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高表达人cycli nG2基因的SGC-7901细胞克隆筛选和鉴定
1
作者
刘洁
崔泽实
+2 位作者
罗阳
满晓辉
张学
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2005年第5期11-14,共4页
应用脂质体基因转染技术建立稳定表达cyclin G2基因的胃癌克隆细胞,为深入研究cyclin G2在胃癌细胞周期调控的作用和机制提供理想的生物学模型。构建以新霉素基因作为筛选标志基因的包含人cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2,大量...
应用脂质体基因转染技术建立稳定表达cyclin G2基因的胃癌克隆细胞,为深入研究cyclin G2在胃癌细胞周期调控的作用和机制提供理想的生物学模型。构建以新霉素基因作为筛选标志基因的包含人cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2,大量扩增纯化后经限制性内切酶BamH I/BstX I双酶切鉴定;利用阳离子脂质体介导的基因转染法将其和对照空载体pIRESneo转染人胃癌细胞SGC-7901,经G418选择性培养基筛选后有限稀释法连续克隆化,免疫细胞化学染色检测cyclin G2蛋白表达情况。酶切结果表明cyclin G2cDNA已成功插入pIRESneo的多克隆位点内;经G418筛选后在转染pIRES-G2和转染pIRESneo组均见多个细胞克隆出现,细胞化学染色证实pIRES-G2转染组cyclin G2蛋白的表达水平明显高于pIRESneo转染组;经过多次有限稀释获得稳定高表达cyclin G2的细胞克隆。应用脂质体转基因技术成功建立高表达cyclin G2基因的人胃癌细胞克隆。
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关键词
cyclin
G2
胃癌
基因转染
细胞克隆
培养基筛选
基因转染
细胞克隆
酶切鉴定
高表达
G2
重组表达载体
脂质体介导
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职称材料
人类生殖相关新基因的定位和组织表达
被引量：
2
2
作者
罗阳
于秉治
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期633-636,共4页
基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2～13.3,同时应用生物信息学方法在人...
基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2～13.3,同时应用生物信息学方法在人类基因组重叠片段数据库进行该基因的定位,结果相吻合。研究证明,RH技术具有快速、精确、简便等优点,是基因定位研究中一强有力的技术。同时通过RT PCR方法研究了HBRP基因在人体各组织中的表达分布,结果显示该基因在睾丸、肠、肾、肝、脾、胃、胰腺组织有较高的表达,而在检测的脑、肺、骨骼肌、心肌组织中表达较弱。
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关键词
辐射杂种细胞系
染色体定位
HBRP
RT-PCR
生物信息学
人类
生殖基因
组织表达
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职称材料
题名
高表达人cycli nG2基因的SGC-7901细胞克隆筛选和鉴定
1
作者
刘洁
崔泽实
罗阳
满晓辉
张学
机构
中国医科大学
实验
技术中心
中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学基因组学研究室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2005年第5期11-14,共4页
基金
教育部高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划资助(教人司:2000-26)
文摘
应用脂质体基因转染技术建立稳定表达cyclin G2基因的胃癌克隆细胞,为深入研究cyclin G2在胃癌细胞周期调控的作用和机制提供理想的生物学模型。构建以新霉素基因作为筛选标志基因的包含人cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2,大量扩增纯化后经限制性内切酶BamH I/BstX I双酶切鉴定;利用阳离子脂质体介导的基因转染法将其和对照空载体pIRESneo转染人胃癌细胞SGC-7901,经G418选择性培养基筛选后有限稀释法连续克隆化,免疫细胞化学染色检测cyclin G2蛋白表达情况。酶切结果表明cyclin G2cDNA已成功插入pIRESneo的多克隆位点内;经G418筛选后在转染pIRES-G2和转染pIRESneo组均见多个细胞克隆出现,细胞化学染色证实pIRES-G2转染组cyclin G2蛋白的表达水平明显高于pIRESneo转染组;经过多次有限稀释获得稳定高表达cyclin G2的细胞克隆。应用脂质体转基因技术成功建立高表达cyclin G2基因的人胃癌细胞克隆。
关键词
cyclin
G2
胃癌
基因转染
细胞克隆
培养基筛选
基因转染
细胞克隆
酶切鉴定
高表达
G2
重组表达载体
脂质体介导
Keywords
cyclin G2
gastric carcinoma
gene transfection
cell clone
分类号
Q421 [生物学—神经生物学]
TQ927 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
人类生殖相关新基因的定位和组织表达
被引量：
2
2
作者
罗阳
于秉治
机构
中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学基因组学研究室
中国医科大学
生物
化
学
教研室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期633-636,共4页
基金
国家重点基础研究发展规划项目(No.G1999055900-2)
国家自然科学基金资助项目~~
文摘
基因定位对研究基因之间以及基因与疾病之间的相互关系具有重要意义。应用辐射杂种细胞系技术(RH)对我们克隆的人类新基因HBRP(HumanBSP RelatedProtein)进行了染色体定位,结果将该基因定位于19q13.2～13.3,同时应用生物信息学方法在人类基因组重叠片段数据库进行该基因的定位,结果相吻合。研究证明,RH技术具有快速、精确、简便等优点,是基因定位研究中一强有力的技术。同时通过RT PCR方法研究了HBRP基因在人体各组织中的表达分布,结果显示该基因在睾丸、肠、肾、肝、脾、胃、胰腺组织有较高的表达,而在检测的脑、肺、骨骼肌、心肌组织中表达较弱。
关键词
辐射杂种细胞系
染色体定位
HBRP
RT-PCR
生物信息学
人类
生殖基因
组织表达
Keywords
radiation hybrid
chromosomal localization
HBRP
RT-PCR
bioinformatics
分类号
Q987 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高表达人cycli nG2基因的SGC-7901细胞克隆筛选和鉴定
刘洁
崔泽实
罗阳
满晓辉
张学
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2005
0
在线阅读
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职称材料
2
人类生殖相关新基因的定位和组织表达
罗阳
于秉治
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
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职称材料
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