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细菌耐药性与新抗菌药物的研究
被引量：
5
1
作者
肖春玲
姚天爵
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期351-353,共3页
伴随着抗生素的广泛使用,耐药及多药耐药细菌已经严重威胁了人类的健康。针对细菌产生耐药的各种机制,筛选和研制新型抗耐药细菌药物是战胜细菌耐药性的重要途径。同时,应重视和加强新药研制相关基础研究和微生物药物的筛选,加速开发创...
伴随着抗生素的广泛使用,耐药及多药耐药细菌已经严重威胁了人类的健康。针对细菌产生耐药的各种机制,筛选和研制新型抗耐药细菌药物是战胜细菌耐药性的重要途径。同时,应重视和加强新药研制相关基础研究和微生物药物的筛选,加速开发创新药物,应对不断出现的新病原体和新耐药细菌带来的挑战。
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关键词
细菌
耐药性
新药
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职称材料
以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白OprM为靶点的药物筛选模型
被引量：
1
2
作者
田睿
余利岩
+3 位作者
肖春玲
左联
姚天爵
杨丽霞
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期359-363,共5页
目的 以绿脓杆菌主动外排系统中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM为靶点,建立外排泵抑制剂筛选模型。方法 利用PCR法从标准绿脓杆菌PA01菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy载体作为克隆载体,pMMB67EH为表达载体在大肠杆菌HS...
目的 以绿脓杆菌主动外排系统中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM为靶点,建立外排泵抑制剂筛选模型。方法 利用PCR法从标准绿脓杆菌PA01菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy载体作为克隆载体,pMMB67EH为表达载体在大肠杆菌HS151中进行OprM蛋白的诱导表达。为检测OprM蛋白的功能,采用液闪计数法测定胞内四环素浓度,纸片法进行抑菌圈测定实验,并以此为基础建立筛选模型。结果 可见OprM蛋白的高表达,以其为主要检定菌,建立了一个作用于外排泵外膜OprM蛋白的药物筛选模型。累计应用此模型筛选放线菌和真菌发酵液样品1 600个,其中获得阳性菌株56个,阳性率约为3.5％。结论 本研究验证了OprM蛋白对外排作用的重要性,通过筛选实验表明该模型有较好的特异性和可操作性。
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关键词
绿脓杆菌
外排泵
OprM
药物筛选
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职称材料
结核杆菌H_(37)Rv异柠檬酸裂解酶基因的克隆及表达
被引量：
1
3
作者
李大为
肖春玲
关艳
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期368-371,共4页
目的 构建在大肠杆菌中高效表达结核杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶(ICL)的重组质粒,实现ICL在原核表达系统的高效稳定表达。方法 采用PCR和克隆技术构建含有结核杆菌H37TRy ICL基因的表达质粒pET30(a)-Rv0467,转化至E.coli BL21(DE3)中诱导...
目的 构建在大肠杆菌中高效表达结核杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶(ICL)的重组质粒,实现ICL在原核表达系统的高效稳定表达。方法 采用PCR和克隆技术构建含有结核杆菌H37TRy ICL基因的表达质粒pET30(a)-Rv0467,转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达。目的蛋白经金属螯合层析纯化后,对其活性进行初步研究。结果 构建了高效表达结核杆菌H37Rv ICL的质粒;在E.coli BL21(DE3)中得到高效表达,目的蛋白占总蛋白含量的30％;表达产物以可溶性形式存在,通过金属螯合层析纯化,所得酶的纯度为90％;目的蛋白具有ICL的活性。结论 利用原核表达系统成功克隆表达了结核杆菌H37Rv的ICL,为以ICL为靶点建立新型抗结核药物奠定了基础。
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关键词
异柠檬酸裂解酶
结核杆菌H37Rv
克隆
基因表达
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职称材料
题名
细菌耐药性与新抗菌药物的研究
被引量：
5
1
作者
肖春玲
姚天爵
机构
中国医学科学院
中国协和医科大学
医药
生物技术
研究所
国家
新药
(
微生物
)
筛选
实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期351-353,共3页
文摘
伴随着抗生素的广泛使用,耐药及多药耐药细菌已经严重威胁了人类的健康。针对细菌产生耐药的各种机制,筛选和研制新型抗耐药细菌药物是战胜细菌耐药性的重要途径。同时,应重视和加强新药研制相关基础研究和微生物药物的筛选,加速开发创新药物,应对不断出现的新病原体和新耐药细菌带来的挑战。
关键词
细菌
耐药性
新药
Keywords
bacteria
drug-resistance
new drugs
分类号
R915 [医药卫生—微生物与生化药学]
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职称材料
题名
以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白OprM为靶点的药物筛选模型
被引量：
1
2
作者
田睿
余利岩
肖春玲
左联
姚天爵
杨丽霞
机构
中国医学科学院
中国协和医科大学
医药
生物技术
研究所
国家
新药
(
微生物
)
筛选
实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期359-363,共5页
文摘
目的 以绿脓杆菌主动外排系统中MexAB-OprM型外排泵的外膜蛋白OprM为靶点,建立外排泵抑制剂筛选模型。方法 利用PCR法从标准绿脓杆菌PA01菌株中得到外排泵外膜蛋白基因oprM,利用T-easy载体作为克隆载体,pMMB67EH为表达载体在大肠杆菌HS151中进行OprM蛋白的诱导表达。为检测OprM蛋白的功能,采用液闪计数法测定胞内四环素浓度,纸片法进行抑菌圈测定实验,并以此为基础建立筛选模型。结果 可见OprM蛋白的高表达,以其为主要检定菌,建立了一个作用于外排泵外膜OprM蛋白的药物筛选模型。累计应用此模型筛选放线菌和真菌发酵液样品1 600个,其中获得阳性菌株56个,阳性率约为3.5％。结论 本研究验证了OprM蛋白对外排作用的重要性,通过筛选实验表明该模型有较好的特异性和可操作性。
关键词
绿脓杆菌
外排泵
OprM
药物筛选
Keywords
Pseudomonas aeruginosa
efflux pump
OprM
drug screening model
分类号
R915 [医药卫生—微生物与生化药学]
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职称材料
题名
结核杆菌H_(37)Rv异柠檬酸裂解酶基因的克隆及表达
被引量：
1
3
作者
李大为
肖春玲
关艳
机构
中国医学科学院
中国协和医科大学
医药
生物技术
研究所
国家
新药
(
微生物
)
筛选
实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期368-371,共4页
基金
科技部重大专项基金(2002AA2Z343D)
北京市自然科学基金(7032036)资助~~
文摘
目的 构建在大肠杆菌中高效表达结核杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶(ICL)的重组质粒,实现ICL在原核表达系统的高效稳定表达。方法 采用PCR和克隆技术构建含有结核杆菌H37TRy ICL基因的表达质粒pET30(a)-Rv0467,转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达。目的蛋白经金属螯合层析纯化后,对其活性进行初步研究。结果 构建了高效表达结核杆菌H37Rv ICL的质粒;在E.coli BL21(DE3)中得到高效表达,目的蛋白占总蛋白含量的30％;表达产物以可溶性形式存在,通过金属螯合层析纯化,所得酶的纯度为90％;目的蛋白具有ICL的活性。结论 利用原核表达系统成功克隆表达了结核杆菌H37Rv的ICL,为以ICL为靶点建立新型抗结核药物奠定了基础。
关键词
异柠檬酸裂解酶
结核杆菌H37Rv
克隆
基因表达
Keywords
isocitrate lyase
Mycobacterium tuberculosis H37Rv
cloning
gene expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细菌耐药性与新抗菌药物的研究
肖春玲
姚天爵
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
以绿脓杆菌外排泵外膜蛋白OprM为靶点的药物筛选模型
田睿
余利岩
肖春玲
左联
姚天爵
杨丽霞
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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职称材料
3
结核杆菌H_(37)Rv异柠檬酸裂解酶基因的克隆及表达
李大为
肖春玲
关艳
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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