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原核细胞中人神经生长因子基因的克隆
1
作者
尹元琴
马萍
+1 位作者
隋承光
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期97-99,共3页
目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细...
目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌。结果:βNGF cDNA经BamHI和PstI 双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆。结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA。
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关键词
神经生长因子
克隆
原核细胞
CDNA
限制性内切酶
BamHI
载体
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职称材料
人神经生长因子cDNA的体外扩增和序列测定
被引量：
1
2
作者
尹元琴
隋承光
+1 位作者
陈红
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期404-405,407,共3页
目的 :以人胎盘组织中的mRNA为模板 ,扩增人 βNGFcDNA ,并测定核苷酸序列 ,为进一步研究奠定基础。方法 :采用异硫氢酸胍法提取RNA ;采用RT -PCR技术扩增人 βNGFcDNA ;Sanger双脱氧末端终止法测定核苷酸序列。结果 :从人胎盘组织中提...
目的 :以人胎盘组织中的mRNA为模板 ,扩增人 βNGFcDNA ,并测定核苷酸序列 ,为进一步研究奠定基础。方法 :采用异硫氢酸胍法提取RNA ;采用RT -PCR技术扩增人 βNGFcDNA ;Sanger双脱氧末端终止法测定核苷酸序列。结果 :从人胎盘组织中提取出RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增出人 βNGFcDNA ,经琼脂糖凝胶电泳鉴定大小与目的片段相同 ,进一步测定序列证实为目的片段。结论 :运用RT PCR技术扩增出人 βNGFcDNA ,扩增时在 5′端以限制性内切酶酶切位点加以修饰 ,此片段经核苷酸序列测定证实为目的片段 。
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关键词
神经生长因子
互补DNA
体外扩增
序列测定
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职称材料
β-淀粉蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型
被引量：
21
3
作者
■剑非
陈红
+5 位作者
任常山
尹元琴
曹孙琼
金雪瑛
王洋
蒋涛
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期145-147,i010,共4页
目的 观察β淀粉样蛋白(Aβ)脑室内注射建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型及其对大鼠行为、胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性、细胞凋亡、神经生长因子(NGF)水平等影响。方法 将Aβ1 -42注射入大鼠侧脑室,于第1周、2周、4周观察Morris水迷宫逃避...
目的 观察β淀粉样蛋白(Aβ)脑室内注射建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型及其对大鼠行为、胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性、细胞凋亡、神经生长因子(NGF)水平等影响。方法 将Aβ1 -42注射入大鼠侧脑室,于第1周、2周、4周观察Morris水迷宫逃避潜伏期、测定脑内ChAT活性、进行原位末端标记凋亡染色及NGF免疫组化染色。结果 Aβ1- 42注射后第2周大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期延长,4周时更明显。2周后海马、皮层ChAT活性下降,4周后脑内ChAT活性广泛下降,以海马最为显著。2周后基底前脑Meynert核区凋亡细胞较其他脑区增多,NGF阳性细胞明显减少。结论 Aβ脑室内注射可以模拟AD行为改变,使脑内ChAT活性降低,基底前脑NGF含量减少,胆碱能神经元凋亡,可以作为AD研究模型。
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关键词
阿尔茨海默病
Β淀粉样蛋白
胆碱乙酰转移酶
神经生长因子
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职称材料
题名
原核细胞中人神经生长因子基因的克隆
1
作者
尹元琴
马萍
隋承光
任常山
机构
中国医科大学基因工程研究中心
中国医科大学
附属第一医院肿瘤
研究
所分子肿瘤
研究
室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第2期97-99,共3页
基金
国家"863"高科技计划基金资助项目(Z20-04-02)
文摘
目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌。结果:βNGF cDNA经BamHI和PstI 双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆。结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA。
关键词
神经生长因子
克隆
原核细胞
CDNA
限制性内切酶
BamHI
载体
Keywords
nerve growth factor
cloning
vector
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人神经生长因子cDNA的体外扩增和序列测定
被引量：
1
2
作者
尹元琴
隋承光
陈红
任常山
机构
中国医科大学基因工程研究中心
中国医科大学
肿瘤
研究
所分子肿瘤
研究
室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期404-405,407,共3页
文摘
目的 :以人胎盘组织中的mRNA为模板 ,扩增人 βNGFcDNA ,并测定核苷酸序列 ,为进一步研究奠定基础。方法 :采用异硫氢酸胍法提取RNA ;采用RT -PCR技术扩增人 βNGFcDNA ;Sanger双脱氧末端终止法测定核苷酸序列。结果 :从人胎盘组织中提取出RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增出人 βNGFcDNA ,经琼脂糖凝胶电泳鉴定大小与目的片段相同 ,进一步测定序列证实为目的片段。结论 :运用RT PCR技术扩增出人 βNGFcDNA ,扩增时在 5′端以限制性内切酶酶切位点加以修饰 ,此片段经核苷酸序列测定证实为目的片段 。
关键词
神经生长因子
互补DNA
体外扩增
序列测定
Keywords
nerve growth factor
complementary DNA
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
β-淀粉蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型
被引量：
21
3
作者
■剑非
陈红
任常山
尹元琴
曹孙琼
金雪瑛
王洋
蒋涛
机构
中国医科大学基因工程研究中心
出处
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期145-147,i010,共4页
基金
国家 8 63高技术发展计划重大项目基金 (编号 :J2 0 0 4 0 2 )
文摘
目的 观察β淀粉样蛋白(Aβ)脑室内注射建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型及其对大鼠行为、胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性、细胞凋亡、神经生长因子(NGF)水平等影响。方法 将Aβ1 -42注射入大鼠侧脑室,于第1周、2周、4周观察Morris水迷宫逃避潜伏期、测定脑内ChAT活性、进行原位末端标记凋亡染色及NGF免疫组化染色。结果 Aβ1- 42注射后第2周大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期延长,4周时更明显。2周后海马、皮层ChAT活性下降,4周后脑内ChAT活性广泛下降,以海马最为显著。2周后基底前脑Meynert核区凋亡细胞较其他脑区增多,NGF阳性细胞明显减少。结论 Aβ脑室内注射可以模拟AD行为改变,使脑内ChAT活性降低,基底前脑NGF含量减少,胆碱能神经元凋亡,可以作为AD研究模型。
关键词
阿尔茨海默病
Β淀粉样蛋白
胆碱乙酰转移酶
神经生长因子
分类号
R749.1 [医药卫生—神经病学与精神病学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
原核细胞中人神经生长因子基因的克隆
尹元琴
马萍
隋承光
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人神经生长因子cDNA的体外扩增和序列测定
尹元琴
隋承光
陈红
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
β-淀粉蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型
■剑非
陈红
任常山
尹元琴
曹孙琼
金雪瑛
王洋
蒋涛
《中国神经精神疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
21
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职称材料
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