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CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达
1
作者
王文广
匡德宣
+5 位作者
李娜
陆彩霞
罕园园
仝品芬
孙晓梅
代解杰
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期479-484,共6页
目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB...
目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达情况,探针法实时荧光定量PCR检测病毒载量,以β-Actin作内参染料法实时荧光定量PCR检测受体SCARB2基因的相对表达量,结合基因序列比对,分析其与感染的相关性。结果 CA16感染TSLF,可引起明显的细胞病变,免疫荧光实验可见病毒和受体SCARB2蛋白,以100TCID50/10^5 cells的比例感染TSLF可在48 h左右病毒载量达到最高,SCARB2基因有与感染相关的高表达,而其基因序列也与人有较高同源性。结论 CA16可感染TSLF,树鼩SCARB2可参与感染。
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关键词
CA16
树鼩肺成纤维细胞
感染
SCARB2
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职称材料
树鼩中APP基因特征描述及可变剪接体的分型鉴定
2
作者
罕园园
孙晓梅
+6 位作者
匡德宣
陆彩霞
陈玲霞
仝品芬
王文广
李娜
代解杰
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期132-137,152,共7页
目的区分并鉴定树鼩中APP基因mRNA的多种可变剪接体,对APP基因特征进行描述,并确定其在各组织中的表达分布。方法参考已知人的和树鼩基因组预测的APP基因序列,设计树鼩APP基因mRNA剪切体外显子的共同特异性引物。分别从树鼩不同组织中...
目的区分并鉴定树鼩中APP基因mRNA的多种可变剪接体,对APP基因特征进行描述,并确定其在各组织中的表达分布。方法参考已知人的和树鼩基因组预测的APP基因序列,设计树鼩APP基因mRNA剪切体外显子的共同特异性引物。分别从树鼩不同组织中提取总RNA,反转录为c DNA,利用高保真酶扩增目的剪切体DNA。根据PCR扩增产物电泳条带的有无和大小初步判断剪接体的型别,最后将PCR产物胶回收进行测序鉴定,对获得的基因进行特征描述,并结合定量PCR的结果确定了各剪接体在不同组织中分布情况。结果结果表明树鼩APP剪接体的全长为3514 bp,有一个109 bp的5’-UTR,1092bp的3’-UTP。APP基因在调查的9个物种中高度同源保守,显示树鼩与灵长类存在一个较近的亲缘关系。通过三维建模获得了树鼩和人的APP基因共同拥有的4个结构域。同时确认这4种通过外显子跳跃产生的APP可变剪接体在不同组织中的分布和表达。4种检测到的剪接体APP770,APP695,APP751,APP677均表达于肺、肾和肠,表达量最高的是肺、肌肉和睾丸。结论对树鼩APP基因可变剪接体的表达研究,有助于推动树鼩作为阿尔茨海默病模型深入研究疾病的发生机制和药物研发。
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关键词
树鼩
APP基因
可变剪接体
阿尔茨海默病模型
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职称材料
题名
CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达
1
作者
王文广
匡德宣
李娜
陆彩霞
罕园园
仝品芬
孙晓梅
代解杰
机构
中国医学科学院
/
北京协和医学院
医学
生物学
研究所
树
鼩种质
资源中心
云南省
重大
传染病
疫苗
研发
重点
实验室
中国医学科学院
医学
生物学
研究所
实验
树
鼩标准化
与应用
研究
省
创新
团队
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期479-484,共6页
基金
云南省应用基础研究面上项目(2018FB045)
云南省科技人才和平台计划项目(2017HC019)
云南省重大科技专项(2017ZF007)~~
文摘
目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达情况,探针法实时荧光定量PCR检测病毒载量,以β-Actin作内参染料法实时荧光定量PCR检测受体SCARB2基因的相对表达量,结合基因序列比对,分析其与感染的相关性。结果 CA16感染TSLF,可引起明显的细胞病变,免疫荧光实验可见病毒和受体SCARB2蛋白,以100TCID50/10^5 cells的比例感染TSLF可在48 h左右病毒载量达到最高,SCARB2基因有与感染相关的高表达,而其基因序列也与人有较高同源性。结论 CA16可感染TSLF,树鼩SCARB2可参与感染。
关键词
CA16
树鼩肺成纤维细胞
感染
SCARB2
Keywords
CA16
tree shrew lung fibroblasts
Infection
SCARB2
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
树鼩中APP基因特征描述及可变剪接体的分型鉴定
2
作者
罕园园
孙晓梅
匡德宣
陆彩霞
陈玲霞
仝品芬
王文广
李娜
代解杰
机构
中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期132-137,152,共7页
基金
国家科技支撑计划项目(2014BAI01B00)
云南省联合支持国家计划项目(2015GA009)
云南省科技人才和平台计划项目
文摘
目的区分并鉴定树鼩中APP基因mRNA的多种可变剪接体,对APP基因特征进行描述,并确定其在各组织中的表达分布。方法参考已知人的和树鼩基因组预测的APP基因序列,设计树鼩APP基因mRNA剪切体外显子的共同特异性引物。分别从树鼩不同组织中提取总RNA,反转录为c DNA,利用高保真酶扩增目的剪切体DNA。根据PCR扩增产物电泳条带的有无和大小初步判断剪接体的型别,最后将PCR产物胶回收进行测序鉴定,对获得的基因进行特征描述,并结合定量PCR的结果确定了各剪接体在不同组织中分布情况。结果结果表明树鼩APP剪接体的全长为3514 bp,有一个109 bp的5’-UTR,1092bp的3’-UTP。APP基因在调查的9个物种中高度同源保守,显示树鼩与灵长类存在一个较近的亲缘关系。通过三维建模获得了树鼩和人的APP基因共同拥有的4个结构域。同时确认这4种通过外显子跳跃产生的APP可变剪接体在不同组织中的分布和表达。4种检测到的剪接体APP770,APP695,APP751,APP677均表达于肺、肾和肠,表达量最高的是肺、肌肉和睾丸。结论对树鼩APP基因可变剪接体的表达研究,有助于推动树鼩作为阿尔茨海默病模型深入研究疾病的发生机制和药物研发。
关键词
树鼩
APP基因
可变剪接体
阿尔茨海默病模型
Keywords
Tupaia Belangeri
APP mRNA variants
APP distribution
Alzheimer＇s disease model
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达
王文广
匡德宣
李娜
陆彩霞
罕园园
仝品芬
孙晓梅
代解杰
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
在线阅读
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职称材料
2
树鼩中APP基因特征描述及可变剪接体的分型鉴定
罕园园
孙晓梅
匡德宣
陆彩霞
陈玲霞
仝品芬
王文广
李娜
代解杰
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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