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人VEGF受体II基因3区的克隆、表达研究被引量：5: 1; 作者熊冬生刘嘉 +6 位作者邵晓枫李蓉许元富彭晖范冬梅朱祯平杨纯正《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第5期45-49,共5页; 用RT PCR法从人胎儿脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF受体II基因 3区 ,将其重组到 pAYZ表达载体中 ,构建成人VEGF受体II基因 3区表达载体。将该载体转化大肠杆菌 16C9,获得稳定表达 ,表达产物以可溶性状态存在 ;SDS PAGE和Westernblot分析显... 展开更多; 关键词 VEGF受体 Ⅱ基因3区血管内皮细胞生长因子血管内皮细胞生长因子受体人体血管新生肿瘤治疗基因克隆基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究: 2; 作者许元富熊冬生 +7 位作者杨纯正邵晓枫彭晖范冬梅刘汉芝赖增祖高赢岱朱祯平《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第8期33-38,共6页; 为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi... 展开更多; 关键词抗CD3/抗B细胞肿瘤双功能小抗体抗肿瘤活性玫瑰花环亲和常数 JURKAT细胞 DAUDI细胞 B淋巴瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建被引量：3: 3; 作者彭晖杨纯正 +4 位作者范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期4-8,共5页; 分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗C... 展开更多; 关键词同源建模在 CD20 抗体Fab'片段三维结构蛋白 B淋巴细胞瘤药物治疗嵌合抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗CD_(20)抗体分子在CHO细胞中的表达: 4; 作者刘银星熊冬生 +7 位作者邵晓枫许元富范冬梅徐晨彭晖杨铭朱祯平杨纯正《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期21-24,共4页; 利用PCR方法从抗CD2 0 抗体Fab′片段的表达载体上扩增抗CD2 0 抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体恒定区的表达载体中 ,构建抗CD2 0抗体IgG的轻链和重链表达载体PK10 0VL和PGL0 5VH ,并用质脂体法共转染CHO细... 展开更多; 关键词嵌合抗CD20抗体分子基因表达 CHO细胞基因工程 B淋巴肿瘤治疗 B淋巴细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化: 5; 作者李董袁文肃 +4 位作者马小彤蔡辉国明宇李静赵春华《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第11期27-30,共4页; 克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融... 展开更多; 关键词白细胞介素纯度离子交换层析凝胶过滤层析大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人VEGF受体II基因3区的克隆、表达研究被引量：5: 1; 作者熊冬生刘嘉邵晓枫李蓉许元富彭晖范冬梅朱祯平杨纯正; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第5期45-49,共5页; 基金国家攀登计划 (95 专 10 ) 天津市重大科技攻关 (0 0 3 1195 11)资助项目; 文摘用RT PCR法从人胎儿脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF受体II基因 3区 ,将其重组到 pAYZ表达载体中 ,构建成人VEGF受体II基因 3区表达载体。将该载体转化大肠杆菌 16C9,获得稳定表达 ,表达产物以可溶性状态存在 ;SDS PAGE和Westernblot分析显示 ,其分子量约为 14kD。以纯化的表达产物免疫Balb/c小鼠 ,眼球采血制备抗血清 ,抗血清效价在 10 3以上 ,并具有抑制VEGF诱导内皮细胞增殖的作用 ,在抑制肿瘤血管新生中具有潜在的应用前景。; 关键词 VEGF受体 Ⅱ基因3区血管内皮细胞生长因子血管内皮细胞生长因子受体人体血管新生肿瘤治疗基因克隆基因表达; Keywords VEGF, KDR, Cloning, Expression; 分类号 R73-36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究: 2; 作者许元富熊冬生杨纯正邵晓枫彭晖范冬梅刘汉芝赖增祖高赢岱朱祯平; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第8期33-38,共6页; 基金 863计划 ( 10 2- 0 9 0 3 - 0 3 ) 天津自然基金 ( 993 80 3 811)资助项目; 文摘为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi细胞 (CD2 0 + )的结合的亲和常数Ka分别为 3.2× 10 8M- 1和 8.9× 10 8M- 1。在体外该抗体能激活并介导T细胞杀伤Daudi细胞。裸鼠体内分布实验结果表明 :该型抗体可在移植瘤部位富集 ;在人B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型中 ,联合人的PBMC和IL 2 ,该抗体可以杀灭人B淋巴瘤细胞 ,明显延长荷瘤裸鼠的生存时间。; 关键词抗CD3/抗B细胞肿瘤双功能小抗体抗肿瘤活性玫瑰花环亲和常数 JURKAT细胞 DAUDI细胞 B淋巴瘤; Keywords Bispecific antibodyM, CD3, CD20, B lymphoma; 分类号 R73-36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建被引量：3: 3; 作者彭晖杨纯正范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期4-8,共5页; 基金 86 3计划 ( 86 3 10 2 0 9 0 3 0 3) 国家自然科学基金 ( 3990 0 186 )资助项目; 文摘分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗CD2 0 嵌合抗体片段Fab’的空间构象 ,并对模建蛋白进行分子力学和分子动力学优化。对优化后的模建蛋白的合理性验证显示 ,模建蛋白的三维结构是合理而可信的。; 关键词同源建模在 CD20 抗体Fab'片段三维结构蛋白 B淋巴细胞瘤药物治疗嵌合抗体; Keywords Homology modeling, CD 20 , Fab' fragment; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗CD_(20)抗体分子在CHO细胞中的表达: 4; 作者刘银星熊冬生邵晓枫许元富范冬梅徐晨彭晖杨铭朱祯平杨纯正; 机构中国医学科学院和中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期21-24,共4页; 基金 86 3计划 ( 2 0 0 0 14 1)和天津重大基金 ( 0 0 31195 11)资助项目。; 文摘利用PCR方法从抗CD2 0 抗体Fab′片段的表达载体上扩增抗CD2 0 抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体恒定区的表达载体中 ,构建抗CD2 0抗体IgG的轻链和重链表达载体PK10 0VL和PGL0 5VH ,并用质脂体法共转染CHO细胞 ,RT PCR和ELISA检测结果证实了抗CD2 0 抗体IgG全分子在CHO细胞中的分泌表达。免疫结合结果表明CHO细胞分泌表达的抗CD2 0 抗体IgG全分子可与CD2 0 阳性的B淋巴瘤Raji细胞结合。; 关键词嵌合抗CD20抗体分子基因表达 CHO细胞基因工程 B淋巴肿瘤治疗 B淋巴细胞; Keywords CD20, Expression, Whole antibody against-CD20; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化: 5; 作者李董袁文肃马小彤蔡辉国明宇李静赵春华; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第11期27-30,共4页; 基金 863计划(2001AA215301) 973规划(001CB5099)资助项目; 文摘克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式。表达蛋白占菌体总蛋白的30％左右。菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70％,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95％以上。IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105 U/mg。重组人IL-6,/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达。; 关键词白细胞介素纯度离子交换层析凝胶过滤层析大肠杆菌; Keywords IL-6/2 fusion protein, fermentation, purification; 分类号 TQ920 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人VEGF受体II基因3区的克隆、表达研究	熊冬生刘嘉邵晓枫李蓉许元富彭晖范冬梅朱祯平杨纯正	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2002	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究	许元富熊冬生杨纯正邵晓枫彭晖范冬梅刘汉芝赖增祖高赢岱朱祯平	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建	彭晖杨纯正范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2001	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	嵌合抗CD_(20)抗体分子在CHO细胞中的表达	刘银星熊冬生邵晓枫许元富范冬梅徐晨彭晖杨铭朱祯平杨纯正	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化	李董袁文肃马小彤蔡辉国明宇李静赵春华	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料