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长距离PCR技术检测重型血友病甲Ⅷ因子基因倒位的进一步研究及推广应用 被引量：2
1
作者 梁燕 刘敬忠 +5 位作者 肖白 季林祥 张跃进 赵翠兰 王勇 林雯 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第9期42-45,共4页
将已研究成功的长距离ＰＣＲ（ＬＤＰＣＲ） 技术［３］在热循环条件、模板ＤＮＡ用量及ｄＮＴＰ用量等方面进行了进一步优化和探索。应用优化后的ＬＤＰＣＲ技术检测了来自天津、江苏、北京、湖北、四川等省市１０８个重型血友病... 将已研究成功的长距离ＰＣＲ（ＬＤＰＣＲ） 技术［３］在热循环条件、模板ＤＮＡ用量及ｄＮＴＰ用量等方面进行了进一步优化和探索。应用优化后的ＬＤＰＣＲ技术检测了来自天津、江苏、北京、湖北、四川等省市１０８个重型血友病甲家系共１５７ 份ＤＮＡ（患者１０５人， 家属５２人）， 发现４７例患者（或家系） 有凝血因子Ⅷ（ＦⅧ） 基因倒位， 占重型患者的４４％ ； 查出基因倒位携带者３０ 余名。用ＬＤＰＣＲ检测ＦⅧ基因倒位的技术可以准确、简便、快速地直接进行重型血友病甲的基因诊断、携带者检测及产前诊断。 展开更多
关键词 LD-PCR 血友病甲 Ⅷ因子 基因倒位
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血管内皮生长因子基因反义核酸体外抑制K562细胞生长及机理研究 被引量：4
2
作者 费嘉 张洹 韩忠朝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1769-1772,共4页
目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸抑制K5 6 2细胞生长的机理 ;以及反义药物的量效和时效关系 ,揭示VEGF基因新的功能。方法 :用反义核酸X7,2 0 -mer,全硫代修饰 ;以脂质体介导进行转染 ,细胞培养72h ,用MTT法计算细胞生长抑制... 目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义核酸抑制K5 6 2细胞生长的机理 ;以及反义药物的量效和时效关系 ,揭示VEGF基因新的功能。方法 :用反义核酸X7,2 0 -mer,全硫代修饰 ;以脂质体介导进行转染 ,细胞培养72h ,用MTT法计算细胞生长抑制率 ,采用台盼蓝拒染法每 2 4h观察细胞存活情况并计数 ,用Giemsa染色观测细胞形态学改变 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果 :反义药物对K5 6 2细胞生长有明显抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,并且下调VEGF蛋白的表达 ,反义药物对K5 6 2细胞的凋亡无影响。结论 :VEGF反义药物抑制K5 6 2细胞生长的机理是抑制细胞增殖 ,而不是促进细胞凋亡 ,内源性VEGF蛋白具有促进K5 6 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 K562细胞 寡核苷酸类 反义 细胞凋亡
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c-jun和c-fos基因在单眼视觉剥夺性猫视皮质表达特性的研究 被引量：4
3
作者 王乐今 赵堪兴 +2 位作者 王立 朱豫 刘金敏 《眼科新进展》 CAS 2000年第2期104-107,共4页
目的　了解单眼视觉剥夺 ,c- jun、c- fos基因在视觉发育过程中的表达特性。方法　应用 FVEP检测弱视 ,RT- PCR检测视皮质神经元基因表达水平。结果　视觉剥夺组猫对侧视皮质神经元 c- fos m RNA水平降低 ,与对照组比较差异有显著性 (P&... 目的　了解单眼视觉剥夺 ,c- jun、c- fos基因在视觉发育过程中的表达特性。方法　应用 FVEP检测弱视 ,RT- PCR检测视皮质神经元基因表达水平。结果　视觉剥夺组猫对侧视皮质神经元 c- fos m RNA水平降低 ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,同侧视皮质与对照组比较差异无显著性 (P>0 .0 5 )在早期即有降低 ,到成年时稳定在低水平 ;c- jun基因表达在剥夺组早期升高 ,与正常对照组比较差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;以后在剥夺组表达降低并在成年稳定于低水平 ,与正常对照组比较差异具有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　在单眼视觉剥夺性弱视猫两侧视皮质 c- fos基因表达不平衡 ,c- jun基因在两侧视皮质表达平衡。 展开更多
关键词 C-JUN C-FOS 基因表达 弱视 视皮质 猫
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成人骨髓间充质干细胞中各亚群的比较研究 被引量：12
4
作者 周征 姜尔烈 +5 位作者 王玫 刘庆国 翟文静 黄勇 王荷花 韩明哲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期54-58,共5页
为了观察成人骨髓间充质干细胞在体外培养中的形态 ,比较不同亚群细胞的免疫表型和细胞周期等生物学性状的差异 ,取正常人骨髓单个核细胞 ,进行间充质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSC)培养 ,倒置相差显微镜观察MSC不同亚群细胞的形态 ... 为了观察成人骨髓间充质干细胞在体外培养中的形态 ,比较不同亚群细胞的免疫表型和细胞周期等生物学性状的差异 ,取正常人骨髓单个核细胞 ,进行间充质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSC)培养 ,倒置相差显微镜观察MSC不同亚群细胞的形态 ;流式细胞术检测MSC不同亚群细胞的表型并进行细胞周期分析 ;用 10 μm滤膜将不同群体细胞分离 ,分别接种半固体培养体系。结果表明 :①MSC在体外培养中明显分为两群 ,成纤维样梭形细胞为成熟的MSC ,即mMSC ;体积很小的圆形细胞为RS细胞 (rapidlyMSCself renewingcells) ;② 99%的RS细胞处于G0 G1 期 ,mMSC中处于G0 G1 期的细胞占 90 %。③两群细胞的系定向抗原均为阴性 (CD34、CD4 5、CD3、CD19、CD33、HLA DR、CD38等 ) ,而CD90、CD10 5、C16 6、CD2 9、CD4 4、CD4 9e、CD5 4、CD13呈阳性表达 ,但RS细胞表面这些抗原表达的阳性率和平均荧光强度都明显低于mMSC ,而CD117和KDR的表达则显著高于mMSC。④半固体培养 4 - 5周后两种细胞群体均未见造血细胞集落形成。结论 :MSC是一个异质性的细胞群体 ,其中包含的RS细胞可能是一种更原始的中胚层前体细胞 ,具有更强的自我更新和多向分化潜能。 展开更多
关键词 间充质干细胞 RS细胞 mMSC
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加工工艺对医用心血管支架生物相容性的影响 被引量：12
5
作者 黄远 田筝 +1 位作者 刘文西 张君奎 《天津大学学报（自然科学与工程技术版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期374-379,共6页
设计了一种新结构的316L不锈钢心血管支架,采用激光切割和电化学抛光去除尖角的加工方法,通过3T3细胞和小鼠骨髓基质细胞培养以及人体外周血的溶血实验,研究了加工工艺对该心血管支架生物相容性的影响.采用激光切割和电化学抛光工艺,获... 设计了一种新结构的316L不锈钢心血管支架,采用激光切割和电化学抛光去除尖角的加工方法,通过3T3细胞和小鼠骨髓基质细胞培养以及人体外周血的溶血实验,研究了加工工艺对该心血管支架生物相容性的影响.采用激光切割和电化学抛光工艺,获得了设计的支架形状并消除了支架边缘的尖角;实验组和对照组对比表明,细胞的形状、数量相同,其活性和生长未受支架影响,支架没有引起溶血反应,加工工艺是合理的,没有产生细胞毒性. 展开更多
关键词 医用心血管支架 生物相容性 加工工艺 激光切割 电化学抛光 溶血反应
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幽门螺杆菌在儿童特发性血小板减少性紫癜中的临床意义 被引量：18
6
作者 唐瑛 王书春 +3 位作者 王鲁娟 刘永 王海英 王占聚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期419-421,共3页
本研究旨在探讨幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。用13C尿素呼气试验检测92例ITP儿童患者的感染情况,并检测66名健康儿童作为对照组。将ITP患儿中68例阳性者随机分为2组:复合用药治疗... 本研究旨在探讨幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。用13C尿素呼气试验检测92例ITP儿童患者的感染情况,并检测66名健康儿童作为对照组。将ITP患儿中68例阳性者随机分为2组:复合用药治疗组34例,应用糖皮质激素+抗菌治疗;单药治疗组34例,用糖皮质激素治疗。结果表明:ITP患儿HP的感染率为74.7%,明显高于对照组(39.4%)(P<0.05)。ITP患儿经治疗后,单药治疗组的总有效率(73.5%)明显低于复合用药治疗组的总有效率(94.1%)(P<0.05);治疗组1年内的复发率(17.6%)明显低于单药治疗组(47.1%)(P<0.05);治疗过程中患儿外周血血小板计数均呈逐渐上升趋势,在相同时间点,复合用药治疗组血小板计数明显高于单药治疗组(P<0.01)。结论:ITP患儿HP感染率高于健康儿童,HP可能参与了儿童ITP的发病过程,抗HP治疗可提高ITP患儿的治疗效果,降低其复发率。 展开更多
关键词 血小板减少性紫癜 幽门螺杆菌 儿童
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4种细胞因子对K562/S及其耐药细胞株K562/A02积蓄柔红霉素的影响 被引量：5
7
作者 平宝红 周淑芸 +1 位作者 刘启发 杨纯正 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第2期158-160,共3页
目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响，评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰... 目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响，评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、重组人粒－单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ作用后Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对柔红霉素的积蓄无改变，而ＩＦＮ－α可显著提高耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度，在１５０ｍｉｎ时升高了４.０１倍（Ｐ＜０.０５）。结论小剂量（５００Ｕ／ｍｌ） α－干扰素作用后，多药耐药细胞株 Ｋ５６２／Ａ０２对抗肿瘤药物ＤＮＲ的积蓄作用大大提高，提示ＩＦＮ－α具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。 展开更多
关键词 白血病 多药耐药性 细胞因子 药物积蓄 柔红霉素
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hTERT基因反义cDNA转染对卵巢癌细胞系SKOV3生物学行为的影响 被引量：1
8
作者 袁碧波 糜若然 +3 位作者 韩忠朝 蔡英林 周毓玲 马月霞 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期680-683,共4页
目的 :研究反义hTERT基因对卵巢癌细胞系SKOV3生物学行为的影响。方法 :构建反义hTERT基因的真核表达载体 ,采用LIPOFCTAMINETM Reagent转染卵巢癌细胞系SKOV3,通过RT PCR、Trap ELASA、生长曲线、裸鼠体内致瘤能力等方法比较转染前后细... 目的 :研究反义hTERT基因对卵巢癌细胞系SKOV3生物学行为的影响。方法 :构建反义hTERT基因的真核表达载体 ,采用LIPOFCTAMINETM Reagent转染卵巢癌细胞系SKOV3,通过RT PCR、Trap ELASA、生长曲线、裸鼠体内致瘤能力等方法比较转染前后细胞hTERT基因表达、端粒酶活性、细胞生长、致瘤性等方面的变化。结果 :转化细胞系细胞hTERT基因的表达受到抑制 ,端粒酶活性下调 ,肿瘤细胞的增殖与生长速度明显降低 ,细胞的克隆形成能力及裸鼠体内的成瘤能力下降 ,肿瘤的恶性表型部分逆转。结论 :应用反义技术下调hTERT基因表达可有效降低端粒酶活性并部分逆转卵巢癌细胞的恶性表型 ,hTERT基因可望成为卵巢癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 基因 HTERT 转染 端粒酶
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1-(6-取代萘基-2)-1,2-二氢-2,2-二甲基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪的合成及抗癌作用(Ⅱ)
9
作者 孙国光 李仁利 +3 位作者 王剑锐 王燕玉 王彧 殷建林 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第3期227-230,共4页
报道了5个1-(取代萘基-2)-1,2-二氢-2,2-二甲基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(V_(1～5))和1-(萘基-1)-1,2-二氢-2,2-二甲基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(V_6)的合成及抗癌活性。(V_(1～5))对HL-60的抑制作用随6-取代基的增大而降低,对MGC-803的抑... 报道了5个1-(取代萘基-2)-1,2-二氢-2,2-二甲基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(V_(1～5))和1-(萘基-1)-1,2-二氢-2,2-二甲基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(V_6)的合成及抗癌活性。(V_(1～5))对HL-60的抑制作用随6-取代基的增大而降低,对MGC-803的抑制作用也有类似的趋势。可能是6位带取代基的萘环体积过大,不适于二氢叶酸还原酶的活性部位的原故。(V_6)对HL-60及MGC细胞均有中等强度的抑制作用。 展开更多
关键词 三嗪类化合物 合成 抗癌作用
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