阿片类药物长期作用对μ-中国仓鼠卵细胞基因表达的影响及与PC12细胞线粒体膜电势之间的关系 被引量：1

1

作者 陆久怡 叶菜英 +3 位作者 杨惠芬 武文君 刘丽云 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期215-219,共5页

目的 从基因水平入手，筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因，初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期（ 72 h）作用于μ- CHO细胞，模拟耐受成瘾。... 目的 从基因水平入手，筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因，初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期（ 72 h）作用于μ- CHO细胞，模拟耐受成瘾。利用差异显示 PCR、克隆、 Northern印迹分析等找出表达水平有改变的基因，测序，并与 NIH Blast数据库中序列比对。利用激光共聚焦显微成像、线粒体膜电势测定等方法，观察吗啡短期与长期作用 PC12细胞线粒体膜电势的变化。结果其中一条基因在用 DAMGO长期刺激μ- CHO细胞后基因水平出现上调，并与大鼠线粒体膜上 H＋ /磷酸基同向转运蛋白编码基因同源性很高。线粒体膜电势测定发现，用 10－ 6～ 10－ 4 mol/L吗啡短时间（ 2 h）作用 PC12细胞后，细胞内线粒体膜电势部分丧失或完全丧失；长时间（ 12～ 60 h）作用后，膜电势出现从部分丧失、完全丧失到逐步恢复的现象，上述现象均能被阿片受体拮抗剂纳洛酮阻断。结论 初步提示阿片类药物长期作用含有阿片受体的细胞后，可导致细胞线粒体功能改变，推测阿片类药物可能影响细胞线粒体电子转移、 ATP合成过程，此过程可能与阿片类药物长期激活阿片受体导致的成瘾、耐受有关。 展开更多

关键词 阿片类药物 耐受 差示PCR 线粒体膜电势 PC12细胞

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苯并二氢吡喃衍生物抗骨质疏松活性的构效关系研究 被引量：5

2

作者 熊晓云 陈亚琼 +4 位作者 邹永 梅其炳 赵德化 孙兰3 刘景生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期518-521,共4页

目的　研究系列苯并二氢吡喃化合物的构效关系 ,为设计优良的绝经后骨质疏松症防治药物提供理论依据。方法　在综合考察雷洛昔芬和异丙氧基异黄酮的基础上 ,设计合成一系列苯并二氢吡喃化合物 ,从整体水平考察化合物A对去卵巢大鼠骨质... 目的　研究系列苯并二氢吡喃化合物的构效关系 ,为设计优良的绝经后骨质疏松症防治药物提供理论依据。方法　在综合考察雷洛昔芬和异丙氧基异黄酮的基础上 ,设计合成一系列苯并二氢吡喃化合物 ,从整体水平考察化合物A对去卵巢大鼠骨质疏松的影响 ,从细胞水平研究C单独给药以及与雌二醇联合给药对人成骨细胞株HOSTE85增殖的影响 ,并均在 0 1μmol·L-1水平考察比较化合物BE对HOSTE85增殖的影响。结果　化合物A可一定程度对抗去卵巢大鼠骨质疏松症。C( 1 0nmol·L-1,0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用 ,C与雌二醇联合给药显著拮抗雌二醇对HOSTE85的增殖作用 ,故C可能为雌激素受体的部分激动剂。C、D( 0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用。结论　以A作为母体化合物 ,侧链引入碱性基团 ,对其结构修饰设计抗绝经后骨质疏松症药物是可行的。 展开更多

关键词 选择性雌激素受体调节剂 异丙氧基异黄酮 雷洛昔芬 苯并二氢吡喃 绝经后骨质疏松症

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应用共聚焦激光扫描技术研究阿片受体介导胞内Ca^(2+)增高的调节机制 被引量：7

3

作者 臧梦维 沈琦 +2 位作者 孙越 汪青 刘景生 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第3期254-258,共5页

目的　观察阿片激动剂急性和长时程作用于稳定表达 i NOS基因的 NG- L NCXi NOS细胞 ,对细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的影响及 G-蛋白的调节作用。方法　应用共聚焦显微镜和荧光探针 Fluo- 3,监测单细胞 [Ca2 + ]i 含量变化。结果　 δ-阿... 目的　观察阿片激动剂急性和长时程作用于稳定表达 i NOS基因的 NG- L NCXi NOS细胞 ,对细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的影响及 G-蛋白的调节作用。方法　应用共聚焦显微镜和荧光探针 Fluo- 3,监测单细胞 [Ca2 + ]i 含量变化。结果　 δ-阿片激动剂 DPDPE和吗啡急性刺激细胞诱发 [Ca2 + ]i 增加 ,纳洛酮对其起翻转作用 ;用百日咳毒素预处理细胞后 ,吗啡急性刺激不能引起 [Ca2 + ]i 增加 ;DPDPE和吗啡长时程处理细胞 ,再用相应的阿片激动剂急性刺激也造成 [Ca2 + ]i 增加 ,但 [Ca2 + ]i 增加水平较低 ,用纳洛酮戒断造成 [Ca2 + ]i 明显增加。结论　阿片激动剂诱发[Ca2 + ]i 增加是由阿片受体介导的 ,受对 PTX敏感的 G-蛋白调节 ,当细胞发生阿片耐受和依赖时 ,表现为受体介导 Ca2 + 系统的脱敏现象。 展开更多

关键词 Δ-阿片受体 阿片类药物依赖 细胞内游离钙

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表皮生长因子眼药水的毒理学研究 被引量：2

4

作者 叶益新 黄秉仁 莫冬海 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期137-140,共4页

目的 研究表皮生长因子 (EGF)眼药水的急性、长期毒性及其他副作用。方法 按《新药毒理学研究指导原则》的要求和方法进行动物实验。结果 经全身或局部，短期或长期用药观察，均未发现 EGF眼药水的毒性和其他副作用。结论 符合新药指导... 目的 研究表皮生长因子 (EGF)眼药水的急性、长期毒性及其他副作用。方法 按《新药毒理学研究指导原则》的要求和方法进行动物实验。结果 经全身或局部，短期或长期用药观察，均未发现 EGF眼药水的毒性和其他副作用。结论 符合新药指导原则，表明 EGF眼药水用于滴眼是安全的。 展开更多

关键词 表皮生长因子 眼药水 急性毒性 长期毒性 副作用 毒理学

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17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP_3及钙调蛋白影响 被引量：3

5

作者 刘景生 孙兰 +2 位作者 汪青 翁玲玲 郑虎 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期105-110,共6页

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１，４，５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂，采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光... 目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１，４，５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂，采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变，以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍，持续８０～１６０ｓ；以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞，Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２，ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用，而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流，并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加，激活ＣａＭ从而调节细胞功能。 展开更多

关键词 骨质疏松 雌激素 钙调蛋白 三磷酸肌醇

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吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响 被引量：2

6

作者 方芳 曹清 +1 位作者 宋福津 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期262-267,共6页

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ 及ｃＦｏｓ 的变化... 目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ 及ｃＦｏｓ 的变化。结果　（１） １００μｍ ｏｌ／Ｌ吗啡作用２ ｍ ｉｎ～３６ ｈ 可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低，随着吗啡作用时间的延长，ｃＡＭＰ水平逐渐回升，至３６ ｈ 时明显高于对照，这时加入１００ μｍ ｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ ｈ 可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化；（２） 吗啡长时作用下，胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化，而膜相ＰＫＡ 活性未见明显变化；（３）吗啡作用３６ ｈ 时，细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低，ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用；（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ 活性及ｃＦｏｓ 磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ 细胞ｃＡＭＰＰＫＡ 系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关，而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ 发生去磷酸化，从而激活某些基因的转录。 展开更多

关键词 吗啡 蛋白激酶A c-Fos磷酸化 CAMP 吗啡依赖

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小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠骨小梁结构的影响 被引量：2

7

作者 孙兰 杨京 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期224-227,I001,共5页

目的 观察小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠血清雌二醇（ E2）浓度和骨小梁结构的影响。方法 12月龄雌性大鼠去除双侧卵巢建立骨质疏松模型。实验分四组：假手术组、去卵巢骨质疏松组（ OVX）、 E2替代治疗组 [2.0 mg /(kg· d)]... 目的 观察小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠血清雌二醇（ E2）浓度和骨小梁结构的影响。方法 12月龄雌性大鼠去除双侧卵巢建立骨质疏松模型。实验分四组：假手术组、去卵巢骨质疏松组（ OVX）、 E2替代治疗组 [2.0 mg /(kg· d)]和小剂量 E2组 [0.5 mg/(kg· d)]。去卵巢术 2周后开始灌胃给 E2，连续 12周。在实验结束前 2周，对所有大鼠进行阴道脱落细胞检查，连续 14 d。用显微镜观察涂片，并根据细胞形态和数量判断大鼠动情周期。给药结束后处死动物，取子宫，称其湿重。取全血，采用放射免疫分析法测定血清 E2、卵泡刺激素（ FSH）及黄体生成素（ LH）浓度。通过股骨骨病理切片观察骨小梁结构。 结果 与 OVX组大鼠相比，小剂量 E2组大鼠股骨远端小梁骨粗壮，骨质密度较高，作用与 E2替代组接近，但大鼠子宫重量、血清 E2浓度和动情周期无明显改变。 结论 小剂量 E2能明显改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨小梁结构，同时对生殖系统无影响。 展开更多

关键词 雌激素 去卵巢 骨质疏松 骨小梁 实验研究

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新型阿片受体配基的生物鉴定 被引量：1

8

作者 胡萍 谢志华 +3 位作者 杨惠芬 仇缀佰 张德昌 叶菜英 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期220-223,共4页

目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受... 目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡都可抑制 GPI的电刺激收缩，在 GPI上显示纯激动剂作用。新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基 1＃、 2＃、 3＃、 6＃、 8＃、 9＃和 12＃以及典型的阿片受体激动剂 DAMGO和吗啡的 IC50值分别为 (11.57± 0.71)、 (1255.00± 407.00)、 (9.40± 1.41)、 (240.60± 146.40)、 (453.00± 7.07)、 (130.60± 10.61)、 (7.68± 0.71)、 (12.04± 0.61)和 (72.15± 22.63)nmol/L。竞争性拮抗剂纳洛酮可拮抗配基的激动作用，使新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡的量效曲线平行右移。结论 新型阿片受体配基可激动μ阿片受体，是典型的μ受体激动剂。 展开更多

关键词 新型阿片受体配基 Μ阿片受体 激动剂 镇痛药

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钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的制备与活性测定 被引量：1

9

作者 郭庆民 孟爱民 +1 位作者 杨京 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期228-231,共4页

目的 从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )，并测定其活性。方法 采用 DEAE- cellulose柱层析和 Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白，用γ- 32P掺入法测定 CaMKⅡ及自磷酸化的 CaMKⅡ活性。 结果从牛心肌中提取到钙... 目的 从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ )，并测定其活性。方法 采用 DEAE- cellulose柱层析和 Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白，用γ- 32P掺入法测定 CaMKⅡ及自磷酸化的 CaMKⅡ活性。 结果从牛心肌中提取到钙调蛋白结合的蛋白组分，纯化后得到的 CaMKⅡ比较稳定，产量也较高。此过程比较简单，适合大量制备。经 SDS- PAGE检测，发现酶提取物均质，酶亚基的目的蛋白带相对分子质量为 56 000。在 syntide- 2为底物的反应中，纯化的 CaMKⅡ的特异性酶活性为 7.84 pmol· min－ 1· mg－ 1。 CaMKⅡ可自磷酸化，经过自磷酸化的酶在 Ca2＋和钙调蛋白不存在时也保持活性。结论 通过凝胶层析与亲和层析可提纯 CaMKⅡ。 展开更多

关键词 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 活性测定 制备 凝胶层析 亲和层析

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G蛋白对阿片受体调节延迟整流钾通道的影响 被引量：1

10

作者 叶菜英 李庆霞 +3 位作者 于晓丽 齐京京 李娟 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期297-300,共4页

目的观察G蛋白在阿片受体激动剂对钾通道的双相调节中所起的作用。方法利用膜片钳技术(patchclamp),采用全细胞记录方式,观察在电极液中分别加入G蛋白稳定抑制剂(GDPβS)、百日咳毒素(PTX)、二磷酸核苷酸激酶(NDPK)及环磷酸腺苷(cAMP)后... 目的观察G蛋白在阿片受体激动剂对钾通道的双相调节中所起的作用。方法利用膜片钳技术(patchclamp),采用全细胞记录方式,观察在电极液中分别加入G蛋白稳定抑制剂(GDPβS)、百日咳毒素(PTX)、二磷酸核苷酸激酶(NDPK)及环磷酸腺苷(cAMP)后,对阿片受体激动剂调节NG108-15细胞膜延迟整流钾通道作用的影响。结果(1)GDPβS能够阻断高浓度δ-阿片受体选择性激动剂(DPDPE)对钾电流的兴奋作用及低浓度DPDPE对钾电流的抑制作用(P<0.05)。(2)高浓度DPDPE对钾电流的兴奋性调节作用完全被PTX阻断(P<0.05),而霍乱毒素CTX对DPDPE对钾电流的双相调节作用无影响。(3)尿苷二磷酸(UDP)能够阻断NDPK对高浓度阿片受体激动剂对细胞膜钾通道兴奋性调节作用,而UDP对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。(4)cAMP对高浓度阿片受体激动剂具有调节作用(P<0.05),而对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。结论阿片受体对NG108-15细胞膜上延迟整流钾通道具有双相调节作用,其中高浓度激动剂引起的兴奋作用可能由Gi/o介导,并与cAMP有关,而其抑制作用可能是由G蛋白βγ亚单位直接作用。 展开更多

关键词 膜片钳 延迟整流钾通道 G蛋白

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阿司匹林抑制急性心肌梗死患者血小板与白细胞的粘附

11

作者 高存记 于晓霞 +1 位作者 林勇 汪钟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期268-271,共4页

目的　研究阿司匹林（乙酰水杨酸，ＡＳＡ）对急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者血小板与白细胞粘附的影响及其作用机制。方法　采用体外玫瑰花结形成实验检测血小板与白细胞粘附，观察ＡＳＡ 对两者粘附的作用；用１２５Ｉ标记的单克隆抗体... 目的　研究阿司匹林（乙酰水杨酸，ＡＳＡ）对急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者血小板与白细胞粘附的影响及其作用机制。方法　采用体外玫瑰花结形成实验检测血小板与白细胞粘附，观察ＡＳＡ 对两者粘附的作用；用１２５Ｉ标记的单克隆抗体测定血小板表面α颗粒膜蛋白１４０（ＧＭＰ１４０）的表达，观察ＡＳＡ对凝血酶诱导的血小板表面ＧＭＰ１４０ 表达的影响。结果　ＡＭＩ患者血小板与白细胞间粘附率增高，凝血酶通过诱导血小板表面ＧＭＰ１４０ 的表达促进血小板与白细胞粘附；阿司匹林（５００、５ ０００μｇ／ｍ ｌ）抑制ＡＭＩ患者血小板与白细胞间的粘附，抑制凝血酶诱导的正常人血小板与白细胞间的粘附以及凝血酶诱导的血小板表面ＧＭＰ１４０ 的表达。结论　ＡＳＡ一方面通过抑制ＧＭＰ１４０ 的表达，另一方面可能通过影响配体间的结合抑制血小板与白细胞之间的粘附，揭示了ＡＳＡ 展开更多

关键词 阿司匹林 血小板 中性粒细胞 心肌梗死 AMI

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新合成的阿片受体配基对稳定转染μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性

12

作者 胡萍 叶菜英 +2 位作者 仇缀佰 杨惠芬 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期79-82,共4页

目的研究新合成的阿片受体配基对稳定表达于CHO细胞的μ阿片受体的结合特性。方法采用细胞生物学和放射性配基结合的方法,以能稳定表达μ阿片受体的CHO细胞为模型,检测阿片受体配基犤3H犦diprenorphine(3H-dip)与μ阿片受体的饱和性结... 目的研究新合成的阿片受体配基对稳定表达于CHO细胞的μ阿片受体的结合特性。方法采用细胞生物学和放射性配基结合的方法,以能稳定表达μ阿片受体的CHO细胞为模型,检测阿片受体配基犤3H犦diprenorphine(3H-dip)与μ阿片受体的饱和性结合特征及一系列新合成阿片配基的竞争性结合特征。结果(3H-dip)结合μ阿片受体的平衡解离常数Kd值为1.06nmol/L;受体最大容量Bmax为930fmol/mg蛋白。竞争性结合实验表明3#和12#配基对μ阿片受体的亲和力高于DAMGO和吗啡。2#、6#、8#和9#配基对μ受体的亲和力低于DAMGO和吗啡。结论新配基3#和12#对μ亚型的阿片受体有良好的亲和力。2#、6#、8#和9#配基对μ受体的亲和力较低。 展开更多

关键词 阿片受体配基 受体结合 Μ阿片受体

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大鼠脑缺血再灌后NMDA受体、NO及cGMP含量的变化 被引量：16

13

作者 强文安 左萍萍 刘景生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期175-179,共5页

目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和... 目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和下丘脑５个部位的ＮＭＤＡ受体活性（３Ｈ－ＭＫ８０１结合）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量变化。结果３Ｈ－ＭＫ８０１结合在海马、纹状体两部位呈持续性明显增加；原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）于缺血后３天在海马、大脑皮层、纹状体达高峰；而诱导型（ｉＮ－ＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量仅在海马呈持续上升，两者在增加幅度与趋势上也很相似。结论在海马缺血性神经损伤过程中，ＮＭＤＡ受体－ＮＯ－ｃＧＭＰ通路激活可能起重要作用。 展开更多

关键词 脑缺血 再灌注损伤 NMDA 一氧化氮 CGMP

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RGS4对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶活性的影响 被引量：2

14

作者 谢志华 胡萍 +3 位作者 叶菜英 杨惠芬 刘丽云 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期210-214,共5页

目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和... 目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和δ-受体，放射性蛋白竞争结合（非标记底物）法测定 cAMP浓度 。结果 受体被其特异的激动剂激活后，单独转染 μ-受体或δ-受体基因的细胞其 AC活性被抑制，且对激动剂表现出高度的剂量依赖性；空质粒（ pcDNA3）转染的细胞之 AC活性不受各种激动剂影响 ;同时转染 RGS4和 μ-受体基因的细胞其 AC活性虽然也呈现剂量依赖性抑制，但抑制的强度比单独转染μ-受体基因的细胞明显减弱 ; RGS4和 δ-受体基因共转染并不影响δ-受体对 AC活性的抑制。受体结合实验显示 RGS4不影响μ-受体和δ-受体的表达。结论 RGS4能逆转μ-受体对 AC的抑制效应，但对δ-受体却没有相同的作用。这可能反映了不同阿片受体分子机制的差异。 展开更多

关键词 RGS4 阿片受体 共转染 腺苷酸环化酶 剂量依赖性抑制

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