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关节软骨的细胞凋亡 被引量:7
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作者 陈延文 王艾琳 +2 位作者 周建平 邱贵兴 章静波 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期364-367,共4页
目的 观察正常及关节炎时关节软骨是否发生细胞凋亡及其可能的意义。方法 采用光镜、电镜观察软骨细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测软骨细胞特异 DNA的梯形带 ,以激光共聚焦显微镜观察细胞内 [Ca2 + ]i动态变化。结果 骨性关节炎及风... 目的 观察正常及关节炎时关节软骨是否发生细胞凋亡及其可能的意义。方法 采用光镜、电镜观察软骨细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测软骨细胞特异 DNA的梯形带 ,以激光共聚焦显微镜观察细胞内 [Ca2 + ]i动态变化。结果 骨性关节炎及风湿性关节炎患者的关节软骨细胞经体外培养 3d后 ,光镜及电镜下均可见处于正常分化期的软骨细胞 ,而未经培养直接分离的部分软骨细胞可见细胞凋亡早期形态学改变。此外 ,体外培养的牛正常软骨细胞在白细胞介素 - 1(IL - 1)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)作用下出现细胞凋亡现象。凋亡细胞内 [Ca2 + ]i呈现双峰现象。结论 正常关节软骨、骨性关节炎及风湿性关节炎的关节软骨中均有细胞凋亡发生。 IL - 1、TNF-α能促进关节软骨细胞发生凋亡 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + ]i明显升高。 展开更多
关键词 软骨细胞 细胞凋亡 关节软骨 关节炎
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小鼠红细胞分化相关因子cDNA片段的克隆与分析 被引量:3
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作者 刘世广 章正琰 +4 位作者 张世馥 马静 唐文 章静波 薛社普 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期94-98,共5页
目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因,并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Friend病毒(FVA)诱导BALB/c小鼠脾脏产生大量FVA原红细胞,后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂... 目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因,并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Friend病毒(FVA)诱导BALB/c小鼠脾脏产生大量FVA原红细胞,后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂交与PCR相结合的方法,用未经培养的FVA诱导的原红细胞(0hFVA原红细胞)的cDNA对培养36h的FVA诱导的成红细胞(36hFVA成红细胞)的cDNA进行多次减除杂交和PCR扩增,构建上述36hcDNA的质粒减除文库并进行差异筛选。对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Northern印迹分析。结果获得1个472bp的cDNA片段,其中含有1个309bp的开放阅读框架,编码102个氨基酸。经GenBank进行同源比较,未发现同源序列,已被GenBank接受,(编号AA114369)。Northern印迹分析表明,该cDNA在培养36h的FVA中、晚幼红细胞中呈差异表达,其mRNA全长约为500~600bp左右。将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子(MEDRF)基因。结论MEDRF基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达,表明MEDRF是一个新的与红细胞终末分化相关的因子。 展开更多
关键词 红细胞分化 细胞分化 CDNA 克隆 相关因子
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红细胞分化去核因子:哺乳类红细胞终末分化/肿瘤抑制的调节因子家族及其相关基因的克隆 被引量:3
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作者 薛社普 刘友华 +10 位作者 张世馥 马文丽 王鑫 费仁仁 杜权 章正琰 章静波 陈克铨 周建平 马静 韩代书 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期371-375,共5页
本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 ... 本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 EDDF与终末分化、核浓缩及自然排核的可能关系 ;用自建的红细胞胞质体杂交模型 ,分别对红白血病和非红系的骨髓瘤细胞进行同种和异种的细胞杂交实验以验证 EDDF的作用规律。结果表明 ,哺乳类红细胞在终末分化不同阶段存在时相相关的分化去核因子家族。这些因子可调控不同分化阶段相关基因的活动 ,且呈时序性出现 ,与血红蛋白表达、细胞核停止分裂转向分化、核偏位、核浓 (固 )缩和自然去核等终末分化特征呈现明显的因果关系。 EDDF活性蛋白可逆转体外培养的肿瘤细胞系 (MEL,K5 6 2 )的恶性生长及诱导终末分化。在上述基础上分别采用不同的分离、提纯及基因克隆路线 ,从人和小鼠红细胞中连续克隆到 5种分化相关基因家族 (MEDDF,HEDDF- 1,HEDRF- 1,HEDRF- 2 ,HCNBP- 1)及其全长序列 ,并经 Gen Bank证实 ,它们均为无同源的新基因序列。 展开更多
关键词 终末分化 红细胞分化去核因子 调控 基因克隆
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红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用 被引量:2
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作者 赵青 葛晔华 +4 位作者 周建平 马静 陈克铨 薛社普 韩代书 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期32-35,F003,共5页
研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF,用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细... 研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF,用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性,采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较,细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8%。用 RT- PCR检测发现,转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍, c- myc表达量下降了 66.3%。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。 展开更多
关键词 小鼠 红细胞分化去核因子 红细胞分化 红白血病
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棉酚作为安全有效和可逆男用节育药的一线新曙光——低剂量棉酚组合甾体激素用药抗生育作用 被引量:11
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作者 薛社普 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第3期211-213,共3页
介绍和评述本期 2篇研究论文所取得的进展。该研究针对影响棉酚成为广泛应用的男性节育药的不可逆性不育和低血钾症毒副作用 ,采用一种新的用药方案 ,即以低剂量棉酚 (12 mg· kg- 1 · d- 1 )合并甾体激素 (甲基睾丸素 2 0 mg&... 介绍和评述本期 2篇研究论文所取得的进展。该研究针对影响棉酚成为广泛应用的男性节育药的不可逆性不育和低血钾症毒副作用 ,采用一种新的用药方案 ,即以低剂量棉酚 (12 mg· kg- 1 · d- 1 )合并甾体激素 (甲基睾丸素 2 0 mg· kg- 1 · d- 1 和炔雌醇 10 0 μg· kg- 1 · d- 1 )服药 6周 ,作为起始剂量 ;然后 ,用同上单独低剂量棉酚作为维持剂量 ,连服 12周。结果可见服药大鼠在 6周内附睾精子被杀伤而起效不育。维持量可维持不育 ,未见产生不可逆性不育和血钾水平异常现象 ,脏器组织正常。停药 6周后全部恢复生育力。男性志愿者服低剂量棉酚 (15mg/d)后在 12周达到不育 ,改服维持量 (10 m g/d) 4 4周可维持不育并未出现低血钾症 ;停药 10周后 ,生育力和所导致的组蛋白 -精核蛋白取代反应 (HPRR)异常现象全部恢复。这些结果为组织进行低剂量棉酚合并甾体激素的临床新用药方案的试用及其作为安全可逆男用节育药的可能性提供了前景。 展开更多
关键词 棉酚 男用节育药 安全性 可逆性不育 甾体激素
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