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题名细胞因子对中性粒细胞自发焦亡的调控作用
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作者
陈通
任仟
马凤霞
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机构
中国医学科学院、北京协和医学院、血液病医院、血液学研究所、血液与健康全国重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心、细胞生态海河实验室、中国医学科学院血液病治疗相关感染防控重点实验室
天津医学健康研究院
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出处
《中国医学科学院学报》
北大核心
2025年第4期497-508,共12页
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基金
国家自然科学基金(82171756)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2021-I2M-1-040、2022-I2M-JB-015)
+1 种基金
细胞生态海河实验室创新项目(22HHXBSS00019)
天津市自然科学基金(22JCYBJC01120)。
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文摘
目的探讨细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对中性粒细胞自发焦亡的调控作用。方法将梯度离心分离得到的小鼠骨髓中性粒细胞分别添加或不添加10、50、100 ng/mL细胞因子IL-1β、IL-6、IFN-γ、G-CSF或GM-CSF体外培养20 h,添加或不添加1、10、50 ng/mL细胞因子TNF-α体外培养12 h;荧光显微成像结合镜下计数,计算膜联蛋白Ⅴ(AV)/碘化丙啶(PI)染色中性粒细胞各种死亡类型细胞比例和数量,细胞形态结合AV/PI染色分辨焦亡中性粒细胞;流式细胞分析结合计数微珠,精确检测Ly6g标记AV/PI染色的中性粒细胞中不同死亡方式细胞比例和数量;蛋白印迹检测半胱天冬酶-3(caspase-3)和Gasdermin E(GSDME)剪切激活水平。结果IL-1β、IL-6对中性粒细胞自发焦亡比例和数量无影响;TNF-ɑ诱导中性粒细胞焦亡,1、10、50 ng/mL处理12 h后的焦亡比例分别达(14.79±0.45)%、(19.99±3.02)%、(20.66±1.99)%,相较于未处理焦亡比例(10.22±1.12)%均明显提高(P=0.024,P<0.001,P<0.001);焦亡中性粒细胞比例经10、50、100 ng/mL IFN-γ处理20 h由(17.43±1.88)%降至12.00%(P均<0.001);10、50、100 ng/mL G-CSF均将焦亡细胞比例降至6.00%左右,且极大程度抑制caspase-3和GSDME剪切;经10、50、100 ng/mL GM-CSF处理20 h,焦亡中性粒细胞比例分别降至总数的(7.52±0.53)%、(5.27±2.30)%、(0.64±1.11)%。结论IL-1β、IL-6对GSDME介导的中性粒细胞自发焦亡无影响,TNF-ɑ诱导中性粒细胞自发焦亡,IFN-γ、G-CSF和GM-CSF抑制中性粒细胞自发焦亡。
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关键词
细胞因子
中性粒细胞
焦亡
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Keywords
cytokines
neutrophils
pyroptosis
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分类号
R392.12
[医药卫生—免疫学]
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