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土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选
被引量：
5
1
作者
林灵
陈菲菲
+2 位作者
王以光
赫卫清
王相晶
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期426-430,共5页
目的构建土壤宏基因组文库并对格尔德霉素类I型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因进行初步筛选研究。方法直接提取土壤样品中宏基因组DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。根据格尔德霉素的I型PKS基因的保守序列设计引物,使用菌...
目的构建土壤宏基因组文库并对格尔德霉素类I型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因进行初步筛选研究。方法直接提取土壤样品中宏基因组DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。根据格尔德霉素的I型PKS基因的保守序列设计引物,使用菌落PCR方法直接筛选所获得的宏基因组文库。结果成功构建了土壤宏基因组文库,获得约6800个克隆子,其平均插入片段在25kb以上,覆盖至少170Mb的基因组信息。通过PKS基因筛选,获得了新的PKS基因片段。结论本文报道了土壤宏基因组文库的成功构建,并为利用宏基因组技术寻找新的聚酮类次级代谢产物的生物合成基因,以便于其异源表达或组合生物合成新的聚酮类次级代谢产物奠定基础。
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关键词
宏基因组文库
PKS
土壤
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职称材料
利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平
被引量：
8
2
作者
杨永红
赫卫清
+4 位作者
李瑞芬
戴剑漉
杨劭
王以光
武临专
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期826-830,共5页
目的提高螺旋霉素生物转化为4"-异戊酰螺旋霉素的水平,为构建以4"-异戊酰螺旋霉素为主要组分的必特螺旋霉素新一代基因工程菌提供指导。方法构建重组质粒pKC1139-e-ist-ist和pKC1139-ist-ist,它们分别含有5'-上游插入红...
目的提高螺旋霉素生物转化为4"-异戊酰螺旋霉素的水平,为构建以4"-异戊酰螺旋霉素为主要组分的必特螺旋霉素新一代基因工程菌提供指导。方法构建重组质粒pKC1139-e-ist-ist和pKC1139-ist-ist,它们分别含有5'-上游插入红霉素抗性基因强启动子PermE*的4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝,和4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝;将它们分别导入到变铅青链霉菌TK24中,比较它们对螺旋霉素的4"-异戊酰化能力。结果在加入终浓度为50μg/mL螺旋霉素时,变铅青链霉菌TK24[pKC1139-e-ist-ist]比变铅青链霉菌TK24[pKC1139-ist-ist]对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平提高近4倍。结论在变铅青链霉菌TK24中,PermE*可以增强4"-异戊酰基转移酶基因表达,明显提高对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平。
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关键词
螺旋霉素
4"-异戊酰基转移酶基因
变铅青链霉菌TK24
PermE＊
生物转化
必特螺旋霉素
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职称材料
题名
土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选
被引量：
5
1
作者
林灵
陈菲菲
王以光
赫卫清
王相晶
机构
东北农业大学
中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室
中国
医药
集团总公司四川抗菌素工业
研究所
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期426-430,共5页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(IMBF20060202)
文摘
目的构建土壤宏基因组文库并对格尔德霉素类I型聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因进行初步筛选研究。方法直接提取土壤样品中宏基因组DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。根据格尔德霉素的I型PKS基因的保守序列设计引物,使用菌落PCR方法直接筛选所获得的宏基因组文库。结果成功构建了土壤宏基因组文库,获得约6800个克隆子,其平均插入片段在25kb以上,覆盖至少170Mb的基因组信息。通过PKS基因筛选,获得了新的PKS基因片段。结论本文报道了土壤宏基因组文库的成功构建,并为利用宏基因组技术寻找新的聚酮类次级代谢产物的生物合成基因,以便于其异源表达或组合生物合成新的聚酮类次级代谢产物奠定基础。
关键词
宏基因组文库
PKS
土壤
Keywords
Metagenomic library
PKS
Soil
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平
被引量：
8
2
作者
杨永红
赫卫清
李瑞芬
戴剑漉
杨劭
王以光
武临专
机构
华中师范大学生命
科学
学院
中国医学科学院
/北京协和医学院
医药
生物技术
研究所
中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室
同联药业沈阳
抗生素
厂
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期826-830,共5页
基金
科技部"重大新药创制"科技重大专项(2008ZX09101-047)
文摘
目的提高螺旋霉素生物转化为4"-异戊酰螺旋霉素的水平,为构建以4"-异戊酰螺旋霉素为主要组分的必特螺旋霉素新一代基因工程菌提供指导。方法构建重组质粒pKC1139-e-ist-ist和pKC1139-ist-ist,它们分别含有5'-上游插入红霉素抗性基因强启动子PermE*的4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝,和4"-异戊酰基转移酶基因串连双拷贝;将它们分别导入到变铅青链霉菌TK24中,比较它们对螺旋霉素的4"-异戊酰化能力。结果在加入终浓度为50μg/mL螺旋霉素时,变铅青链霉菌TK24[pKC1139-e-ist-ist]比变铅青链霉菌TK24[pKC1139-ist-ist]对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平提高近4倍。结论在变铅青链霉菌TK24中,PermE*可以增强4"-异戊酰基转移酶基因表达,明显提高对螺旋霉素的4"-异戊酰化水平。
关键词
螺旋霉素
4"-异戊酰基转移酶基因
变铅青链霉菌TK24
PermE＊
生物转化
必特螺旋霉素
Keywords
Spiramycin
4＂-isovaleryltransferase gene（ist）
S.lividans TK24
PermE＊
Bioconversion
bitespiramycin
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
土壤宏基因组文库的构建及格尔德霉素类PKS基因的初步筛选
林灵
陈菲菲
王以光
赫卫清
王相晶
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用强启动子PermE^＊提高4＂-异戊酰基转移酶基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的4＂-异戊酰化水平
杨永红
赫卫清
李瑞芬
戴剑漉
杨劭
王以光
武临专
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
8
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