冻组织中,PML(295bp)以及β-actin(318bp)mRNA均有表达。结论利用Trizol一步法自FPE提取RNA进行RT-PCR,可有效扩增出300bp左右的产物;肺癌组织中PML蛋白存在转录后缺失。 展开更多
关键词 RNA提取 石蜡包埋组织 人PML蛋白 RT-PCR 病理学
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蛋白激酶A对小鼠受精卵早期发育过程中M期促进因子活性的影响 被引量:3
17
作者 王亚杰 赵咏梅 +3 位作者 付伟 刘奕 宗志红 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期222-226,共5页
为研究小鼠体内 1 细胞期受精卵M期蛋白激酶A(PKA)对M期促进因子 (MPF)活性的影响 ,应用PKA激动剂cAMP及热稳定性抑制剂PKI显微注射入 1 细胞期受精卵内 ,观察MPF及PKA活性变化 .未经注射的对照组MPF活性在分裂期增高 ,分裂间期下降 ;而... 为研究小鼠体内 1 细胞期受精卵M期蛋白激酶A(PKA)对M期促进因子 (MPF)活性的影响 ,应用PKA激动剂cAMP及热稳定性抑制剂PKI显微注射入 1 细胞期受精卵内 ,观察MPF及PKA活性变化 .未经注射的对照组MPF活性在分裂期增高 ,分裂间期下降 ;而PKA活性在进入分裂期下降 ,分裂间期升高 .cAMP组PKA活性维持高峰值 ,直至注射HCG后 2 8h ,MPF活性高峰延迟 30min出现 ;PKI显微注射组PKA活性低 ,而MPF活性在注射HCG后 2 7 5h即达高峰 ,且维持高峰时间达1 5h .结果表明 ,PKA活性在细胞周期中也呈波动性 ,间期活性高 ,分裂期活性低 ;PKA高活性抑制MPF活性 ,而抑制PKA活性则MPF活性高峰提前出现 . 展开更多
关键词 蛋白激酶A 小鼠 受精卵 早期发育过程 M期 促进因子活性
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ERK PI3-K在乳腺癌及癌前组织中的表达及相关性 被引量:4
18
作者 马萍 李柏林 +2 位作者 张英 宋敏 宋继谒 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期805-807,共3页
目的:分析乳腺癌、癌前病变及正常组织中ERK和PI3-K的mRNA、蛋白表达及激酶活性,探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用和相互关系。方法:应用RT-PCR方法检测mRNA表达;Westernblot检测蛋白表达;激酶活性检测其磷酸转移酶效率。结果:乳腺癌中... 目的:分析乳腺癌、癌前病变及正常组织中ERK和PI3-K的mRNA、蛋白表达及激酶活性,探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用和相互关系。方法:应用RT-PCR方法检测mRNA表达;Westernblot检测蛋白表达;激酶活性检测其磷酸转移酶效率。结果:乳腺癌中ERK2mRNA和蛋白表达均增加(100%,37/37);激酶活性增加(75.68%,28/37)。有32例PI3-KmRNA表达增加(86.49%);35例蛋白表达增加(94.59%);25例激酶活性增加(67.57%)。ERK在乳腺癌和癌前病变中均处于活化状态,PI3-K只在乳腺癌中处于高表达。相关性分析表明,乳腺癌中ERK2与PI3-K激酶活性呈负相关。结论:ERK和PI3-K途径在乳腺癌发生过程中均存在异常且两者可能存在某种协调关系。 展开更多
关键词 P13-K ERK2 乳腺癌 细胞信号转导
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死后小鼠肾组织细胞核DNA变化规律的研究 被引量:3
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作者 李晓娜 郑吉龙 +1 位作者 张晓东 牛青山 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期564-566,574,共4页
目的:研究DNA降解变化与死亡时间的关系,为法医学推断死亡时间提供一种比较准确可靠的新方法。方法:应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定111只小鼠在死后72h内不同时间点小鼠肾组织细胞核头半... 目的:研究DNA降解变化与死亡时间的关系,为法医学推断死亡时间提供一种比较准确可靠的新方法。方法:应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定111只小鼠在死后72h内不同时间点小鼠肾组织细胞核头半径、尾长度、头DNA含量比例、尾DNA含量比例、尾矩、Olive矩、头面积、尾面积8项参数的变化值。结果:在个体死亡72h内,测定的8项参数指标中尾DNA含量比例、彗星尾长、尾矩、Olive矩、尾面积都呈增加趋势,头半径、头DNA含量比例、头面积均呈下降趋势。上述参数均与死亡时间具有高度的相关性。并将每个参数的测量值进行了多项式运算,获得了更能体现DNA降解趋势的二项式回归方程和多元回归方程,均具有高度的统计学意义(P均<0.01)。结论:应用本研究提供的72h内肾组织组织DNA变化与死亡时间之间呈线性关系的各组回归方程,为法医学推断死后经过时间提供了一种新的、客观的、精确的方法和参考依据。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 死亡时间 DNA降解 尾长度 尾矩 法医病理学
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蛋白激酶C_ζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响 被引量:2
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作者 付伟 赵咏梅 +8 位作者 武迪迪 冯晨 宗志宏 王亚杰 刘莹 刘奕 于爱鸣 陈菲 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期240-244,共5页
为研究蛋白激酶Cζ (proteinkinaseCζ ,PKCζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响 ,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法 ,观察PKCζ的抑制剂对小鼠受精卵 1 细胞期G1和G2 不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响 .小鼠 1... 为研究蛋白激酶Cζ (proteinkinaseCζ ,PKCζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响 ,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法 ,观察PKCζ的抑制剂对小鼠受精卵 1 细胞期G1和G2 不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响 .小鼠 1 细胞期受精卵蛋白激酶C (PKC)的活性不断增加 ,并在G2 期达到最高 .PKC的抑制剂calphostinC可以明显抑制PKC的活性达 4 7% .同时calphostinC对受精卵 1 细胞期基因组的早期活化具有显著的抑制作用 (P <0 0 1) .在小鼠 1 细胞期受精卵的G2 期 ,具有活性的磷酸化PKCζ的含量明显多于G1期和卵母细胞MⅡ期 ,分别比它们高2 7%和 110 % .PKCζ的特异性抑制剂可以抑制受精卵 1 细胞期基因的转录和活化 (P <0 0 5 ) .实验结果表明 。 展开更多
关键词 蛋白激酶Cζ 受精卵 早期发育 基因组活化 基因组转录 哺乳动物 胚胎基因组
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