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2008年-2015年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株遗传进化分析
被引量：
2
1
作者
张硕
张倩
+6 位作者
顾小雪
徐琦
宋晓晖
王传彬
吴佳俊
刘金华
周智
《动物医学进展》
北大核心
2021年第10期1-8,共8页
对2008年-2015年分离的56个PRRSV毒株进行全基因测序和序列比对,并对主要易变区Nsp2、GP5和非编码区进行分析。全基因分析结果显示,56个PRRSV均为美洲型PRRSV,其中54个毒株为高致病性PRRSV变异株,另外2个为类NADC30 PRRSV。54个高致病性...
对2008年-2015年分离的56个PRRSV毒株进行全基因测序和序列比对,并对主要易变区Nsp2、GP5和非编码区进行分析。全基因分析结果显示,56个PRRSV均为美洲型PRRSV,其中54个毒株为高致病性PRRSV变异株,另外2个为类NADC30 PRRSV。54个高致病性PRRSV变异株之间的同源性为95.2%~99.9%,与高致病性PRRSV变异株代表毒株JXA1的同源性为97.2%~99.3%。2个类NADC30分离株之间的同源性为99.9%,与NADC30 PRRSV代表毒株NADC30的同源性为95.4%。主要易变基因分析结果显示,非结构蛋白Nsp2和结构蛋白GP5仍在不断变异中。54个PRRSV变异毒株中有48个PRRSV变异株在非结构蛋白Nsp2发生30aa的不连续缺失,此外有6个高致病性PRRSV变异株在Nsp2区域还发生了其他缺失(其中1株多缺失12个核苷酸,1株多缺失19个核苷酸,2株多缺失29个核苷酸,1株多缺失48个核苷酸,1株多缺失120个核苷酸)。2个类NADC30 PRRSV非结构蛋白Nsp2存在131个核苷酸的不连续缺失。大部分分离株在重要结构蛋白GP5发生aa突变,尤其是糖基化位点的位置和数量发生了不同程度的变化。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
分离株
遗传变异
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职称材料
PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立
被引量：
1
2
作者
李雷斌
李晓霞
+9 位作者
王睿男
周智
刘玉良
赵柏林
孙航
冯冰
陈玲
王传彬
李义平
孙雨
《中国动物检疫》
CAS
2022年第3期71-79,共9页
为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~7...
为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合表达质粒;通过优化大肠杆菌表达和蛋白纯化条件,免疫印迹鉴定GP5/M特异抗原,获得了可溶性的GP5/M中和表位融合蛋白。基于纯化的GP5/M中和表位融合抗原,建立了检测猪血清中PRRSV中和抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA方法对6种其他猪源病原阳性血清进行检测,结果均无交叉反应;敏感性试验显示,将血清中和试验鉴定的PRRSV阳性对照血清稀释到1:12800时仍呈阳性;重复性试验显示,批内重复变异系数为2%~10%,批间重复变异系数小于15%;符合性试验显示,同时用建立的间接ELISA方法和血清中和试验对420份临床血清样品进行检测,结果符合率为95.24%。结果表明,该方法操作简单、耗时短,敏感性、特异性、重复性及符合性均良好,具有较好的应用推广价值。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)
中和表位抗原
融合GP5/M
ELISA
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职称材料
题名
2008年-2015年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株遗传进化分析
被引量：
2
1
作者
张硕
张倩
顾小雪
徐琦
宋晓晖
王传彬
吴佳俊
刘金华
周智
机构
中国
农业大学农业部
动物
流行病学与人畜共患病重点
实验室
中国动物疫病预防控制中心国家/oie猪繁殖与呼吸综合征参考实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2021年第10期1-8,共8页
基金
“十三五”国家重点研发计划项目(2018YFD0500800)。
文摘
对2008年-2015年分离的56个PRRSV毒株进行全基因测序和序列比对,并对主要易变区Nsp2、GP5和非编码区进行分析。全基因分析结果显示,56个PRRSV均为美洲型PRRSV,其中54个毒株为高致病性PRRSV变异株,另外2个为类NADC30 PRRSV。54个高致病性PRRSV变异株之间的同源性为95.2%~99.9%,与高致病性PRRSV变异株代表毒株JXA1的同源性为97.2%~99.3%。2个类NADC30分离株之间的同源性为99.9%,与NADC30 PRRSV代表毒株NADC30的同源性为95.4%。主要易变基因分析结果显示,非结构蛋白Nsp2和结构蛋白GP5仍在不断变异中。54个PRRSV变异毒株中有48个PRRSV变异株在非结构蛋白Nsp2发生30aa的不连续缺失,此外有6个高致病性PRRSV变异株在Nsp2区域还发生了其他缺失(其中1株多缺失12个核苷酸,1株多缺失19个核苷酸,2株多缺失29个核苷酸,1株多缺失48个核苷酸,1株多缺失120个核苷酸)。2个类NADC30 PRRSV非结构蛋白Nsp2存在131个核苷酸的不连续缺失。大部分分离株在重要结构蛋白GP5发生aa突变,尤其是糖基化位点的位置和数量发生了不同程度的变化。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
分离株
遗传变异
Keywords
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
isolates
genetic variation
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立
被引量：
1
2
作者
李雷斌
李晓霞
王睿男
周智
刘玉良
赵柏林
孙航
冯冰
陈玲
王传彬
李义平
孙雨
机构
广西大学
动物
科学技术学院
中国
动物
疫病
预防控制中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2022年第3期71-79,共9页
基金
现代农业产业技术体系建设北京市创新团队项目(BAIC02-2021)。
文摘
为建立检测猪血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的间接ELISA方法,分析了PRRSV结构蛋白GP5和M的二级结构抗原指数、抗原性、亲水性、表面可及性以及潜在中和表位等参数,选取GP5的47~61、143~156和186~199位氨基酸,M蛋白的63~70、133~146和156~169位氨基酸作为免疫原,构建带接头序列的GP5/M中和表位融合表达质粒;通过优化大肠杆菌表达和蛋白纯化条件,免疫印迹鉴定GP5/M特异抗原,获得了可溶性的GP5/M中和表位融合蛋白。基于纯化的GP5/M中和表位融合抗原,建立了检测猪血清中PRRSV中和抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA方法对6种其他猪源病原阳性血清进行检测,结果均无交叉反应;敏感性试验显示,将血清中和试验鉴定的PRRSV阳性对照血清稀释到1:12800时仍呈阳性;重复性试验显示,批内重复变异系数为2%~10%,批间重复变异系数小于15%;符合性试验显示,同时用建立的间接ELISA方法和血清中和试验对420份临床血清样品进行检测,结果符合率为95.24%。结果表明,该方法操作简单、耗时短,敏感性、特异性、重复性及符合性均良好,具有较好的应用推广价值。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)
中和表位抗原
融合GP5/M
ELISA
Keywords
PRRSV
neutralizing epitope antigen
fusion GP5/M protein
ELISA
分类号
S851.3 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
2008年-2015年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株遗传进化分析
张硕
张倩
顾小雪
徐琦
宋晓晖
王传彬
吴佳俊
刘金华
周智
《动物医学进展》
北大核心
2021
2
在线阅读
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职称材料
2
PRRSV GP5和M抗原中和表位的融合表达与纯化以及间接ELISA检测方法的建立
李雷斌
李晓霞
王睿男
周智
刘玉良
赵柏林
孙航
冯冰
陈玲
王传彬
李义平
孙雨
《中国动物检疫》
CAS
2022
1
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