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AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达
被引量：
4
1
作者
丁银巧
张文杰
+5 位作者
张云霞
赵铁柱
孙明
遇秀玲
赵德明
田克恭
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第7期63-67,共5页
利用杆状病毒表达系统对AsiaⅠ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究AsiaⅠ型FMDVVP1蛋白功能及建立AsiaⅠ型FMDV血清学诊断方法奠定基础。采用PCR方法从pGEM-T-Easy-AsiaⅠ型VP1质...
利用杆状病毒表达系统对AsiaⅠ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究AsiaⅠ型FMDVVP1蛋白功能及建立AsiaⅠ型FMDV血清学诊断方法奠定基础。采用PCR方法从pGEM-T-Easy-AsiaⅠ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BacHTA-VP1再转入DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,然后转染Sf9昆虫细胞。PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,SDS-PAGE和Western-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5ku的VP1蛋白。将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出AsiaⅠ型口蹄疫病毒阳性血清。AsiaⅠ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础。
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关键词
AsiaⅠ型口蹄疫病毒
VP1基因
杆状病毒
真核表达
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职称材料
荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的应用
被引量：
11
2
作者
訾占超
亢文华
+1 位作者
马英
赵柏林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1057-1061,1065,共6页
布鲁氏菌病是重要的人兽共患病,早期感染的检测结果对治疗和康复具有重要意义。本文总结目前常用的布鲁氏菌病检测技术,阐述荧光偏振技术的基本原理及应用,并重点介绍荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的运用,以期为布鲁氏菌病的临床检测...
布鲁氏菌病是重要的人兽共患病,早期感染的检测结果对治疗和康复具有重要意义。本文总结目前常用的布鲁氏菌病检测技术,阐述荧光偏振技术的基本原理及应用,并重点介绍荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的运用,以期为布鲁氏菌病的临床检测和流行病学调查研究提供参考。
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关键词
荧光偏振
布鲁氏菌
检测
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职称材料
犬瘟热病毒捕获ELISA试剂盒的研究
被引量：
1
3
作者
张力
李宏
+1 位作者
李香
张玥
《畜牧兽医杂志》
2013年第6期107-109,112,共4页
建立犬瘟热病毒捕获ELISA，用于该病的快速诊断。方法采用犬抗CDV抗体包被96孔反应板，用以捕获样品中的CDV，再用CDV单克隆抗体和酶标羊抗鼠IgG检测被捕获的CDV抗原，经方阵试验，确立了抗原捕获ELISA的反应条件，并组装ELISA试剂盒。...
建立犬瘟热病毒捕获ELISA，用于该病的快速诊断。方法采用犬抗CDV抗体包被96孔反应板，用以捕获样品中的CDV，再用CDV单克隆抗体和酶标羊抗鼠IgG检测被捕获的CDV抗原，经方阵试验，确立了抗原捕获ELISA的反应条件，并组装ELISA试剂盒。结果用建立的ELISA方法，检测REOV、CPV2、USCCV、CAV-1、CAV-2病毒，均不发生交叉反应；检测犬的临床样本110份。
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关键词
抗原捕获ELISA
ELISA试剂盒
犬瘟热病毒
ELISA方法
单克隆抗体
CDV
快速诊断
反应条件
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职称材料
题名
AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达
被引量：
4
1
作者
丁银巧
张文杰
张云霞
赵铁柱
孙明
遇秀玲
赵德明
田克恭
机构
中国
农业大学
动物
医学院
中国动物疫病预防控制中心兽医诊断室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第7期63-67,共5页
基金
国家"十五"科技攻关计划"口蹄疫防治科技攻关"项目资助(2004BA519A-40)
文摘
利用杆状病毒表达系统对AsiaⅠ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究AsiaⅠ型FMDVVP1蛋白功能及建立AsiaⅠ型FMDV血清学诊断方法奠定基础。采用PCR方法从pGEM-T-Easy-AsiaⅠ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BacHTA-VP1再转入DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,然后转染Sf9昆虫细胞。PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,SDS-PAGE和Western-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5ku的VP1蛋白。将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出AsiaⅠ型口蹄疫病毒阳性血清。AsiaⅠ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础。
关键词
AsiaⅠ型口蹄疫病毒
VP1基因
杆状病毒
真核表达
Keywords
foot-and-mouth disease virus Asia Ⅰ
VP1 gene
Baculovirus
eukaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的应用
被引量：
11
2
作者
訾占超
亢文华
马英
赵柏林
机构
中国动物疫病预防控制中心兽医诊断室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1057-1061,1065,共6页
基金
北京市生猪产业技术体系创新团队资金(GWZJ-2009-05)~~
文摘
布鲁氏菌病是重要的人兽共患病,早期感染的检测结果对治疗和康复具有重要意义。本文总结目前常用的布鲁氏菌病检测技术,阐述荧光偏振技术的基本原理及应用,并重点介绍荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的运用,以期为布鲁氏菌病的临床检测和流行病学调查研究提供参考。
关键词
荧光偏振
布鲁氏菌
检测
Keywords
fluorescence polarization assay
Brucella
detection
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
犬瘟热病毒捕获ELISA试剂盒的研究
被引量：
1
3
作者
张力
李宏
李香
张玥
机构
榆林市饲料检测站
中国动物疫病预防控制中心兽医诊断室
农业部饲料监督检验测试
中心
(西安)
陕西省
动物
疫病
预防控制中心
出处
《畜牧兽医杂志》
2013年第6期107-109,112,共4页
文摘
建立犬瘟热病毒捕获ELISA，用于该病的快速诊断。方法采用犬抗CDV抗体包被96孔反应板，用以捕获样品中的CDV，再用CDV单克隆抗体和酶标羊抗鼠IgG检测被捕获的CDV抗原，经方阵试验，确立了抗原捕获ELISA的反应条件，并组装ELISA试剂盒。结果用建立的ELISA方法，检测REOV、CPV2、USCCV、CAV-1、CAV-2病毒，均不发生交叉反应；检测犬的临床样本110份。
关键词
抗原捕获ELISA
ELISA试剂盒
犬瘟热病毒
ELISA方法
单克隆抗体
CDV
快速诊断
反应条件
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达
丁银巧
张文杰
张云霞
赵铁柱
孙明
遇秀玲
赵德明
田克恭
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
荧光偏振技术在布鲁氏菌病检测中的应用
訾占超
亢文华
马英
赵柏林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
犬瘟热病毒捕获ELISA试剂盒的研究
张力
李宏
李香
张玥
《畜牧兽医杂志》
2013
1
在线阅读
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职称材料
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