目的:探讨细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其对MM细胞增殖的影响。方法:采用实时定量PCR技术检测63例初治MM患者及8例正常人CD138+细胞中Cdc37 m RNA表达水平。采用慢病毒感染技术,下调MM细胞系NCI-H929细胞中Cd...目的:探讨细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其对MM细胞增殖的影响。方法:采用实时定量PCR技术检测63例初治MM患者及8例正常人CD138+细胞中Cdc37 m RNA表达水平。采用慢病毒感染技术,下调MM细胞系NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,CCK-8法、软琼脂克隆形成实验检测Cdc37对MM细胞体外增殖能力的影响。建立NOD/SCID小鼠皮下成瘤模型,验证Cdc37对MM细胞体内增殖能力的影响。流式细胞术检测Cdc37对MM细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法检测周期相关蛋白的表达变化和NF-κB信号通路的改变。结果:与正常人相比,Cdc37在初治MM患者CD138+细胞中显著高表达。采用sh RNA慢病毒感染技术下调NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,抑制了MM细胞在体内及体外的增殖能力。与对照组相比,NCI-H929-Cdc37 sh RNA细胞中G0/G1期细胞比例显著增加,细胞周期素cyclin D1的表达水平明显下调,而周期负向调控因子p21及其上游调控分子p53的表达明显上调。同时,NCI-H929-Cdc37 sh RNA细胞中NF-κB信号通路激活受抑。结论:Cdc37在初治MM患者中高表达,下调Cdc37可抑制MM细胞NCI-H929的增殖活性,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期。其机制可能是抑制NF-κB信号通路的激活。展开更多
文摘目的:探讨细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其对MM细胞增殖的影响。方法:采用实时定量PCR技术检测63例初治MM患者及8例正常人CD138+细胞中Cdc37 m RNA表达水平。采用慢病毒感染技术,下调MM细胞系NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,CCK-8法、软琼脂克隆形成实验检测Cdc37对MM细胞体外增殖能力的影响。建立NOD/SCID小鼠皮下成瘤模型,验证Cdc37对MM细胞体内增殖能力的影响。流式细胞术检测Cdc37对MM细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法检测周期相关蛋白的表达变化和NF-κB信号通路的改变。结果:与正常人相比,Cdc37在初治MM患者CD138+细胞中显著高表达。采用sh RNA慢病毒感染技术下调NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,抑制了MM细胞在体内及体外的增殖能力。与对照组相比,NCI-H929-Cdc37 sh RNA细胞中G0/G1期细胞比例显著增加,细胞周期素cyclin D1的表达水平明显下调,而周期负向调控因子p21及其上游调控分子p53的表达明显上调。同时,NCI-H929-Cdc37 sh RNA细胞中NF-κB信号通路激活受抑。结论:Cdc37在初治MM患者中高表达,下调Cdc37可抑制MM细胞NCI-H929的增殖活性,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期。其机制可能是抑制NF-κB信号通路的激活。
