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反义细胞周期蛋白E真核表达载体的构建及其对体外人乳腺癌细胞的抑制作用
被引量：
3
1
作者
桑建利
边昕
王永潮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期165-168,共4页
为了探讨细胞周期蛋白 E(cyclin E)与人乳腺癌细胞恶性特征间的相关性 ,利用反义 RNA抑制基因表达的技术 ,构建了细胞周期蛋白 E反义 RNA的真核表达载体并转入人乳腺癌细胞中 .通过 G41 8筛选出阳性克隆 ,经 PCR和 Western印迹检测 ,确...
为了探讨细胞周期蛋白 E(cyclin E)与人乳腺癌细胞恶性特征间的相关性 ,利用反义 RNA抑制基因表达的技术 ,构建了细胞周期蛋白 E反义 RNA的真核表达载体并转入人乳腺癌细胞中 .通过 G41 8筛选出阳性克隆 ,经 PCR和 Western印迹检测 ,确定细胞中含有重组质粒 ,并且细胞周期蛋白 E蛋白的水平明显降低 ,由此获得了反义 RNA表达载体导致的细胞周期蛋白 E表达受抑制的细胞 .细胞模型建立后 ,观察分析了细胞形态 ,细胞生长的血清依赖性以及软琼脂成集落能力 ,与对照细胞相比所发生的变化 .结果显示 ,细胞周期蛋白 E受抑制后 ,乳腺癌细胞体积变大 ,细胞生长对血清依赖性增加 ,低血清培养到第 6d时 ,细胞密度约为对照细胞的五分之一 ,细胞成集落能力也显著下降 ,软琼脂中克隆形成率下降 57% .这些变化都表明乳腺癌细胞恶性程度由于细胞周期蛋白 E表达受抑制而减弱 ,可以推测 cyclin E与乳腺癌细胞的恶性增殖及非锚定依赖性生长有着明显的关系 .
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关键词
细胞周期蛋白E
反义RNA
乳腺癌细胞
抑制作用
表达载体
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职称材料
题名
反义细胞周期蛋白E真核表达载体的构建及其对体外人乳腺癌细胞的抑制作用
被引量：
3
1
作者
桑建利
边昕
王永潮
机构
北京师范大学生命
科学
学院
细胞
生物
学
研究所
中国医学科学院药物生物技术研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期165-168,共4页
基金
国家"973"计划资助!项目 (No.G19990 5 390 1)&&
文摘
为了探讨细胞周期蛋白 E(cyclin E)与人乳腺癌细胞恶性特征间的相关性 ,利用反义 RNA抑制基因表达的技术 ,构建了细胞周期蛋白 E反义 RNA的真核表达载体并转入人乳腺癌细胞中 .通过 G41 8筛选出阳性克隆 ,经 PCR和 Western印迹检测 ,确定细胞中含有重组质粒 ,并且细胞周期蛋白 E蛋白的水平明显降低 ,由此获得了反义 RNA表达载体导致的细胞周期蛋白 E表达受抑制的细胞 .细胞模型建立后 ,观察分析了细胞形态 ,细胞生长的血清依赖性以及软琼脂成集落能力 ,与对照细胞相比所发生的变化 .结果显示 ,细胞周期蛋白 E受抑制后 ,乳腺癌细胞体积变大 ,细胞生长对血清依赖性增加 ,低血清培养到第 6d时 ,细胞密度约为对照细胞的五分之一 ,细胞成集落能力也显著下降 ,软琼脂中克隆形成率下降 57% .这些变化都表明乳腺癌细胞恶性程度由于细胞周期蛋白 E表达受抑制而减弱 ,可以推测 cyclin E与乳腺癌细胞的恶性增殖及非锚定依赖性生长有着明显的关系 .
关键词
细胞周期蛋白E
反义RNA
乳腺癌细胞
抑制作用
表达载体
Keywords
cyclin E, antisense RNA, breast cancer cell, suppressive role
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
R73－362 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反义细胞周期蛋白E真核表达载体的构建及其对体外人乳腺癌细胞的抑制作用
桑建利
边昕
王永潮
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
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