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人生存素survivin的克隆与分泌表达
1
作者
代晓华
姜琳琳
+4 位作者
程昕
纪庆
朱惠芳
熊冬生
周圆
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期89-92,共4页
旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转...
旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达。结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体。融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在。分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Western blot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达。
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关键词
生物医学工程
生存素
分泌表达
大肠杆菌
凋亡
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职称材料
题名
人生存素survivin的克隆与分泌表达
1
作者
代晓华
姜琳琳
程昕
纪庆
朱惠芳
熊冬生
周圆
机构
中国医学科学院
北京协和医学院
、血液
病
医院
(
血液学
研究所
)
实验
血液学
国家
重点
实验室
天津市口腔
医院
暨南开大学附属口腔
医院
实验
研究
中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期89-92,共4页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金项目(20070023093)
国家自然科学基金项目(30701012)
天津市自然科学基金项目(07JCZ-DJC04900)
文摘
旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达。结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体。融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在。分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Western blot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达。
关键词
生物医学工程
生存素
分泌表达
大肠杆菌
凋亡
Keywords
Biomedical engineerin Survivin Secretory expression Escherichia coli Apoptosis
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人生存素survivin的克隆与分泌表达
代晓华
姜琳琳
程昕
纪庆
朱惠芳
熊冬生
周圆
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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