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分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用被引量：2: 1; 作者许邹亮南文龙陈义平《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期98-101,共4页; 由于布鲁菌种型较多、宿主广泛、传播途径多样,因此有必要对布鲁菌进行准确的种型鉴别,以利于该病的快速诊断、流行病学分析,并采取科学有效的防控措施。分子生物学技术的不断发展为布鲁菌种型鉴定提供了愈来愈丰富的手段,并逐渐成为布... 展开更多; 关键词布鲁菌分子生物学技术种型鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法的建立被引量：26: 2; 作者许邹亮南文龙 +6 位作者周洁陆明哲郭玉广谭鹏飞毛开荣彭大新陈义平《中国动物检疫》 CAS 2011年第8期37-40,共4页; 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了布鲁氏菌可视化快速检测方法。针对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因保守区设计6条特异引物,反应前加入染料羟基萘芬蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,63℃恒温反应60min,根据HNB的颜色变化进行结果判定。分别... 展开更多; 关键词布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP) 可视化检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达被引量：2: 3; 作者罗飞陈义平 +5 位作者陆明哲彭大新周洁李宇琴徐宝娟南文龙《中国动物检疫》 CAS 2009年第12期27-28,36,共3页; 参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在... 展开更多; 关键词猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB 主要抗原表位原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立被引量：5: 4; 作者罗飞李宇琴 +1 位作者陈义平周洁《中国兽药杂志》 2011年第7期10-13,共4页; 用纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的gB-ELISA方法。最佳反应条件为:抗原包被浓度为3.15μg/mL,待检血清稀释度为1∶40。该方法对猪圆环病毒病、猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)... 展开更多; 关键词猪伪狂犬病毒抗体 gB-ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用被引量：2: 1; 作者许邹亮南文龙陈义平; 机构中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室扬州大学兽医学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期98-101,共4页; 基金十一五国家支撑计划(2006BAD06A12) 公益性行业(农业)项目(200903027); 文摘由于布鲁菌种型较多、宿主广泛、传播途径多样,因此有必要对布鲁菌进行准确的种型鉴别,以利于该病的快速诊断、流行病学分析,并采取科学有效的防控措施。分子生物学技术的不断发展为布鲁菌种型鉴定提供了愈来愈丰富的手段,并逐渐成为布鲁菌遗传溯源研究的重要工具。MLVA和real-time PCR技术因具有重复性好、分辨率高等优势,成为布鲁菌种型鉴定研究关注的热点。多重PCR、RFLP、RAPD和REP等技术也在布鲁菌种型鉴定中得到广泛应用。为了解分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用现状,对相关研究进行了综述。; 关键词布鲁菌分子生物学技术种型鉴定; Keywords Brucella molecular biology technique species and biovars identification; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法的建立被引量：26: 2; 作者许邹亮南文龙周洁陆明哲郭玉广谭鹏飞毛开荣彭大新陈义平; 机构中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室扬州大学兽医学院中国兽医药品监察所; 出处《中国动物检疫》 CAS 2011年第8期37-40,共4页; 基金十一五国家支撑计划(2006BAD06A12); 文摘应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了布鲁氏菌可视化快速检测方法。针对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因保守区设计6条特异引物,反应前加入染料羟基萘芬蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,63℃恒温反应60min,根据HNB的颜色变化进行结果判定。分别评价所建立LAMP方法的特异性和灵敏性,并对60份牛布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBT)阳性血清样本,经LAMP和B4/B5-PCR方法进行平行检测。结果显示,本方法最低检出限约为17fg布鲁氏菌基因组DNA。本方法特异性良好,布鲁氏菌反应管均出现特异性LAMP扩增反应,而猪大肠杆菌K99、巴氏杆菌C48-1、猪链球菌ST171、绿脓杆菌等对照组均未出现扩增。针对60份RBT阳性血清的平行检测结果显示,LAMP和B4/B5-PCR这两种方法间的结果符合率为85.0%。B4/B5-PCR检测为阳性的43份样品,经本方法检测全部为阳性;B4/B5-PCR检测为阴性的17份样品,经本方法检测,9份为阳性,8份为阴性。LAMP的敏感性高于B4/B5-PCR方法。实验表明,本文所建立的基于颜色判定的布鲁氏菌LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于基层兽医部门进行布鲁氏菌的快速检测。; 关键词布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP) 可视化检测; Keywords Brucella loop-mediated isothermal amplification （LAMP） visual detection; 分类号 S852.614 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达被引量：2: 3; 作者罗飞陈义平陆明哲彭大新周洁李宇琴徐宝娟南文龙; 机构中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室扬州大学兽医学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 2009年第12期27-28,36,共3页; 基金 "十一五"国家科技支撑项目(2006BAD6A13); 文摘参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在。BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%。利用His亲和层析方法得到了纯化的表达产物。Western blotting结果显示,重组蛋白能与阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原反应原性,可以作为检测用抗原。; 关键词猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB 主要抗原表位原核表达; Keywords pseudorabies virus envelope glycoprotein gB major epitope domain prokaryotic expression; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立被引量：5: 4; 作者罗飞李宇琴陈义平周洁; 机构中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室扬州大学兽医学院湖南九鼎科技(集团)有限公司; 出处《中国兽药杂志》 2011年第7期10-13,共4页; 基金 "十一五"国家科技支撑项目(2006BAD6A13); 文摘用纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的gB-ELISA方法。最佳反应条件为:抗原包被浓度为3.15μg/mL,待检血清稀释度为1∶40。该方法对猪圆环病毒病、猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和SPF猪阴性血清检测呈阴性反应。批间、批内试验变异系数均不超过8%。用该方法与HerdChek ELISA试剂盒同时对119份血清进行了平行检测,其相对敏感性、特异性和符合率分别为:75%、80.7%和79%。试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病毒血清抗体检测。; 关键词猪伪狂犬病毒抗体 gB-ELISA; Keywords swine pseudorabies virus antibody gB-ELISA; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	分子生物学技术在布鲁菌种型鉴定上的应用	许邹亮南文龙陈义平	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法的建立	许邹亮南文龙周洁陆明哲郭玉广谭鹏飞毛开荣彭大新陈义平	《中国动物检疫》 CAS	2011	26	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达	罗飞陈义平陆明哲彭大新周洁李宇琴徐宝娟南文龙	《中国动物检疫》 CAS	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立	罗飞李宇琴陈义平周洁	《中国兽药杂志》	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料