检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

沉默Sam68基因对Jurkat细胞增殖影响的研究被引量：2: 1; 作者王迟鹃许华 +4 位作者张海瑞王建蔺亚妮庞天翔李庆华《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期894-898,共5页; 本研究探讨Sam68基因对人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat增殖的影响。针对Sam68 mRNA 531-552靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性真核干扰载体,制备慢病毒并感染Jurkat细胞;应用强力霉素(Doxycycline)诱导干扰载体表达,用Real... 展开更多; 关键词 Sam68基因 JURKAT细胞 SHRNA干扰细胞增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究被引量：1: 2; 作者刘淑平李彦欣 +7 位作者许静顾海慧张鸿雁梁昊岳刘汉芝张孝兵程涛袁卫平《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期580-587,共8页; 诱导多能性干细胞(iPSC)技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒(Episomal)方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效... 展开更多; 关键词诱导多能性干细胞脐血单个核细胞 Episomal载体非整合; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠造血各系细胞中氧化还原酶差异表达的研究被引量：1: 3; 作者张燕张娜 +10 位作者庞雅坤程辉刘灵王金宏顾洁许静缪为民顾军李妍涵程涛袁卫平《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期686-691,共6页; 造血细胞来源于造血干细胞(HSC),而HSC分化呈明显等级关系。细胞中活性氧簇(ROS)对HSC维持至关重要,细胞内过多ROS会造成HSC衰老。细胞主要通过氧化还原酶以及抗氧化物调节胞内ROS水平达到稳态,从而避免过多的ROS对细胞损伤。细胞内的... 展开更多; 关键词氧化还原酶造血干/祖细胞基因表达活性氧簇; 在线阅读下载PDF 职称材料

CD48表达可作为区分造血干细胞分裂方式的活性标志被引量：1: 4; 作者杨鑫张宇 +7 位作者彭路芸庞雅坤董芳纪庆许静程涛袁卫平高瀛岱《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期573-579,共7页; 造血干细胞在细胞分裂时具有维持自我更新和产生定向分化的能力,其依赖于三种细胞分裂方式,一个干细胞产生两个新的干细胞(对称的更新分裂)、两个分化细胞(对称的分化分裂)或者一个干细胞和一个分化细胞(不对称分裂)。本研究旨在探索一... 展开更多; 关键词造血干细胞 CD48 细胞分裂; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名沉默Sam68基因对Jurkat细胞增殖影响的研究被引量：2: 1; 作者王迟鹃许华张海瑞王建蔺亚妮庞天翔李庆华; 机构中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期894-898,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(81170510) 天津市自然科学基金重点资助项目(14JCZDJC34900); 文摘本研究探讨Sam68基因对人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat增殖的影响。针对Sam68 mRNA 531-552靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性真核干扰载体,制备慢病毒并感染Jurkat细胞;应用强力霉素(Doxycycline)诱导干扰载体表达,用Real-time PCR和Western blot验证干扰效率,用改良MTT法检测沉默Sam68基因对Jurkat细胞活力的影响,用体外细胞集落形成实验观察沉默Sam68基因对细胞集落形成能力的影响,用流式细胞术分析沉默Sam68前后细胞周期的变化。结果表明:与对照组相比,实验组Sam68基因的表达被有效抑制(P<0.05);沉默Sam68基因降低了Jurkat细胞活力,抑制了细胞的集落形成能力并且导致S期细胞比例显著增加,G2期细胞比例显著降低(P<0.05)。结论:利用shRNA靶向干扰Sam68基因的表达可以有效抑制人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖。; 关键词 Sam68基因 JURKAT细胞 SHRNA干扰细胞增殖; Keywords Sam68 gene Jurkat cell shRNA interference cell proliferation; 分类号 R733.71 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究被引量：1: 2; 作者刘淑平李彦欣许静顾海慧张鸿雁梁昊岳刘汉芝张孝兵程涛袁卫平; 机构中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期580-587,共8页; 基金科技部十二五支撑计划项目(2013BAI01B09) 科技部重大基础研究项目(2013CB966902,2010CB945204) +1 种基金天津市科委基础项目(11JCZDJC27900,13JCYBJC39400); 文摘诱导多能性干细胞(iPSC)技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒(Episomal)方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效率偏低,严重阻碍了其应用。本研究旨在优化Episomal方法,将脐血单个核细胞(CB MNC)重编程为诱导多能性干细胞(iPSC),建立无基因整合的iPSC的高效生成技术体系,为以后建立疾病iPSC奠定基础。利用CB MNC,通过比较不同氧含量,诱导质粒,MNC培养方法和预刺激时间等条件对Episomal方法进行优化。结果表明:CB MNC采用红系培养液,培养8 d,使用启动子为SFFV(spleen focus forming virus)的Episomal载体,在低氧(3%)条件下诱导,CB MNC重编程效率最高,可达到0.12%。通过分析最佳条件下供体细胞成分发现,表型为CD36+CD71+CD235alow的有核红细胞是重编程最主要的供体细胞来源。结论:本研究成功建立并优化出一种可推广的高效安全的,可以用于临床应用研究的iPSC诱导技术。; 关键词诱导多能性干细胞脐血单个核细胞 Episomal载体非整合; Keywords induced pluripotent stem cells cord blood mononuclear cells episomal vector integration-free; 分类号 R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠造血各系细胞中氧化还原酶差异表达的研究被引量：1: 3; 作者张燕张娜庞雅坤程辉刘灵王金宏顾洁许静缪为民顾军李妍涵程涛袁卫平; 机构中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期686-691,共6页; 基金国家自然科学基金(编号81090411,81130074,30825017,90913018,81070390,81170465) 实验血液学国家重点实验室开放课题(编号ZK10-03,ZK11-05); 文摘造血细胞来源于造血干细胞(HSC),而HSC分化呈明显等级关系。细胞中活性氧簇(ROS)对HSC维持至关重要,细胞内过多ROS会造成HSC衰老。细胞主要通过氧化还原酶以及抗氧化物调节胞内ROS水平达到稳态,从而避免过多的ROS对细胞损伤。细胞内的氧化还原酶有多种,包括过氧化氢酶(catalase)、锰-超氧化物歧化酶(MnSOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GPX1)、NQO1〔NAD(P)H dehydrogenenasequinone 1〕和硫氧还蛋白还原酶(TXNRD1),其在呈等级分化的各类血细胞中的活性及其在这些细胞中参与ROS水平的调节作用还不清楚。本研究应用流式细胞分选技术,分选出小鼠造血各系细胞,用半定量实时PCR法检测氧化还原酶基因(Catalase、MnSOD、GPX1、Txrnd1和Nqo1)在造血各系细胞中的表达,进而筛选出参与HSC中ROS调控的重要的氧化还原酶。结果表明,以长期HSC(LT-HSC)作为参照,T细胞中catalase基因表达是LT-HSC的0.14倍,显著减低(P<0.05)。CLP和髓系细胞中MnSOD基因的表达分别是LT-HSC的0.56和0.47倍,显著减低(P<0.05)。ST-HSC、GMP和髓系细胞中GPX1基因表达分别为LT-HSC的1.79、2.96和2.07倍,显著增加(P<0.05);MEP、T淋巴细胞和B淋巴细胞中GPX1基因表达分别为LT-HSC的0.58、0.10和0.6倍,显著减低(P<0.05)。ST-HSC、MPP、CMP、GMP和髓系细胞中Txrnd1的表达分别为LT-HSC的3.36、3.18、4.19、6.39和4.27,显著增加(P<0.05);T淋巴细胞和B淋巴细胞中Txrnd1的表达分别为LT-HSC的0.016和0.56倍,显著减低(P<0.05)。ST-HSC、MPP、CMP、GMP、CLP和B淋巴细胞中Nqo1的表达为LT-HSC的0.30、0.17、0.25、0.10、0.04和0.01倍,显著减低(P<0.05)。结论:氧化还原酶在造血各系细胞的表达差异较大,提示在不同细胞中发挥主要作用的氧化还原酶种类不同。更为重要的是,Nqo1在LT-HSC中表达明显高于其他各系,提示其可能通过调控Nqo1的表达调节HSC功能。; 关键词氧化还原酶造血干/祖细胞基因表达活性氧簇; Keywords oxidative reductase hematopoietic stem /progenitor cells gene expression reactive oxygen species; 分类号 R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CD48表达可作为区分造血干细胞分裂方式的活性标志被引量：1: 4; 作者杨鑫张宇彭路芸庞雅坤董芳纪庆许静程涛袁卫平高瀛岱; 机构中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院血液学研究所、实验血液学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期573-579,共7页; 基金科技部支撑项目(2013BAI01B09) 科技部重大科学计划(2013CB966902,2011CB964801,2012CB966604) 国家自然科学基金(81170465,81070390,81330015,81130074); 文摘造血干细胞在细胞分裂时具有维持自我更新和产生定向分化的能力,其依赖于三种细胞分裂方式,一个干细胞产生两个新的干细胞(对称的更新分裂)、两个分化细胞(对称的分化分裂)或者一个干细胞和一个分化细胞(不对称分裂)。本研究旨在探索一种高效、稳定的区分造血干细胞分裂方式的方法。前期研究表明,Numb蛋白的分布情况可以作为许多细胞辨别分裂方式的标志,本研究利用免疫荧光技术检测Numb蛋白在小鼠分裂期CD48-CD150+LSK细胞中的分布情况,探索Numb蛋白与中心体的关系。由于CD48表达阳性标志着细胞失去了骨髓重建能力,因此本研究把CD48的表达作为区分造血干细胞自我更新或定向分化的一个活性标志。从小鼠全骨髓细胞中分选出CD48-CD150+LSK细胞,培养体系中加入自行制备的AF 488-conjugated anti-CD48抗体,培养3 d后共聚焦荧光显微镜观察及流式细胞分析是否存在AF488+细胞及其所占比例,然后二次分选AF488+和AF488-细胞进行细胞集落形成实验(colony forming cell assay,CFC)与细胞增殖能力比较。结果表明:Numb蛋白在处于分裂期的CD48-CD150+LSK细胞中对称或不对称分布在细胞分裂平面两侧,这提示Numb蛋白染色可以作为一种区分造血干细胞分裂方式的方法。此外,CD48-CD150+LSK细胞在含有自行制备的AF488-conjugated anti-CD48抗体的培养体系中培养3 d后产生约40%AF488+细胞,共聚焦荧光显微镜统计的阳性细胞比例与流式细胞分析检测结果一致。二次分选AF488+和AF488-细胞,AF488+细胞群的集落形成能力显著高于AF488-细胞群(P<0.05),AF488-细胞群的增殖能力显著高于AF488+细胞群(P<0.05)。结论:CD48表达作为细胞干性丢失的活性标志,可区分造血干细胞的分裂方式。该方法与Numb蛋白染色方法相比,具有用于活细胞的优势,它为后续的细胞培养与细胞移植等研究工作提供了更大的便利。; 关键词造血干细胞 CD48 细胞分裂; Keywords hematopoietic stem cell CD48 cell division; 分类号 R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	沉默Sam68基因对Jurkat细胞增殖影响的研究	王迟鹃许华张海瑞王建蔺亚妮庞天翔李庆华	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究	刘淑平李彦欣许静顾海慧张鸿雁梁昊岳刘汉芝张孝兵程涛袁卫平	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	小鼠造血各系细胞中氧化还原酶差异表达的研究	张燕张娜庞雅坤程辉刘灵王金宏顾洁许静缪为民顾军李妍涵程涛袁卫平	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	CD48表达可作为区分造血干细胞分裂方式的活性标志	杨鑫张宇彭路芸庞雅坤董芳纪庆许静程涛袁卫平高瀛岱	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料