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新一代必特螺旋霉素基因工程菌的微波诱变被引量：13: 1; 作者戴剑漉李瑞芬 +1 位作者武临专王以光《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期406-410,428,共6页; 本文探讨微波诱变对新一代必特螺旋霉素基因工程菌的育种效果。以经紫外诱变筛选的新一代必特螺旋霉素产生菌Streptomyces spiramyceticusNBT-U149为出发菌株进行微波诱变筛选。辐射分四种方式:培养皿加盖冷却;加盖不冷却;不加盖冷却;... 展开更多; 关键词必特螺旋霉素微波诱变育种; 在线阅读下载PDF 职称材料

土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选被引量：5: 2; 作者林灵陈菲菲 +2 位作者王以光赫卫清王相晶《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期426-430,共5页; 目的构建土壤宏基因组文库并对格尔德霉素类I型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因进行初步筛选研究。方法直接提取土壤样品中宏基因组DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。根据格尔德霉素的I型PKS基因的保守序列设计引物,使用菌... 展开更多; 关键词宏基因组文库 PKS 土壤; 在线阅读下载PDF 职称材料

SPSS方差分析在阿维菌素培养基优化中的应用被引量：3: 3; 作者刘娟娟汪康游 +3 位作者金媛媛田喜凤王以光杨兆勇《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期251-255,共5页; 目的通过在阿维菌素B1a发酵培养基中添加KCl和棉籽饼粉,应用SPSS统计方法,分析检测阿维菌素B1a产量,获得KCl和棉籽饼粉的最佳添加量。方法选取本实验室保存阿维菌素生产菌株,经统计学方法理性设计实验方案,在发酵培养基中添加KCl和棉籽... 展开更多; 关键词阿维菌素B1a SPSS 方差分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种发酵提取物中含卤有机化合物的早期鉴别方法: 4; 作者谭亿林灵 +4 位作者周红霞王以光赫卫清杨兆勇王勇《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期741-744,794,共5页; 目的建立一种对发酵提取物中含卤有机化合物的快速定性检测方法。方法以改良的Beilsten法对含卤和不含卤的有机化合物纯品及发酵液提取物进行焰色反应,观察是否有阳性现象——绿色火焰呈现;同时研究了该法的检测基限和氯化钠对检测的干... 展开更多; 关键词 Beilsten检测含卤有机化合物早期鉴别; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平被引量：8: 5; 作者杨永红赫卫清 +4 位作者李瑞芬戴剑漉杨劭王以光武临专《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期826-830,共5页; 目的提高螺旋霉素生物转化为4"-异戊酰螺旋霉素的水平,为构建以4"-异戊酰螺旋霉素为主要组分的必特螺旋霉素新一代基因工程菌提供指导。方法构建重组质粒pKC1139-e-ist-ist和pKC1139-ist-ist,它们分别含有5'-上游插入红... 展开更多; 关键词螺旋霉素 4"-异戊酰基转移酶基因变铅青链霉菌TK24 PermE＊生物转化必特螺旋霉素; 在线阅读下载PDF 职称材料

雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞细胞周期时相、p27蛋白表达及细胞增殖的影响被引量：4: 6; 作者苗立夫黄超联 +7 位作者陈连凤朱文玲杨菁王以光张华刘佩毛佘铭鹏宋存先《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期32-38,139,共8页; 目的评估本实验室自制包载雷帕霉素(RPM)的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子(NPs)对离体培养的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)细胞周期时相、p27蛋白表达和细胞增殖的影响。方法按不同浓度RPM-PLGA NPs设定药物作用组,并设立RPM组、PLG... 展开更多; 关键词雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子人脐动脉平滑肌细胞细胞周期细胞增殖 p27蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新一代必特螺旋霉素基因工程菌的微波诱变被引量：13: 1; 作者戴剑漉李瑞芬武临专王以光; 机构中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室沈阳同联制药集团; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期406-410,428,共6页; 基金国家高技术研究发展计划(863项目)(No.2006AA02Z230); 文摘本文探讨微波诱变对新一代必特螺旋霉素基因工程菌的育种效果。以经紫外诱变筛选的新一代必特螺旋霉素产生菌Streptomyces spiramyceticusNBT-U149为出发菌株进行微波诱变筛选。辐射分四种方式:培养皿加盖冷却;加盖不冷却;不加盖冷却;不加盖不冷却,辐射时间分别为10、20、30、40、50、60、80、100和120 s。每次辐射5 s后,冰上快速冷却20 s再照射,并将照射时间累计。以不同的辐射时间设定为不同的微波处理剂量,计算致死率。结果表明,必特菌株对微波敏感,微波辐射60 s时致死率达到92.55%。微波诱变在以脉冲频率为2450MHz的800W家用微波炉条件下,其最佳作用方式为培养皿不加盖、冰上快速冷却,最佳辐射时间为50 s。初筛摇瓶正突变率达到57.14%,复筛摇瓶发酵效价是出发菌株1.6倍以上的有10株,占初筛菌株的2%。最终筛选得到突变株Streptomyces spiramyceticusNBT-UM22,其必特螺旋霉素发酵产量是出发菌株的1.87倍,且组分比例无明显变化。; 关键词必特螺旋霉素微波诱变育种; Keywords Bitespiramycin Microwave radiation Mutation breeding; 分类号 Q319.33 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选被引量：5: 2; 作者林灵陈菲菲王以光赫卫清王相晶; 机构东北农业大学中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期426-430,共5页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(IMBF20060202); 文摘目的构建土壤宏基因组文库并对格尔德霉素类I型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因进行初步筛选研究。方法直接提取土壤样品中宏基因组DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。根据格尔德霉素的I型PKS基因的保守序列设计引物,使用菌落PCR方法直接筛选所获得的宏基因组文库。结果成功构建了土壤宏基因组文库,获得约6800个克隆子,其平均插入片段在25kb以上,覆盖至少170Mb的基因组信息。通过PKS基因筛选,获得了新的PKS基因片段。结论本文报道了土壤宏基因组文库的成功构建,并为利用宏基因组技术寻找新的聚酮类次级代谢产物的生物合成基因,以便于其异源表达或组合生物合成新的聚酮类次级代谢产物奠定基础。; 关键词宏基因组文库 PKS 土壤; Keywords Metagenomic library PKS Soil; 分类号 Q933 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SPSS方差分析在阿维菌素培养基优化中的应用被引量：3: 3; 作者刘娟娟汪康游金媛媛田喜凤王以光杨兆勇; 机构河北联合大学中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期251-255,共5页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.81172965) NSFC-NIH(中美)国际合作与交流项目(No.81261120417); 文摘目的通过在阿维菌素B1a发酵培养基中添加KCl和棉籽饼粉,应用SPSS统计方法,分析检测阿维菌素B1a产量,获得KCl和棉籽饼粉的最佳添加量。方法选取本实验室保存阿维菌素生产菌株,经统计学方法理性设计实验方案,在发酵培养基中添加KCl和棉籽饼粉,以甲醇提取、HPLC快速检测方法检测阿维菌素B1a产量,运用SPSS方差分析软件分析处理所得实验数据。结果当KCl的添加量为0.04%,棉籽饼粉的添加量为4%时,阿维菌素B1a产量最高。结论运用SPSS方差分析可以快速高效的辅助阿维菌素B1a发酵培养基优化,为理性设计实验提高阿维菌素中有用组分B1a的产量提供了理论基础。; 关键词阿维菌素B1a SPSS 方差分析; Keywords Avermenctin B1a SPSS ANOVA; 分类号 R978.1 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种发酵提取物中含卤有机化合物的早期鉴别方法: 4; 作者谭亿林灵周红霞王以光赫卫清杨兆勇王勇; 机构中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室东北农业大学生命科学学院中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期741-744,794,共5页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(IMBF20060202); 文摘目的建立一种对发酵提取物中含卤有机化合物的快速定性检测方法。方法以改良的Beilsten法对含卤和不含卤的有机化合物纯品及发酵液提取物进行焰色反应,观察是否有阳性现象——绿色火焰呈现;同时研究了该法的检测基限和氯化钠对检测的干扰。结论改良的Beilsten法适用于对含氯、溴、碘元素有机物的定性检测,其对卤元素的检测基限可达到微克级;通过适当的发酵液提取方式降低无机卤素的干扰后,该法可有效检测发酵提取物中含卤有机化合物。; 关键词 Beilsten检测含卤有机化合物早期鉴别; Keywords Beilstein test Organo-halogen compounds Preliminary identification; 分类号 Q5 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平被引量：8: 5; 作者杨永红赫卫清李瑞芬戴剑漉杨劭王以光武临专; 机构华中师范大学生命科学学院中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室同联药业沈阳抗生素厂; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期826-830,共5页; 基金科技部"重大新药创制"科技重大专项(2008ZX09101-047); 文摘目的提高螺旋霉素生物转化为4"-异戊酰螺旋霉素的水平,为构建以4"-异戊酰螺旋霉素为主要组分的必特螺旋霉素新一代基因工程菌提供指导。方法构建重组质粒pKC1139-e-ist-ist和pKC1139-ist-ist,它们分别含有5'-上游插入红霉素抗性基因强启动子PermE*的4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝,和4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝;将它们分别导入到变铅青链霉菌TK24中,比较它们对螺旋霉素的4"-异戊酰化能力。结果在加入终浓度为50μg/mL螺旋霉素时,变铅青链霉菌TK24[pKC1139-e-ist-ist]比变铅青链霉菌TK24[pKC1139-ist-ist]对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平提高近4倍。结论在变铅青链霉菌TK24中,PermE*可以增强4"-异戊酰基转移酶基因表达,明显提高对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平。; 关键词螺旋霉素 4"-异戊酰基转移酶基因变铅青链霉菌TK24 PermE＊生物转化必特螺旋霉素; Keywords Spiramycin 4＂-isovaleryltransferase gene（ist） S.lividans TK24 PermE＊ Bioconversion bitespiramycin; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞细胞周期时相、p27蛋白表达及细胞增殖的影响被引量：4: 6; 作者苗立夫黄超联陈连凤朱文玲杨菁王以光张华刘佩毛佘铭鹏宋存先; 机构清华大学第一附属医院心脏中心中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院心脏内科中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所天津市生物材料重点实验室中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理室; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期32-38,139,共8页; 基金国家自然科学基金(30240021) 清华-裕元医学科学研究基金(20240000556 20240000520)~~; 文摘目的评估本实验室自制包载雷帕霉素(RPM)的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子(NPs)对离体培养的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)细胞周期时相、p27蛋白表达和细胞增殖的影响。方法按不同浓度RPM-PLGA NPs设定药物作用组,并设立RPM组、PLGA组和M231培养基及平滑肌细胞生长添加剂(M231-SMGs)组作为对照。采用细胞免疫组织化学染色比较不同处理组HUASMC p27蛋白表达阳性率和表达水平的差异,流式细胞技术评价各处理组对HUASMC细胞周期时相的影响,噻唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度RPM和RPM-PLGA NPs对HUASMC存活率的影响。结果10μg/L及以上浓度的RPM和50μg/L及以上浓度的RPM-PLGA NPs可明显抑制HUA-smc生长,并呈浓度依赖性。细胞计数绘制生长-时间曲线显示,100μg/L RPM和500μg/L RPM-PLGA NPs作用于HUASMC 24 h后细胞计数值明显低于M231-SMGs对照组;单纯PLGA NPs对细胞生长无明显影响;与PLGA组和M231-SMGs培养基对照组相比,RPM组和RPM-PLGA NPs组G_0/G_1期细胞比例明显增多,S期及G_2/M期细胞比例明显减少(P均<0.01),但两组间细胞周期时相比例差异无统计学意义(P>0.05)。细胞免疫组织化学染色结果显示,100μg/LRPM和500μg/L RPM-PLGA NPs组的HUASMC p27蛋白表达阳性率和表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),但均较PLGA组和M231-SMGs培养基组明显增加(P<0.01)。结论RPM-PLGA NPs抑制体外培养的HUASMC生长效果与RPM相似,并可显著抑制体外培养HUASMC p27蛋白表达,阻抑其细胞周期进程于G_1/S期而抑制其细胞增殖。; 关键词雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子人脐动脉平滑肌细胞细胞周期细胞增殖 p27蛋白; Keywords rapamycin poly（lactic-co-glycolic） acid nanoparticles human umbilical arterial vascular smooth muscle cell cell cycle proliferation p27 protein; 分类号 R318.08 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新一代必特螺旋霉素基因工程菌的微波诱变	戴剑漉李瑞芬武临专王以光	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	13	在线阅读下载PDF 职称材料
2	土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选	林灵陈菲菲王以光赫卫清王相晶	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	SPSS方差分析在阿维菌素培养基优化中的应用	刘娟娟汪康游金媛媛田喜凤王以光杨兆勇	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种发酵提取物中含卤有机化合物的早期鉴别方法	谭亿林灵周红霞王以光赫卫清杨兆勇王勇	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平	杨永红赫卫清李瑞芬戴剑漉杨劭王以光武临专	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	8	在线阅读下载PDF 职称材料
6	雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞细胞周期时相、p27蛋白表达及细胞增殖的影响	苗立夫黄超联陈连凤朱文玲杨菁王以光张华刘佩毛佘铭鹏宋存先	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料